基于外泌蛋白质组的酿酒酵母信号肽元件的分析及鉴定

目的分析鉴定酿酒酵母细胞内源性地促进重组蛋白外泌表达的信号肽元件,并应用于重组蛋白的高效合成。方法利用生物信息学软件SignalP4.1、Phobius、Wolf Psort0.2和ProP1.0对已报道的酿酒酵母外泌蛋白质组所对应的信号肽进行计算分析,确定目标信号肽功能元件;再构建融合表达载体,转化酵母细胞,对获得的阳性克隆在摇瓶培养条件下外泌蛋白的表达进行测定验证。结果通过生物信息学分析,从酿酒酵母外泌蛋白质组中确定了16个含有prepro区的信号肽功能元件,以敲除外切β-(1,3)-葡聚糖酶1(EXG1)基因的酿酒酵母W303-1b/(35)ES为宿主菌,采用酵母α-交配因子的信号肽功能元件作为对照,由EXG1的信号肽功能元件引导外泌的融合蛋白活性是α-交配因子的3倍。结论组合外泌蛋白质组和生物信息学分析的研究策略可以快速准确地分离鉴定促进异源蛋白分泌表达的信号肽功能元件,可应用于生物活性蛋白的高效表达。     

β—七叶皂甙钠对脊髓继发性损伤的保护作用

目的：观察β—七叶皂甙钠(Sodium Aescinate，SA)对脊髓继发性损伤的保护作用。方法：参考NystrOem方法建立大鼠脊髓压迫伤模型(T8～9)，将动物随机数字表法分为假手术组、模型组、SA组、甲泼尼龙(MP)组。应用免疫组化和图像定量分析法观察脊髓损伤后天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(easpase)-3蛋白的表达，测定不同药物组超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛含量的变化。术后1，2周联合行为学评分(CBS)观察实验动物神经功能恢复情况。结果：假手术组有少量散在easpase-3蛋白的表达，脊髓损伤模型组caspase-3蛋白阳性细胞增多，SA组和MP组阳性细胞数均低于模型组，两治疗组间比较无显性差异。SA组脊髓组织丙二醛含量明显低于各时相点模型组，SOD活性显增高，与MP组比无显性差异。CBS评分SA组明显增加。结论：SA可以下调easpase-3蛋白的表达，抑制细胞凋亡，缓解脊髓损伤后的脂质过氧化，从而起到脊髓保护作用。     

胫骨假体的放置对全膝置换术的影响

目的：探讨人工全膝关节置换术中胫骨假体放置的位置与疗效的关系。方法：回顾性总结和分析我院行全膝置换术的12例患者手术前后疗效。结果：按照Knee-society-scores系统及HSS系统评价，术后在疼痛、关节功能及活动度等方面均有明显的改善。结论：人工全膝关节置换术是治疗严重膝关节疾病的切实有效方法，但应注意胫骨假体的正确放置以减少胫骨假体的松动。     

非甾体类抗炎药在皮肤科的应用

非甾体类抗炎药(NSAIDs)是临床各科广泛应用的药物。除用于风湿性疾病外,也用于其它炎症性疾病。皮肤有许多炎症性疾病,因而NSAIDs在皮肤科临床的应用将具有一定的前景,且在某些情况下可能代替类固醇激索,值得重视。     

实施医院分级管理加强护理基础质量

我院是一所综合性医院,有编制床位600张,开放床位700余张,有病房、门诊、手术室、消毒供应室、产婴房、急诊科共25个护理单元。全院共有275名护理人员:副主任护师1名,主管护师49名,护师107名,     

膝关节置换术中胫骨假体点、线、面放置与术后膝关节功能恢复的关系

背景：全膝置换术(total knee anhroplasty，TKA)中熟练掌握胫骨假体置放的正确位置，是术后患者膝关节功能恢复的重要影响因素。目的：探讨人工全膝关节置换术中胫骨假体放置的点、线、面定位及其相互关系，以提高手术后患肢膝关节功能和关节稳定性。设计：前后对照研究。单位：一所大学医院骨科的病房。对象：1999-05／2004-09徐州医学院附属医院骨科收治的严重骨关节病及类风湿性关节炎需行膝关节置换患者12例，男4例，女8例；双侧膝置换1例，单侧置换11例；左膝关节4个，右膝关节9个。方法：按标准手术方法手术，着重胫骨假体的放置兼顾点、线、面定位及其相互关系。于手术前后进行膝关节侧方稳定性评估和HSS膝关节功能系统评价。主要观察指标：①患者手术前后膝关节侧方稳定性。②膝关节功能系统评分(包括疼痛、功能、活动范围、肌力、屈曲畸形和稳定性)。③X射线观察结果。结果：12例按照Knee-Society-Scores标准KSS系统评价，术前轻度侧方不稳3例，中度不稳7例，严重不稳2例；术后仅轻度侧方不稳1例，中重度不稳者未见。按照HSS系统评价术前评分平均为41分，术后随访时评分平均为89分，术后优良率达91．7％(11／12)。结论：TKA注意胫骨假体的点、线、面定位及其相互关系，可以增强膝关节稳定性，明显改善患者疼痛、关节功能及关节活动度。     

显微外路和传统外路手术治疗视网膜脱离的临床比较

目的：观察显微外路和传统外路手术治疗裂孔源性视网膜脱离的疗效。
　　方法：裂孔源性视网膜脱离患者46例46眼,其中26例行显微外路视网膜脱离手术(显微组),20例行传统外路视网膜脱离手术(传统组),由同一手术者完成。回顾分析其临床资料,对比两组的临床情况及疗效。
　　结果：显微组和传统组患者手术方式选择、冷凝反应、裂孔封闭情况和一次手术视网膜复位情况的差异均无统计学意义(P>0.05)。显微组患者术后1mo的最佳矫正视力情况较术前改善,其术后视力提高率较对照组高(P<0.05)。结论：显微外路视网膜脱离手术与传统外路视网膜脱离手术治疗裂孔源性视网膜脱离的手术效果相近,显微外路视网膜脱离手术在改善患者视力方面略有优势。     

miR-486-5p通过抑制端粒酶活性促进人骨髓间充质干细胞衰老

目的:研究年龄相关microRNA-486-5p(miR-486-5p)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)衰老的调控作用。方法:通过microRNA芯片和real-time PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-486-5p表达的影响;通过转染miR-486-5p模拟物或抑制物,过表达miR-486-5p或抑制其表达;用β-半乳糖苷酶染色检测miR-486-5p对h MSCs衰老的影响;通过siRNA研究沉默信息调节因子1(SIRT1)对h MSCs端粒酶逆转录酶(TERT)、端粒酶活性及衰老的影响。结果:随供体年龄增加,h MSCs中miR-486-5p的表达增加。过表达miR-486-5p可促进h MSCs衰老。相反,抑制miR-486-5p的表达可减少h MSCs的衰老。SIRT1及TERT随供体年龄增加而表达下降,直接抑制SIRT1的表达可减少TERT表达,抑制端粒酶活性,促进细胞衰老。同时抑制miR-486-5p和SIRT1的表达,使miR-486-5p失去对h MSCs端粒酶活性及衰老的调控作用。结论:miR-486-5p通过抑制SIRT1,减少h MSCs端粒酶活性,促进h MSCs衰老。     

逍遥散干预慢性应激焦虑状态概述

慢性应激焦虑状态的病理机制与肝失疏泄、气郁不畅密切相关。逍遥散是疏肝解郁的经典方,临床上多采用逍遥散原方或化裁方来改善焦虑、抑郁等情绪障碍。逍遥散的作用机制可能是通过调节海马、杏仁核、下丘脑-垂体-肾上腺轴、免疫功能紊乱来发挥疏肝解郁的功效,其中杏仁核中的促肾上腺皮质激素释放因子1(CRF1)受体及受体后信号通路介导了慢性应激损伤的作用机制,用其来探讨逍遥散的作用机制具有可行性,有助于明确逍遥散改善慢性应激焦虑状态的作用机制。     

亚麻籽对运动训练大鼠睾酮及相关激素含量和抗运动疲劳能力的影响

目的:研究亚麻籽对运动训练大鼠睾酮及相关激素含量和抗疲劳能力的影响。方法:以大强度耐力训练大鼠为模型,55只42 d龄雄性SPF级Wistar大鼠为对象,以数字随机分组法分为5组:静止组(C组)、运动组(M组)、运动+亚麻籽(FM)Ⅰ组(FMⅠ组),运动+亚麻籽Ⅱ组(FMⅡ组),运动+亚麻籽Ⅲ组(FMⅢ组),各组均为10只。每天ig 1次,亚麻籽组剂量分别为0.75,1.5,4.5 g·kg-1,ig体积为5 m L·kg-1,C,M组ig等量生理盐水。力竭游泳训练42 d后,分别测定各组大鼠体重、力竭游泳时间和血清睾酮等相关生化指标。结果:体重M组C组(P0.05);FM各组体重均M组(P0.05),且FM组间无显著差异。力竭游泳时间,M组与C组无明显差异;FM各组明显长于M组(P0.01)。血清睾酮水平,M组低于C组(P0.01);FM各组均高于M组(P0.01),分别为(4.83±1.15),(4.93±1.13),(5.11±1.12)nmol·L-1,且组间无显著差异。血清皮质酮水平,C,M,FM各组间无显著差异。血清睾酮与皮质酮比值变化与睾酮变化较为一致。血清促黄体生成素、促卵泡激素水平,C组高于M组,但无显著差异;FM各组高于M组(P0.05),且FM各组组间无显著差异。结论:补充亚麻籽可以纠正由于运动导致的下丘脑-垂体-性腺轴功能的紊乱,有效预防血清睾酮水平的降低,进而增强抗疲劳能力。