葡萄籽原花青素对中老年OSAHS患者肺通气及炎症水平的影响

目的 观察葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对中老年阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)患者肺通气及炎症水平的影响。 方法 2012年12月-2014年12月为华北理工大学附属医院呼吸内科确诊的108例中老年OSAHS患者随机分为对照组(36例),GSPE A组(36例)与GSPE B(36例)。对照组给予持续气道正压通气(CPAP)治疗;GSPE A组和GSPE B组在此基础上分别给予高剂量(100 mg/粒,2粒/次)和低剂量(100 mg/粒,1粒/次)GSPE口服治疗。在治疗前和治疗后8周检测外周血白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,结合多导睡眠图监测(polysonmography,PSG)监测最长低通气时间(the maximum hypopnea time,MHT)、低通气指数(low ventilation index,HI)、最长呼吸暂停时间(the longest apnea time,LAT)、呼吸暂停指数(apnea index,AI)和呼吸紊乱指数(respiratory disturbance index, RDI)、夜间最低血氧饱和度(lowest oxygen saturation, LSaO₂)。采用SPSS17.0软件进行统计分析。 结果 治疗前,三组基本临床资料、PSG检测指标、血清IL-6、TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,对照组治疗后的MHT、HI、LAT、AI和RDI、LSaO₂均显著改善,差异有统计学意义(P＜0.05);GSPE A组:治疗后的MHT、HI、LAT、AI、RDI、LSaO₂较治疗前显著改善,差异有统计学意义(P＜0.05);GSPE B组:治疗后的MHT、HI、RDI、LSaO₂均较治疗前显著改善,差异有统计学意义(P＜0.05)。LAT、AI虽有所改善,但差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,GSPE A组和GSPE B组的MHT、HI、LAT、AI、RDI和LSaO₂的改善程度优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);GSPE A组MHT、HI、LAT、AI、RDI和LSaO₂的改善程度优于对照组GSPE B组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后,GSPE A组和GSPE B组中IL-6(20.10±5.96和26.33±6.38 vs. 33.14±7.22)、TNF-α(32.42±6.33和42.80±5.48 vs. 51.32±4.28)低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);GSPE A组治疗总有效率(88.2%)显著高于对照组(70.5%)和GSPE B组(81.8%),差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论 GSPE可有效的降低IL-6、TNF-α水平,提高中老年OSAHS患者的治疗效果。     

Proanthocyanidin encapsulation for sustained bioactivity in dentin bioadhesion: A two-year study

ObjectivesTo determine the long-term effect on the stability of dentin-resin interfaces after the addition of polylactide (PLA) capsules containing proanthocyanidin (PAC) to adhesive resin.MethodsSub-micron (SM) and micron (M) size capsules containing PACs were produced using a combination of emulsification and solvent evaporation techniques and characterized. Human dentin surfaces (n = 8) were etched (35% glycolic acid) and primed (15% enriched Vitis vinifera extract solution - VV_e), followed by the application of an experimental adhesive containing 0 (control), 1.5 wt% of SM or M PAC-filled PLA capsules light cured for 40 s. A crown was built using commercial composite. After 24 h-immersion (37 °C) in simulated body fluid, specimens were serially sectioned into resin-dentin beams. Microtensile bond strength (TBS), micro-permeability and fracture pattern were assessed immediately and after 1 and 2 years. Data were statistically analyzed using two-way ANOVA and post-hoc test (α = 0.05).ResultsPolydisperse capsules were manufactured with average diameter of 0.36 µm and 1.08 µm for SM and M, respectively. The addition of capsules did not affect TBS (p = 0.889). After 2 years, TBS significantly decreased in SM (p = 0.006), whereas M showed similar initial values (p = 0.291). Overall, less micro-permeability was found in M than the control and SM group (p < 0.001). After 2 years, fractured surfaces from capsule-containing groups failed within the adhesive layer while control fractured at the bottom of the hybrid layer.SignificanceThe addition of PAC-filled PLA microcapsules in a dental adhesive did not affect the bond strength while increased and sustained the protection against micro-permeability in the interface, likely due to release of PACs.     

葡萄籽原花青素及UVA照射对HaCaT细胞增殖活性的影响

目的 观察葡萄籽原花青素（GSPE）和长波紫外线（UVA）对人角质形成细胞（HaCaT细胞）增殖的影响,以探讨GSPE有无光保护作用。方法 MTT法分别测定不同浓度GSPE以及不同剂量UVA对HaCaT细胞增殖活性的影响。结果 GSPE浓度为5-200μg/m L时,对HaCaT细胞增殖影响不明显,浓度为500μg/m L及以上时抑制细胞生长,且有统计学意义;UVA剂量超过10 J/cm2有抑制作用且随剂量增高抑制作用越明显,且有统计学意义,25 J/cm2时其抑制率达37.65%;浓度为50、100μg/mL的GSPE对25 J/cm2 UVA照射后的HaCaT细胞的增殖有明显促进作用。结论25 J/cm2的UVA对HaCaT细胞的增殖有明显抑制作用,而合适浓度的GSPE对HaCaT细胞增殖活性有光保护作用。     

原花青素联合胡椒碱通过五羟色胺受体途径改善慢性应激小鼠抑郁焦虑样行为

目的：探讨原花青素（OPC）联合胡椒碱（PIP）对慢性不可预知应激（CUMS）小鼠的抑郁焦虑样行为的作用,通过分析海马、前额叶皮层和下丘脑中5-HT1A受体的变化探讨相关机制。方法：将ICR小鼠分为正常组、CUMS组、CUMS+PIP（5 mg/kg）+OPC（12.5、25、50 mg/kg）组、CUMS+PIP（5 mg/kg）+OPC（50 mg/kg）+NAN-190（0.1 mg/kg）组、NAN-190组（CUMS+NAN-190 0.1 mg/kg）和氟西汀组（CUMS+氟西汀 10 mg/kg）,共8个组。CUMS建模后,采用强迫游泳、悬尾、新奇食物抑制摄食实验和大理石掩埋实验评估小鼠的抑郁和焦虑样行为,并采用高效液相色谱法测定海马、额叶皮层和下丘脑的单胺类神经递质含量[5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）和多巴胺（DA）]。结果：与正常组相比,CUMS组小鼠强迫游泳和悬尾实验中的不动时间显著增加（P＜0.01）,新奇食物抑制摄食潜伏期增加（P＜0.05）,大理石掩埋实验颗粒数增加（P＜0.01）;给予OPC（25、50 mg/kg）联合PIP（5 mg/kg）可改善由CUMS引起的抑郁焦虑样行为。通过高效液相色谱法发现,OPC（25、50 mg/kg）联合PIP（5 mg/kg）用药可显著逆转由CUMS引起的海马、额叶皮层和下丘脑中的5-HT水平下降（P＜0.05）,然而对NE、DA无影响（P＞0.05）。使用5-HT1A受体拮抗剂NAN-190（0.1 mg/kg）可逆转OPC和PIP的改善作用（P＜0.05）。结论：OPC和PIP联用可改善CUMS小鼠的抑郁焦虑样行为,这可能是通过激活中枢神经系统中的5-HT1A受体实现的。     

葡萄籽原花青素预防大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察葡萄籽原花青素(GSPE)抑制四氯化碳(CCL4)诱导大鼠肝纤维化形成的效果,并探讨其可能的作用机制。方法 50只大鼠随机选取20只分为空白对照组(10只)和溶剂组(10只),其他大鼠采用CCL4腹腔注射法,每周2次,8周制造大鼠肝纤维化模型,将造模成功的24只大鼠分为模型组(12只)和GSPE干预组(12只)。GSPE干预组从第5周给予GSPE 150 mg/(kg.d)灌胃,8周后处死大鼠,留取肝脏和血清,采用自动生化分析仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL),放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ),肝组织碱水解法检测羟脯氨酸(HyP),化学比色法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH),同时取固定部位肝脏组织HE染色,观察其肝纤维化程度。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清中的ALT、AST、TBIL、HA、LN、PCⅢ水平均显著升高(P<0.05),肝组织中GSH和SOD降低,MDA和Hyp含量升高(P<0.05);与模型组比较,GSPE干预组大鼠血清ALT、AST、TBIL、HA、LN、PCⅢ水平均显著降低(P<0.05),肝组织中GSH和SOD升高,MDA和Hyp含量降低(P<0.05);与模型组比较,GSPE干预组肝组织纤维化病变明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GSPE对CCL4诱导的大鼠肝纤维化形成具有明显的抑制作用,其作用机制可能与保护肝细胞、抑制脂质过氧化和抑制胶原合成有关。     

黏膜溃疡散的药效学研究

目的：观察复方低聚原花青素（OPC）的抗疲劳作用。方法：进行复方OPC粉对小鼠游泳时间以及对小鼠血清尿素、血乳酸、肝糖原的影响测定。结果：ig给予复方OPC,能明显延长小鼠游泳时间,降低小鼠血清尿素和血乳酸的量（P＜0.01）,而提高肝糖原的量（P＜0.01）。结论：复方OPC能够调整体内代谢,快速恢复体力,是具有明显的抗疲劳作用的新型健康食品。     

葡多酚对大鼠脂质代谢紊乱的干预作用

目的:通过体内实验观察葡多酚(GP)对大鼠脂质代谢紊乱的干预作用。方法:Wistar成年雄性大鼠随机分成4组,分别为正常对照组、高脂模型组、葡多酚低剂量与高剂量组,每组10只。正常对照组给予基础饲料,其余3组喂饲高脂饲料诱发高脂血症。试验组动物每日经口灌胃给予40mg/kg、120mg/kg剂量的GP。于实验第31天测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及HDL亚组分Ⅱ和亚组分Ⅲ的胆固醇含量(HDL2-C、HDL3-C);并计算低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇比值(LDL-C/HDL-C)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)和致动脉粥样硬化指数(AI)。结果:实验前、实验末期各组大鼠体重及实验末期体重增重均无差异。高脂模型组大鼠血清TG、TC、LDL-C、VLDL-C、LDL-C/HDL-C、AI均高于正常对照组(P<0.01或P<0.05),而HDL-C、HDL2-C、HDL2-C/HDL3-C均明显低于正常对照组(P<0.01)。与高脂模型组比较,葡多酚低剂量组与葡多酚高剂量组的TG、TC、LDL-C、VLDL-C降低(P<0.01或P<0.05);HDL2-C含量、HDL2-C/HDL3-C比值升高(P<0.01或P<0.05)。葡多酚高剂量组的LDL-C/HDL-C明显低于高脂模型组(P<0.01),AI低于高脂模型组(P<0.05)。结论:葡多酚具有调整血脂、改善脂质代谢紊乱的作用。     

原花青素对大鼠视网膜缺血再灌注损伤后视神经的保护作用

目的探讨原花青素对大鼠高眼压视网膜缺血再灌注损伤后视神经的保护作用。方法用眼内灌注法,前房灌注林格液制成实验性高眼压视网膜缺血再灌注损伤模型。将70只Wistar大鼠随机分为正常对照组(10只)、模型对照组(30只)和原花青素干预组(30只)。模型对照组和原花青素干预组根据再灌注的时间不同分为1、3和7 d组,每组各10只。各组于造模前5 d开始用药,原花青素干预组每天用原花青素混悬液300 mg.kg-1灌胃,正常对照组、模型对照组分别给予灌注等量蒸馏水,每日分2次给药。造模后各组仍继续按原方案给药。造模后分别在1、3、7 d脱颈处死大鼠,迅速摘除眼球取出视网膜。利用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测各组大鼠视网膜中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的表达水平。结果再灌注1 d,模型对照组nNOS的表达水平开始增高,3 d达高峰,7 d后逐渐下降。再灌注各时间点,模型对照组视网膜内nNOS阳性表达明显增多,MDA含量持续升高,SOD活性持续下降,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。各时段原花青素干预组与模型对照组比较,视网膜内nNOS阳性神经元明显减少(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01),SOD活性升高(P<0.01);与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论原花青素可通过提高视网膜组织中SOD活性,降低MDA含量,减少视网膜组织中nNOS表达,对大鼠视网膜缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

葡萄籽原花青素对人卵巢癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨葡萄籽来源的原花青素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤增殖和凋亡的影响和机制.方法 建立24只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,分成3组(n=8):原花青素高浓度组(200 ms/kg)、原花青素低浓度组(100 mg/kg)、空白对照组.观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况,HE染色观察肿瘤细胞形态,流式细胞分析细胞凋亡,RT-PCR,Westernblot检测肿瘤细胞Bax,Caspase-3在RNA及蛋白水平的表达情况.结果 原花青素处理组皮下移植瘤抑瘤率分别为34.303%、28.594%,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05);治疗组肿瘤细胞出现明显的凋亡形态学变化,流式细胞检测治疗组肿瘤细胞凋亡率分别为67.965%,24.650%;原花青素还可以明显增高Bax、Caspase-3 RNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性.结论 葡萄籽原花青素对卵巢癌皮下移植瘤生长有抑制作用,并促进其凋亡,其作用可能通过增强Bax、Caspase-3的表达而实现.     

PI3K/Akt信号通路在癫痫鼠海马神经细胞中的作用及葡萄籽原花青素影响

目的探讨PI3K/Akt信号通路在戊四氮(PTZ)诱导癫痫大鼠海马神经细胞凋亡中的作用及葡萄籽原花靑素(GSPE)对其影响。方法根据是否给予PI3K/Akt信号通路特异性抑制剂LY294002,将大鼠随机分为5组,每组10只:正常对照组、癫痫模型组(PTZ组)、LY294002+PTZ组、GSPE+LY294002+PTZ组、GSPE+PTZ组。采用流式细胞学检测海马组织线粒体膜电位(ΔΨm)水平,Western blot法检测海马组织p-Akt、Caspase 3蛋白的表达变化,电镜观察线粒体的超微结构,以明确GSPE预处理对上述指标的影响。结果与PTZ组相比,LY294002+PTZ组中Caspase 3表达水平显著升高。与LY294002+PTZ组相比,GSPE+PTZ组中p-Akt水平明显升高、Caspase 3蛋白水平明显下降(P0.05),相应海马组织中线粒体ΔΨm的水平升高(P0.05)及超微结构有所改善;而GSPE+LY294002+PTZ组中上述指标则差异无统计学意义。结论 GSPE干预可抑制癫痫鼠海马神经细胞的凋亡并保护线粒体的功能,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路抑制Caspase 3的表达有关。