多西他赛对复发转移性乳腺癌免疫功能的影响

目的：探讨多西他赛化疗前、化疗2周期评价疗效时复发转移性乳腺癌（MBC）患者外周血淋巴细胞亚群比率的变化及影响因素。方法应用流式细胞仪检测34例行多西他赛一线化疗的复发MBC患者化疗前、化疗2周期评价疗效时外周血淋巴细胞亚群[CD3+T淋巴细胞、CD3+/CD4+T淋巴细胞、CD3+/CD8+T淋巴细胞、CD3－/CD16+56+自然杀伤细胞（NK）、CD3+/CD16+56+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、CD4+/CD25+调节性T细胞（Treg细胞）、CD8+/CD28－T淋巴细胞和CD8+/CD28+T淋巴细胞]比率,并进一步分析患者临床病理因素对于外周血淋巴细胞亚群变化的影响。结果34例患者化疗后CD3+总T淋巴细胞、CD3+/CD4+T淋巴细胞及CD19+B淋巴细胞比率均较化疗前下降（P=0.002、0.044、0.006）,下降平均比率分别为2.2%、4.7%、3.1%。中位年龄﹥54岁的患者CD19+B淋巴细胞下降比率较中位年龄≤54岁的患者小（P=0.031）;中位OS﹥3.6个月的患者CD3+总T淋巴细胞下降比率较中位OS≤33.6个月的患者小（P=0.038）。结论多西他赛化疗后MBC患者外周血总T、B淋巴细胞比率下降,免疫功能降低,而相对保留较好的T淋巴细胞免疫功能的患者可能有更好的生存获益。     

肿瘤源性外切体负载的间充质干细胞抗肿瘤活性的实验研究

目的:分离并纯化BALB/c小鼠肝癌恶性腹水来源的外切体及同基因小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs);将外切体负载经γ干扰素(IFN-γ)刺激活化的间允质干细胞,探讨其抗肝癌细胞活性改变.方法:利用超滤及密度梯度离心法分离并纯化BALB/c小鼠肝癌恶性腹水来源的外切体;利用贴壁培养联合免疫磁珠阴性分选法体外培养同基因小鼠骨髓间充质干细胞;外切体负载活化的间充质干细胞与小鼠肝癌H22细胞共孵育,72 h后观察H22细胞增殖状态.结果:外切体负载的IFN-γ刺激活化的间允质干细胞与小鼠肝癌H22细胞共孵育72 h后,活化组H22细胞增殖速度明显低于对照组.结论:负载肿瘤源性外切体的间充质干细胞抗肝癌细胞活性明显增强,间充质干细胞联合肿瘤源性外切体有可能成为一种更为有效的外切体疫苗诱导抗肿瘤效应.     

小鼠骨髓间充质干细胞接种小鼠肝癌组织诱发肝癌细胞坏死

目的:观察小鼠骨髓间充质干细胞(mesenehymal stem cells,MSCs)移植对H22原位肝癌移植小鼠生存期的影响,探讨小鼠骨髓MSCs在肝癌微环境中是否向肝细胞分化和可能的抗肿瘤机制.方法:体外利用贴壁培养法联合免疫磁珠阴性分选CD45-、CD11b-细胞法制备BALB/c小鼠骨髓MSCs,流式细胞仪行细胞表面标志鉴定,采用绿色荧光染料羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯[5(6)-carboxyfluoresce indiacetate N-succinimidyl ester,CFSE]对其标记后备用.随机取12只8周龄BALB/c小鼠,肝脏原位注射法建立小鼠H22原位肝癌移植模型,建模1周后随机分为MSCs移植组和对照组,开腹亢视下分别注射入肝癌组织和/或同一肝叶的正常肝组织内.观察荷瘤小鼠生存期,利用免疫荧光法和激光共聚焦技术检测小鼠肝组织白蛋白表达,并行常规组织学检查.结果:MSCs移植组平均生存期为25 d(95%可信区间:22～28 d),对照组平均生存期为21 d(95%可信区间:20～23 d),但组间生存期差异无统计学意义(P=0.0713).激光共聚焦显微镜观察到在肿瘤边缘和瘤体内可见CFSE标记细胞有白蛋白表达;另与对照组相比,MSCs移植组肝癌组织内出现大片坏死.结论:小鼠骨髓MSCs可在原位肝癌移植小鼠模型的肝脏定植,并且能分化为具有肝细胞功能的肝细胞样细胞,同时可能诱发肿瘤细胞坏死,机制有待进一步研究.     

小鼠原位移植性肝癌模型的建立及其磁共振表现

目的建立一种小鼠原位移植性肝癌模型,观察其磁共振表现。方法先建立H22腹水瘤小鼠模型,抽取癌性腹水,制备H22小鼠肝癌细胞悬液,然后开腹直视下分别将0.02ml的H22细胞悬液(5×105)注入20只BALB/c小鼠的肝实质内。MRI观察肿瘤体积及其影像学表现,取肿瘤标本行病理学检查。留取10只荷瘤小鼠观察自然生存期。结果肝的原位成瘤率为100%(20/20),肿瘤自发消退率为0(0/20),荷瘤小鼠自然生存期为18~28天,平均为21.7±1.1天。MRI检查术后7天肿瘤平均体积为(7.76±1.33)mm3;术后14天肿瘤平均体积为(126.31±42.03)mm3;肿瘤病灶在T1WI上呈低信号或等信号,在T2WI上呈高信号。病理切片证实肝脏成瘤。结论成功建立BALB/c小鼠原位移植性肝癌模型;MRI是一种可用于发现、追踪小鼠原位移植性肝癌模型的无创监测手段。     

复发转移性乳腺癌患者血浆miRNA表达水平与临床病理特征、化疗疗效及预后关系的研究

目的：探讨血浆中miR-16、miR-34a、miR-200a、miR-375、miR-451化疗前、后表达水平的变化与乳腺癌临床病理特征、化疗疗效及预后之间的关系。方法选取复发转移性乳腺癌患者79例,采用GenEx ver-sion6软件、Normfinder软件和Genorm软件确定本实验的内对照,采用实时荧光定量PCR法检测患者化疗前及化疗2个周期时的血浆miRNA表达水平,并分析化疗前、后表达水平与患者临床病理特征、化疗疗效及预后的关系。结果 miR-34a为相对表达最稳定的内对照。血浆miR-451高表达的患者激素受体（hormone receptor, HR）阳性率显著高于低表达者（P=0.031）,分别为84.2%和62.5%。血浆miR-200a化疗后表达变化与客观缓解率（objective response rate,ORR）显著相关（P=0.032）,miR-200a化疗后表达升高者的ORR显著高于降低者,分别为57.9%和29.3%。血浆miR-200a化疗后表达水平升高组的无进展生存时间（progression-free survival,PFS）与降低组相比,组间差异具有统计学意义（P=0.009）,分别为10.3个月和5.2个月。miR-16、miR-200a、miR-375和miR-451表达水平及化疗后变化对总生存时间（overall survival,OS）均无显著影响。结论血浆miRNA化疗前、后表达水平对复发转移性乳腺癌患者临床病理特征、化疗疗效及预后有一定的预测价值。     

真实世界吡咯替尼治疗HER2阳性转移性乳腺癌的疗效及安全性

目的 评价真实世界中口服吡咯替尼治疗表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性转移性乳腺癌的疗效和毒副反应.方法: 回顾性分析72例接受以口服吡咯替尼为治疗基础的HER2阳性转移性乳腺癌患者.结果: 72例HER2阳性转移性乳腺癌患者中69例(95.8%)在复发转移阶段和/或(新)辅助治疗阶段曾行抗HER2靶向治疗;61例(84.7%)在复发转移阶段接受过抗HER2靶向治疗药物,包括曲妥珠单抗56例(77.8%),拉帕替尼36例(50.0%),T-DM1 4例(5.6%).72例患者中接受吡咯替尼联合化疗(±曲妥珠单抗)62例(86.1%),吡咯替尼联合内分泌治疗(±曲妥珠单抗)6例(8.3%),吡咯替尼(±曲妥珠单抗)4例(5.6%).72例患者均可评价疗效,其中完全缓解1例(1.4%),部分缓解18例(25.0%),疾病稳定41例(56.9%),疾病进展12例(16.7%).客观缓解率(完全缓解+部分缓解)为26.4%,中位无进展生存期(progression free survival, PFS)为7.6个月(95%CI: 5.5~9.7个月).36例曾接受过拉帕替尼治疗的患者中,吡咯替尼治疗的中位PFS为7.9个月(95%CI: 4.1~11.7个月), 15例脑转移患者中,吡咯替尼治疗的中位PFS为6.0个月(95%CI: 2.2~9.8个月).吡咯替尼相关的主要毒副反应为腹泻,共57例(79.2%),1~2级者48例(66.7%),3级者9例(12.5%).结论: 以吡咯替尼为基础的方案能够有效治疗HER2阳性转移性乳腺癌,包括拉帕替尼治疗失败及脑转移的患者,不良反应可耐受.     

妊娠相关乳腺癌33例临床病理特征及预后分析

目的：分析妊娠相关乳腺癌的临床病理特征、治疗及预后。方法回顾性分析33例妊娠相关乳腺癌患者的临床资料,总结其临床诊治特点、病理特征、组织分型及预后,并结合国内外相关文献分析其发病机制及临床特征。结果33例妊娠相关乳腺癌诊断时中位年龄30岁（24～38岁）,Ⅰ期及Ⅱ期者占27.3%（9/33）,Ⅲ期占63.6%（21/33）,Ⅳ期占9.1%（3/33）;伴腋窝淋巴结转移者占78.8%（26/33）,28例手术患者中pN3者占53.6%（15/28）。浸润性导管癌占87.9%（29/33）,浸润性小叶癌占6.1%（2/33）,其他浸润癌占6.1%（2/33）。激素受体阳性者占54.5%（18/33）,三阴性乳腺癌占24.2%（8/33）,HER2表达型占21.2%（7/33）。1例于妊娠期接受新辅助化疗,足月生产,胎儿健康。中位随访时间32个月（9～142个月）,28例手术患者中位无病生存期16.7个月（0.9～57.9个月）,中位总生存期68.1个月（8.8～142.1个月）。结论妊娠相关乳腺癌的诊断及治疗常被延误,诊断时腋窝淋巴结转移多且分期晚,应对妊娠及哺乳期间的乳腺肿块引起重视,争取早诊断早治疗。     

176例HER2阳性乳腺癌首发转移部位的分析

目的：分析176例HER2阳性乳腺癌患者首发转移部位与分子类型的关系,帮助判断HER2阳性乳腺癌治疗和随访策略。方法回顾性分析176例HER2阳性复发转移乳腺癌患者的临床资料,HER2阳性定义为免疫组化+++,或FISH扩增,病理为浸润性导管癌,分析术后首次复发转移的分布情况。结果176例患者中,中位年龄50岁（范围31~76岁）;首发肝转移占38.1%,其中单发肝转移占18.8%;肺转移29.0%,其中单发肺转移11.4%;肝和肺转移之间差异有统计学意义（P=0.045）;淋巴结转移42.6%（包括锁骨上下淋巴结、腹腔淋巴结、纵隔淋巴结等）,其中单发淋巴结转移19.9%;骨转移25.1%,其中单发骨转移6.3%;胸壁复发14.3%,包括仅胸壁复发的8.0%;含脑转移的4例（2.3%）;还有一些少见部位转移：卵巢转移1例,子宫转移1例。首发内脏转移占59.7%,首发即多部位转移的占34.7%。结论 HER2阳性乳腺癌转移有其特殊性,内脏和淋巴结转移多见,内脏转移中肝转移更常见。所以在辅助治疗后的随访中,除了要关注淋巴结的状况外,还要关注内脏的检查,尤其是肝和肺。同时也间接地说明不同的分子类型转移的方式是不同的,所以术后辅助化疗也应该考虑器官转移的特殊性,采取相对应的药物。