HPLC法测定大鼠血浆、微粒体中非那西丁与其代谢物含量及其应用

<正>细胞色素P450 1A2亚家族是近年来药物代谢研究领域的热点之一,与许多药物的相互作用有关[1]。非那西丁是CYP1A2酶的特异性底物,被广泛选择作为底物用于体内外测定酶活性[2]。本研究建立大鼠血浆、微粒体中非那西丁与其代谢物对乙酰氨基酚含量的HPLC测定方法,并对血浆样品进行方法学考察,为进一步确证药物及化学异物对CYP1A2酶活性的影响提供可靠的方法学基础。同时,应用所建立的方法以体内、体外方式评价了甘草水提液对     

白首乌C-21甾体总苷对人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与凋亡的影响

该研究旨在探讨白首乌C-21甾体总苷(TCSG)对人肝癌Hep G2细胞体外增殖、侵袭与凋亡的抑制作用及相关分子机制。实验分为空白对照组,TCSG 25,60,150 mg·L~(-1)组,阳性药物顺铂(DDP 1.33 mg·L~(-1))组。经过不同质量浓度的TCSG处理细胞后,采用CCK-8法检测TCSG对人肝细胞L-02与肝癌Hep G2细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及线粒体膜电位的变化;Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡形态的变化;Transwell小室模型分析TCSG对细胞迁移与侵袭能力的影响;Western blot法检测Hep G2细胞中Bcl-2,Bax,caspase 3,cleaved caspase 3及Cyt C(线粒体外)蛋白表达。与对照组相比,TCSG作用Hep G2细胞48 h后能显著抑制Hep G2细胞增殖,且呈浓度依赖性(P0.01),但对L-02肝细胞的增殖没有影响;经TCSG处理Hep G2细胞48 h后,细胞产生核皱缩,碎裂并呈半月形或圆形等凋亡形态;经TCSG处理后,Hep G2细胞迁移与侵袭能力显著下降,细胞G0/G1期阻滞(P0.01),线粒体膜通透性升高,线粒体膜电位显著降低(P0.01),凋亡率明显增高(P0.01);Western blot结果显示,TCSG处理Hep G2细胞48 h后,细胞内Bax,caspase 3,cleaved caspase 3,Cyt C蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),Bcl-2蛋白表达显著下降(P0.05,P0.01),Bax/Bcl-2比值逐渐增大(P0.01)。结果表明TCSG能明显抑制Hep G2细胞的增殖,迁移与侵袭,诱导Hep G2细胞凋亡,这可能与阻滞细胞周期进程,激活线粒体途径进而调控凋亡相关蛋白的表达有关。     

薄荷非挥发性提取部位的药理活性研究

目的观察薄荷非挥发性提取部位的不同药理活性.方法以D-氨基半乳糖造成小鼠急性肝损伤模型,以血清AST、ALT水平为指标,观察薄荷不同提取部位的保肝作用.检测不同时段大鼠胆汁流量,观察不同提取部位对大鼠胆汁分泌的影响.采用体内接种肿瘤,观察不同提取部位对小鼠肉瘤S180及Lewis肺癌的抑制作用.结果薄荷石油醚提取部位有明显的保肝利胆功效,而水提部位有一定的抗肿瘤作用.结论薄荷非挥发性提取部位有明显的药理作用,且不同提取部位有不同的活性.     

瓜蒌薤白汤抗心肌缺血有效部位的筛选

目的：筛选瓜蒌薤白汤抗心肌缺氧缺血的有效部位。方法：采用小鼠常压耐缺氧模型、异丙肾上腺素（ISO）所致大鼠急性心肌缺血模型，观察瓜蒌薤白汤醇提物各萃取部位对小鼠常压缺氧存活时间、心肌缺血模型大鼠心电图T波高度（mv）、ST段偏移（mv）和模型动物血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK—MB）含量的影响。结果：瓜蒌薤白汤醇提物的4个萃取部位中正丁醇部位可明显延长小鼠常压缺氧存活时间，降低T波高度，减少ST段偏移，降低模型大鼠血清中LDH、CK—MB．结论．瓜蒌薤白汤的正丁醇部位为其抗心肌缺血的有效部位．     

黄虎喷雾剂治疗软组织损伤的实验研究

目的 观测黄虎喷雾剂局部外敷给药后对动物局部软组织损伤的改善作用. .方法 采用击伤法造成动物软组织损伤模型,观测供试品外敷给药后对动物局部损伤改善程度并进行病理组织学检查.结果 黄虎喷雾剂具有减轻创伤早期出血和炎症性渗出,促进淤血及坏死组织吸收的功能.结论 黄虎喷雾剂对动物软组织损伤模型有一定的治疗作用.     

瘰疬清胶囊药效学研究

目的 观察瘰疬清胶囊对动物的止咳、抗炎及提高机体免疫力的作用.方法 ①小鼠灌胃瘰疬清胶囊16.0,8.0和4.0 g生药/kg后,采用浓氨水喷雾法进行止咳实验,观察动物咳嗽潜伏期及咳嗽次数.②大鼠灌胃瘰疬清胶囊8.0,4.0和2.0 g生药/kg的后,采用大鼠慢性炎症琼脂肉芽肿法,观察肉芽肿湿重及抑制率的变化,采用角叉菜胶致大鼠足肿胀法,测定大鼠足肿胀度及足肿胀抑制率.③注射环磷酰胺(CY)造成小鼠免疫功能低下模型,观察灌胃瘰疬清胶囊16.0,8.0和4.0 g生药/kg后,小鼠免疫功能的改变.结果 瘰疬清胶囊能明显延长小鼠咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数,对大鼠慢性炎症琼脂肉芽肿具有一定的抑制作用,对角叉菜胶致大鼠足肿胀具有一定的抑制作用,瘰疬清胶囊能明显对抗CY作用,提高免疫抑制小鼠的免疫功能.结论 瘰疬清胶囊对实验动物具有一定的止咳、抗炎及提高机体免疫力的作用.     

肤宁冲剂对大鼠Ⅰ型过敏反应的趋化细胞因子的影响

肤宁冲剂(荆芥、蝉蜕等)的处方来源于江苏省中西医结合医院名老中医的经验方,是主治过敏性皮肤病的纯中药制剂。本实验主要研究肤宁冲剂对大鼠Ⅰ型过敏反应的趋化细胞因子的影响,初步探讨其免疫学作用机理。1实验材料1.1SD大鼠:清洁级,体重180～220g,♀♂各半,健康,购于上海斯莱克实验动物有限责任公司,合格证号:SCXK(沪)2002-0010;1.2肤宁冲剂:棕色浸膏,含5.9g生药/mL,批号:20050801,由本院制剂研究室提供;1.3醋酸泼尼松:含5mg/片,批号20010702,南京第二制药厂生产;1.4卵白蛋白:上海伯奥公司生物科技有限公司,批号0311047;1.5大鼠白介素…     

排石胶囊对肾结石模型大鼠的防治作用

目的观察排石胶囊对肾结石模型大鼠的防治作用，初步探讨其作用机制。方法采用乙二醇加氯化铵法制作大鼠肾结石模型，观察排石胶囊同步给药后对大鼠24h排尿量、肾脏器系数、肾组织病理学、血清尿素氮、肌酐、钙含量及肾组织钙含量、24h尿钙分泌量影响。结果排石胶囊可显著增加24h排尿量、降低大鼠的肾组织肿胀（P〈0．05～0．01），明显减少肾组织内草酸钙结晶、肾小管扩张程度、坏死及炎性渗出等（P〈0．01～0．001），显著降低血清尿素氮（BUN）、肌酐（Crea）水平（P〈0．05～0．001），显著降低肾组织钙含量和24h尿钙分泌量（P〈0．05）。结论排石胶囊可增加排尿量、促进肾和血液中Ca^2＋排泄和代谢，减轻大鼠肾组织因结石引起的损伤和病变，减少肾内草酸钙结晶，从而防治肾结石。     

金匮肾气丸防治小鼠肾阳虚的实验研究

目的:观察金匮肾气丸(熟地黄、炒山药、山茱萸、泽泻、茯苓、附子、肉桂)对羟基脲所致小鼠肾阳虚的影响.方法:以小鼠皮温、自主活动、负重游泳时间和耐冻试验死亡率为指标,观察小鼠的活动变化;以血清中SOD、GSH-PX、MDA水平为指标,观察脂质过氧化情况;测定血清中睾酮含量,观察动物的性激素变化.结果:金匮肾气丸能明显升高羟基脲所致肾阳虚小鼠的皮温、增加自主活动次数、延长负重游泳时间、增加耐寒试验小鼠的生存率,并使血清中SOD、GSH-PX活力增强、MDA含量降低、血清中睾酮含量亦明显升高,而且高剂量组小鼠的死亡率明显低于模型组.结论:本品对羟基脲所致的小鼠肾阳虚模型有明显防治作用.     

小儿咳喘宁颗粒对豚鼠过敏性哮喘模型的影响

目的研究小儿咳喘宁颗粒对过敏性哮喘豚鼠的作用。方法用卵蛋白(OVA)复制豚鼠哮喘模型,观察小儿咳喘宁颗粒对模型动物哮喘潜伏期、血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、肺组织病理学的影响。结果小儿咳喘宁颗粒可明显延长哮喘潜伏期(P<0.05,P<0.001)、提高模型豚鼠血清中SOD活性(P<0.05),改善模型动物肺组织病理学改变。结论小儿咳喘宁颗粒对过敏性哮喘模型豚鼠有一定的保护作用。