RNAi载体构建及其对PLC/PRF/5细胞突变p53基因抑制作用的实验研究

目的利用RNA干扰(RNA interference，RNAi)技术，以突变p53基因为靶基因，构建干扰载体，并观察载体对肿瘤细胞生长周期的影响，为下一步探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。方法设计具有小发夹结构的两条DNA序列，经退火成为互补双链，再克隆至干扰载体中，转化TOP10菌株，提取质粒行酶切鉴定，稳定转染PLC／PRF／5细胞，Western blot检测p53蛋白，MTT法观察细胞生长曲线，流式细胞仪分析细胞周期变化。结果成功构建针对突变p53的特异性RNA干扰载体，此干扰载体转染PL／PRF／5细胞后，p53蛋白表达水平降低，肿瘤细胞生长速度减慢，G1期细胞分布明显增多。结论成功构建针对突变p53的RNA干扰载体，此干扰载体可以有效降低p53蛋白表达水平，导致突变p53基因沉默，进而延缓PLC／PRF／5细胞生长速度，阻滞肿瘤细胞停滞于G1期。     

检验科微生物实验室在院内感染监测中的重要作用

<正>在医院领导的高度重视和关心下,从组织落开始到严格管理制度,采取多种措施,开展必要的床监测,使我院的院内感染管理逐步规范化、制化、科学化。医院是患者密集的场所,医院环境很易被病原微生物污染,为此我院设立院感科,成立生物检测实验室,以适应全国各级医院对医院感的监测和预防控制工作的需要。现就我院近几年在开展控制院内感染工作方面的一点体会,报如下。     

大面积深度烧伤休克期切痂植皮15例临床观察

大面积深度烧伤患者的主要死因是感染，而创面坏死组织是细菌的良好培养基-一。因此，尽早去除坏死组织，封闭创面是消灭创面危害的最佳选择。传统的切痂时机一般是度过休克期后。1999年12月至2003年11月，我们对15例大面积深度烧伤患者在休克期(伤后2天内)施行了切痂植皮，效果良好。现报告如下。     

生长抑素类似物SMS201-995的研究及其临床应用

生长抑素(Somatostatin,SRIF,GH—RIH)是一种强效生长激素释放抑制因子。1971年Brazeau等首次从绵羊下丘脑中发现了并分离成功。随后人们科用放射免疫分析和免疫细胞化学等先进技术,先后发现SRIF受体广泛分布于中枢神经系统及外周器官:胃肠道、胰腺,泌尿生殖器     

人源抗破伤风毒素单链二硫键稳定抗体的重组设计与表达

目的 构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并进行原核表达和生物学特性鉴定.方法 采用PCR定点突变的方法,获得二硫键稳定的抗破伤风毒素重链C端(TeNT-Hc)单链抗体基因(27G-scdsFv).连接pET22b(+)载体,转化大肠杆菌BL21 (DE3)工程菌,IPTG诱导表达,SDS-PAGE、Western blot法鉴定表达产物.ELISA检测27G-scdsFv体外抗原特异结合活性和抗体相对稳定性;非竞争酶免法检测抗体亲和力.采用免疫荧光法检测27G-scdsFv体外中和活性.结果 测序结果显示获得正确的27G-scdsFv基因.原核表达scdsFv以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的50％.复性后的27G-scdsFv保持了与TeNT-Hc的特异结合活性,亲和力较其scFv形式略有提升,KD =0.93×10-7 mol/L,1L培养物可获得5 mg scdsFv蛋白.27G-scdsFv的稳定性较scFv形式明显增强.27G-scdsFv在体外可以明显抑制TeNT-Hc与神经元细胞的结合.结论 成功构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并获得有活性的目的蛋白,为27G-scdsFv的进一步生物学功能研究奠定基础.     

超声心动图诊断部分性肺静脉异位引流的价值

目的探讨超声心动图对部分性肺静脉异位引流(PAPVC)的诊断价值。方法回顾性分析29例PAPVC患者二维超声及彩色多普勒图像表现并与心血管造影、手术结果对比分析,总结其诊断特点,找出漏诊的原因。结果术前确诊25例,漏诊3例,1例提示诊断。右上肺静脉引流入右心房19例;右上肺静脉引流入上腔静脉2例;右上肺静脉及右下肺静脉均引流入右心房2例;右下肺静脉引流入右心房2例;右上肺静脉及右下肺静脉引流入冠状静脉窦1例;左上及左下肺静脉通过垂直静脉引流入左无名静脉3例。合并房间隔缺损(ASD)27例,其中静脉窦型ASD 20例,继发孔ASD 7例,1例房间隔完整,1例合并卵圆孔未闭。25例超声诊断与心血管造影、手术结果符合。结论超声心动图诊断PAPVC具有较高的准确度,但在成人时期容易漏诊。     

上消化道出血急症内镜检查810例次诊断分析

本文收集西安市西京医院和中医医院1980～1985年,以上消化道出血急症胃镜检查者750例共810例次,检查结果分析如下.一、年龄和性别患者年龄自4～80岁,其中41～60岁者占40. 1%,男女之比为3. 68:1,61岁以后男女之比     

原发性高血压并2型糖尿病患者脉压与蛋白尿的相关性探讨

目的　研究 2型糖尿病及高血压病患者脉压 (PP)与尿微量白蛋白的关系。方法　对 2 4 1例患者 ,高血压 (EH)患者 75例、2型糖尿病 (T2 DM)患者 77例和高血压病合并 2型糖尿病 (EH +T2 DM)患者 89例进行血压检测和尿微量白蛋白测定。结果　T2 DM组微量白蛋白与收缩压 (SBP)相关性不显著 (P >0 .0 5 ) ;而与PP显著正相关 (P <0 .0 5 )。EH组微量白蛋白与SBP和PP呈显著正相关 (P <0 .0 5 ) ;EH +T2 DM组微量白蛋白与SBP和PP呈显著正相关 (P <0 .0 5 ) ,微量白蛋白与PP相关性在EH +T2 DM组最大。反映肾功能的其它指标则与SBP、PP无相关性。结论　在上述 3种患者中只PP与早期肾损害相关 ,故为防止DM和EH患者肾脏损害加重 ,降低PP很重要。     

富血小板血浆促进胫骨骨折模型兔的骨愈合

文题释义：富血小板血浆：通过高速离心的方法从全血中提取出来的血小板浓缩液,含有高浓度血小板和自身生长因子的血浆。 骨折愈合：是骨折断端之间组织修复的连续过程,成骨细胞与破骨细胞,联合多种细胞和生长因子参与的一系列复杂的生化反应,各种生物活性因子之间可以通过磷酸化等变化联系在一起。 骨折塑形期：为了符合人体生理结构要求,具有更牢固的结构和良好的功能,骨性骨痂通过成骨细胞、破骨细胞的协调作用下成为成熟的板层骨,使骨折两断端再次完全连接起来,髓腔再通,骨折恢复到与原骨组织一样的结构,达到完全愈合。   背景：骨折具有自我愈合周期长、延迟愈合等问题。生物组织具有自我修复的潜能,那么有没有办法将组织自身修复能力调动起来,为生物体自身修复所用呢？富血小板血浆技术正是解决这一难题的有效方式之一。 目的：探讨自体富血小板血浆对兔胫骨骨折愈合的促进作用。 方法：选取新西兰大白兔12只,随机分为富血小板血浆组及对照组,每组6只。所有动物均在右侧胫骨远端2 cm处用摆锯造成横行骨折,克氏针髓内固定。富血小板血浆组将制备的富血小板血浆凝胶注射至骨折断处,对照组相同方法将等量无菌生理盐水注射至骨折断端。术前及术后2,4,8周留取血液标本,测定骨钙素、骨碱性磷酸酶水平;术后2,4,8周分别处死2只,观察骨折标本的骨折修复情况,计算骨痂体积。结果与结论：①术后各时点,富血小板血浆组骨痂直径均大于对照组(P < 0.05);②术后第4周,富血小板血浆组骨痂体积明显大于对照组(P < 0.05);术后第8周时,富血小板血浆组骨痂体积大于对照组,但差异无显著性意义(P > 0.05);③术后第4周富血小板血浆组骨小梁平均宽度、骨小梁面积比及血管数目均优于对照组(P < 0.05);术后第8周2组数据差异无显著性意义(P > 0.05);④2组血清中骨钙素水平在术后第4周时达到最高,可维持高浓度一段时间,富血小板血浆组最高值大于对照组(P < 0.05);⑤富血小板血浆组中血清碱性磷酸酶水平始终高于对照组,说明富血小板血浆在骨折愈合过程中对碱性磷酸酶的影响始终存在;⑥提示富血小板血浆技术对骨折愈合有一定的促进作用,可为骨科临床骨折不愈合或延迟愈合的治疗提供新思路、新方法。 ORCID: 0000-0002-8527-6895(任军) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

手术室护士预防静脉血栓栓塞症认知水平现状调查与干预效果研究

目的调查手术室护士预防静脉血栓栓塞症(VTE)认知水平现状,探讨针对现状问题进行干预的效果。方法选取2019年2月～12月我院手术室护士173名作为研究对象,采用自制问卷调查预防VTE认知水平和培训需求,并采取针对性培训措施进行干预。经过6个月的干预,比较干预前后预防VTE知识问卷得分、Jefferson医护合作态度量表(JSAPNC)得分、护士工作满意度量表(MMSS)得分。结果手术室护士预防VTE知识得分为(80.55±4.78)分,且与工作年限呈正相关(P0.05)。手术室护士对科室开展培训和培训保障需求较高。干预后护士VTE知识问卷得分、JSAPNC得分、MMSS得分均高于干预前,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论手术室护士预防VTE知识掌握程度有待提高,完善和保证相关知识教育培训可提高手术室护士预防VTE知识掌握程度,有利于加强医护合作,改善护士工作满意度。