HBV X蛋白对大鼠肾小球系膜细胞增殖及促炎性细胞因子表达的影响

目的探讨HBV X基因表达的蛋白(HBVx)对体外培养的大鼠系膜细胞表达肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、IL-6及细胞增殖的影响。方法构建含HBV X基因的真核表达载体pCI-neo-X,采用脂质体法将pCI-neo-X转染给体外培养的大鼠系膜细胞,Western blot测定HBx的表达,以半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定体外培养大鼠系膜细胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖。结果转染pCI-neo-X的系膜细胞(MC+pCI-neo-X组),HBx在36、48 h表达明显。同时TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达量较未转染和转染空载体组明显增高。上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平在MC+pCI-neo-X组较未转染和转染空载体组均增高,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞增殖在36、48 h MC+pCI-neo-X组最明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBx可诱导大鼠系膜细胞高表达TNF-α、IL-1β和IL-6,促进系膜细胞增殖。HBx对系膜细胞的增殖作用可能与TNF-α、IL-1β、IL-6的高表达有关。     

2～5岁儿童睡眠状况流行病学调查

目的了解荆州市2~5岁儿童的睡眠状况及相关因素。方法采用分层随机抽样的方法抽取荆州市2个城区1540名2~5岁儿童作为研究对象,采用统一问卷的形式对受试儿童家长或看护人员进行现场调查,应用SPSS 13.0统计软件包进行统计学分析。结果荆州市2~5岁儿童睡眠时间随年龄增加而减少(P<0.01)。睡眠障碍发生率为48.0%,其中磨牙(17.5%)、梦呓(13.6%)、打鼾(10.9%)发生率较高。男童的梦呓、打鼾和呼吸暂停的发生率明显高于女童,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄组的梦呓和呼吸暂停的发生率随年龄增加而升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论目前,荆州市2~5岁儿童的睡眠时间较少,睡眠障碍的发生率较高,这一现象应得到社会各方面的关心和重视。     

尿NGAL和KIM-1在早期诊断早产儿急性肾损伤中的意义

目的探讨尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子(KIM-1)在诊断早产儿急性肾损伤中的作用。方法56例新生儿分为两组,AKI组23例,非AKI组33例,对照组19例,采用ELISA检测各组尿中NDAL和KIM-1。结果血肌酐水平在急性肾损伤早产儿第3天表现出差异,而尿中NGAL和KIM-1在第1天即显著增高。结论尿NGAL和KIM-1对早产儿急性肾损伤有早期诊断作用。     

乙型肝炎病毒X蛋白通过激活细胞外蛋白调节激酶转导机制上调大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子-α的表达

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因编码的蛋白(HBx)导致大鼠系膜细胞(MC)增殖及TNF-α高表达的细胞外蛋白调节激酶(ERK)1/2信号转导机制.方法 PCR扩增HBV X基因,然后与真核表达载体PCI-neo质粒连接,构成含有HBV X基因的质粒(PCI-neo-X),采用限制性内切酶法及测序证实.采用脂质体法将PCI-neo-x转染入体外培养的大鼠MC,采用抑制剂U0126阻断ERK1/2通路,观察培养细胞增殖、TNF-α及其mRNA表达,以不加抑制剂作为对照.Western blot检测HBx、ERK1/2及磷酸化ERK(p-ERK)1/2表达.半定量RT-PCR检测TNF-α mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液TNF-α表达.甲基噻唑摹四唑(MTT)法检测MC增殖.结果 无论是否加入UO126,在转染PCI-neo-X 36,48 h后,肾小球系膜细胞(GMC)明显表达HBx,细胞TNF-αmRNA的表达加入U0126较不加入U0126显著下降.不加入U0126组上清液TNF-α水平在转染后36 h和48 h分别为(189.0±18.1)ng/L和(172.3±24.3)ng/L;加入U0126组上清液中TNF-α水平在转染后36、48 h分别为(65.6±11.6)ng/L和(84.0±24.6)ng/L,组间不同时间点比较均有显著性差异(Pa<0.05).加入U0126后MC增殖也显著下降.结论 HBx可促使MC增殖,细胞TNF-α mRNA及上清液TNF-α表达均增高,这一作用可能是通过HBx激活ERK1/2信号通路实现的.实用儿科临床杂志,2009,24(10):738-740     

激素敏感型肾病综合征患儿血及尿白细胞介素-18增高及其临床意义

目的：探讨白细胞介素-18(IL-18)与小儿激素敏感型肾病综合征(SSNS)发病之间的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定SSNS患儿极期及恢复期血、尿中IL-18水平,分析与24 h尿蛋白定量之间的关系,并与正常对照组相比较。结果：SSNS患儿22例,治疗前血IL-18为(281.2±79.2) ng/L。恢复期为(50.2±14.1) ng/L两者比较差异有显著性(P0.05)。尿IL-18治疗前及恢复期分别为(232.6±55.5) ng/mg·Cr和(28.5±12.8) ng/mg·Cr两者比较差异有显著性(P0.05)。呼吸道感染组与正常对照组之间差异也无显著性。血IL-18与24 h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.768,P<0.05)。尿IL-18与24 h尿蛋白定量也呈显著正相关(r=0.838,P<0.01)。结论：IL-18与SSNS的发病有关,可能在其发病中起部分作用,血、尿IL-18还可作为SSNS极期的标志之一。感染对血中IL-18水平无影响。     

环磷酰胺和肝素联合治疗小儿激素耐药性肾病综合征的临床观察

目的 :探讨环磷酰胺与肝素联合治疗小儿激素耐药性肾病综合征的临床疗效。方法 :4 5例激素耐药性肾病综合征随机分为 2组 ,A组 2 5例 ,采用环磷酰胺冲击 (8～ 12mg/(kg d) ,连续 2日 ,2次为 1疗程 ,然后间隔 2周重复 1疗程 ,共 6疗程 )与肝素静脉滴注 (每次 1mg/kg ,连续 15～ 30d)联合治疗 ;B组 2 0例 ,采用环磷酰胺口服法 (2～ 3mg/(kg d) ,晨服 ,12wk)。 2组强的松用法相同。结果 :A组显效 19例 ,有效 3例 ,无效 3例 ;B组显效 6例 ,有效 6例 ,无效 8例 ,2组疗效差异有显著性 (P <0 0 1)。A组平均随访13 2± 2 5个月 ,19例显效中 4例复发 ,复发率为 2 1 1% ;B组平均随访 14 5± 4 2个月 ,6例显效中 3例复发 ,复发率占 5 0 %。环磷酰胺累计剂量 :A组 12 0mg/kg ,B组 2 5 0mg/kg。结论 :环磷酰胺冲击与肝素联合治疗小儿激素耐药性肾病综合征优于单纯口服环磷酰胺 ,副作用少 ,累积剂量小。     

环磷酰胺三种给药方法对难治性肾病综合征的近期疗效观察

由于难治性肾病综合征(NS)对类固醇激素的治疗反应差,因而常与细胞毒类药物联合应用,常选环磷酰胺(CTX),过去一直采用口服给药,疗效不甚满意,近年来采用冲击疗法。自1993年1月至1994年12月我科收治难治性NS25例,分别采用CTX三种不同给药方法进行治疗,现总结如下。 临床资料 25例难治性NS分为三组。(1)口服组10例,平均年龄8.1岁,平均病程11.2个月,给药方法:2.5～3mg/kg·d。一次晨服,总量250～300mg/kg,最大实际总量不超过9g。(2)间断冲击组     

双氢克尿噻治疗小儿特发性高钙尿症的临床应用

目的观察双氢克尿噻(DCT)治疗小儿特发性高钙尿症的临床疗效及副作用.方法经过筛选的特发性高钙尿症儿童20例,在DCT治疗前经3～4周的规范饮食,随后给予DCT1mg/kg口服,共3个月,用药前及用药第2周末、第3个月末查尿钙/肌酐(Ca/Cr)比值观察疗效,同时查血胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及LDL/HDL比值,以观察其血酯增高的副作用.结果 (1)尿Ca/Cr(mg/mg),治疗前、治疗第2周末及第3个月末分别为0.28±0.02,0.15±0.01,0.18±0.01,P＜0.01.(2)用药前及用药后第3个月末血CHOL为(4.21±0.16)mmol/L、(4.68±0.24)mmol/L,HDL为(1.51±0.10)mmol/L、(1.21±0.08)mmol/L,LDL为(2.21±0.15)mmol/L、(2.75±0.24)mmol/L,LDL/HDL为1.68±0.15、2.21±0.19.均P＜0.01.结论 DCT对小儿特发性高钙尿症有较好的疗效,其副作用是使血脂增高.     

进行性肌营养不良1例

1 临 床 资 料 　　患 儿 , 男 , 3岁 。 半 个 月 前 体 检 时 发 现 ALT明 显 增 高 , 拟 诊 “ 肝 炎 ” 于 2000年 4月 1日 入 院 。 患 儿 一 直 精 神 食 欲 好 , 无 厌 食 , 大 小 便 正 常 。 1岁 时 会 独 走 , 平 时 步 行 摇 摆 , 易 倾 跌 。 体 检 ： T36.5℃ , 体 重 12kg,P94次 /min, R24次 /min。 正 常 面 容 , 营 养 中 等 , 神 志 清 楚 , 表 情 正 常 , 皮 肤 色 泽 红 润 , 弹 性 好 , 皮 下 脂 肪 分 布 均 匀 , 无 皮 疹 及 出 血 点 , 全 身 浅 表 淋 巴 结 无 肿 大 , 头 部 外 形 正 常 , 眼 、 鼻 、 口 腔 检 查 正 常 , 颈 无 抵 抗 , 甲 状 腺 无 肿 大 , 胸 廓 无 畸 形 , 心 肺 正 常 , 腹 软 , 肝 肋 下 1.5cm, 质 软 , 脾 未 触 及 。 双 侧 腓 肠 肌 块 状 增 大 、 质 硬 , 鸭 步 , Gomer氏 征 (＋ ), 皮 肤 知 觉 正 常 , 腱 反 射 无 亢 进 及 减 弱 。 未 见 肌 肉 颤 动 , 神 经 系 统 检 查 正 常 , 血 尿 粪 常 规 检 查 正 常 。 甲 肝 抗 体 IgM(－ ), 乙 肝 三 系 阴 性 , 丙 肝 抗 体 (－ ), 戊 肝 抗 体 IgG(－ ), IgM(－ )。