基于肝细胞凋亡与网状支架破坏探讨抗肝纤维化中药的作用机制与治法特点

近年研究表明:肝细胞凋亡与网状支架破坏是肝纤维化形成的重要病理机制,抑制肝细胞凋亡及其支架结构破坏是防治肝纤维化的根本措施之一,TNF受体（TNF-R）半胱天冬酶（Caspases）通路是细胞凋亡的分子病理基础,ERK-MMP2途径是网状支架破坏的重要分子病理机制。在既往工作基础上,我们拟以抗纤维化有效中药-扶正化瘀方为对象,首先采用析因设计,动态观察扶正化瘀方影响肝细胞凋亡、网状支架破坏与纤维化之间的关系,继而探讨该方及其扶正与化瘀治法拆方对小鼠体内肝细胞凋亡与网状支架破坏的作用机制与治法特点。随后建立中药影响肝细胞凋亡的药物高内涵分析方法,探讨扶正化瘀方及其拆方对培养小鼠肝细胞TNF-R/Caspase通路信号分子的影响;并将经复方与拆方作用的凋亡肝细胞与原代肝星状细胞共培养,观察该方及其拆方通过抗肝细胞凋亡而影响肝星状细胞活化的作用。该项研究阐明了抗肝纤维化有效中药对肝细胞凋亡与支架破坏的作用机制与治法特点,拓展了抗肝纤维化的治疗新途径与药理研究新领域,为进一步开展中医药逆转肝硬化作用机制的研究奠定基础。     

扶正化瘀方抗肾间质纤维化作用机理的研究

目的探讨扶正化瘀方影响转化生长因子p（TGF-β）1信号转导与肾小管上皮细胞转分化的抗氯化汞中毒大鼠肾间质纤维化的作用机理。方法SD雄性大鼠44只，随机分为正常组、模型组、扶正化瘀方组（FZHY组）与维生素E组（Vit．E组），以8mg／kg氯化汞水溶液灌胃9周制备大鼠肾间质纤维化模型。从造模开始扶正化瘀方组以扶正化瘀方4．6g／kg大鼠体重灌胃，Vit．E组以100mg，kg大鼠体重VitE水溶液灌胃，1次／天，共9周。免疫荧光法观察肾组织α-平滑肌肌动蛋白、E-cadherin、TGF-β1表达，Western blot观察肾组织α-平滑肌肌动蛋白、E-cadherin、TGF-β1、TβR-1、Smad2、P-Smad2蛋白表达。结果与正常组相比，模型组肾组织E-cadherin表达明显降低，扶正化瘀方干预后其表达明显升高；模型组α-SMA、TGF-β1、TBR—1、P—Smad2表达明显升高，扶正化瘀方干预能降低其表达。各组大鼠Smad2表达无明显差异。结论扶正化瘀方可抑制肾小管上皮细胞转分化从而减轻肾间质纤维化，其机制与抑制纤维化肾脏TGF-β及其Ⅰ型受体的表达、下调Smad2活性，抑制TGF—β／Smads病理信号转导有关。     

脂肪性肝纤维化研究进展

0 引言 脂肪肝系多种病因引起肝脏脂质代谢紊乱;动态平衡失调,以致肝实质——肝细胞内脂质蓄积、肝细胞脂肪变性的一种病理综合征。肝纤维化则以肝脏间质即细胞外基质过度增生沉积、肝脏结构改变为病理特征,是各种慢性肝病的共同病理特点,是慢性肝炎向肝硬化发展的必经之路。脂肪肝与肝纤维化既可同时发生,也可先后相继发病。肝纤维化是脂肪肝的病理预后之一,临床上部分脂肪肝患者可演变为慢性脂肪性肝炎或脂肪     

挑刺治疗麦粒肿62例

几年来,我们应用挑刺法治疗早期麦粒肿百余例,取得了满意的效果,现将较完整的62例疗效介绍如下。临床资料:62例中男30例,女32例;最大年龄50岁,最小10岁;发病部位左侧上眼睑21例,左侧下眼睑12例,右上眼睑22例,右下眼睑7例;病程发病2天以内35例,2天以上者27例。治疗方法:取背部1至12胸椎至腋后线范围内寻找反应明显的反应点(反应点有粉红色、紫红色、暗红色的,散在数个,但不高出皮肤),皮肤常规消毒后,左手拇食指分压反应点两旁皮肤,右手持三棱针,挑每一反应点2至5次,出血或挤出血3-5滴,     

冬虫夏草菌丝提取物降低二甲基亚硝胺大鼠肝硬化门静脉高压效应的组织学基础

目的：探讨冬虫夏草菌丝提取物（Cordyceps myceliaextract,CME）对二甲基亚硝胺（di methylnitrosamine,DMN）大鼠肝硬化门静脉高压的防治效应及其作用机制。方法：50只Wistar大鼠采用10μg/kg DMN腹腔注射持续4周的方法制备大鼠肝硬化模型,并取15只大鼠作为正常对照组。造模即日起CME预防组大鼠（n=15）予0.74g/（kg.d）CME灌胃（按冬虫夏草菌丝生药质量计算）,1次/d,预防用药持续4周;CME治疗组大鼠（n=10）于造模成功后开始给药,用药4周。分别于造模后3d、2周、4周和造膜终止后2周、4周进行动态效应观察,肠系膜前静脉分支插管法检测门静脉压力（pressure of portal vein,Ppv）;放射免疫法测定血清透明质酸（hyaluronic acid,HA）含量,免疫组织化学法检测肝窦壁CD44、第Ⅷ因子相关抗原血管假性血友病因子（von Willebrand factor,v WF）、α-平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin,α-SMA）、层黏连蛋白（laminin,LM）、Ⅳ型胶原（collagen typeⅣ,ColⅣ）和Ⅰ型胶原（collagen typeⅠ,ColⅠ）表达。结果：预防用药4周后,与模型组比较,CME组大鼠门静脉管径显著缩小,门静脉压力显著降低（P〈0.05）,血清HA含量显著下降（P〈0.05）,v WF、α-SMA、ColⅣ、LM、ColⅠ染色减弱（P〈0.05）,CD44染色增强（P〈0.05）。治疗用药2周时,与模型组比较,CME组大鼠门静脉直径显著缩小,门静脉压力显著降低（P〈0.05）,血清HA含量显著下降（P〈0.05）。治疗用药4周时CME组大鼠门静脉管径与门静脉压力恢复至同期正常对照组大鼠水平。治疗用药2、4周时,与模型组比较,CME组大鼠肝窦壁CD44染色面积增加（P〈0.05）,LM、α-SMA、v WF和ColⅠ染色减弱（P〈0.05）,肝窦壁ColⅣ染色无显著变化。结论：CME对DMN致大鼠肝硬化门静脉高压具有良好的干预和治疗作用。CME抗肝窦壁损伤、保护肝窦内皮细胞、抑制肝星状细胞活化,抑制肝窦毛细血     

肝纤维化的基础研究进展

1 概念认识 肝纤维化主要是一种病理概念,系指肝组织内细胞外基质（extracellular matrix,ECM）成分过度增生与异常沉积,所导致的肝脏结构和（或）功能异常改变的病理变化。几乎所有的慢性肝病,包括慢性乙型（丙型）病毒肝炎、慢性血吸虫病、慢性酒精与药物损伤、自身免疫性肝病等均具有这一病理变化,肝纤维化的进一步发展,可形成肝硬化,严重影响患者健康与生命。但直到上世纪70年代之前,人们对肝纤维化的重要性认识较少,对其病理机制也多以为是由于肝实质细胞坏死、导致肝脏网状支架塌陷而形成,是一种被动与不可逆的病理过程。至70年代以Popper教授为代表的医学科学家不仅基本阐明了肝纤维化的病理形态特征及其在慢性肝病中的重要作用,而且发现肝纤维化是一种结缔组织的主动性增生过程。但是对这些增生结缔组织的细胞来源与代谢特点,则知之尚少。     

CCl4和脂多糖诱导的急性肝损伤中肝细胞凋亡病理特点比较

目的比较CCl4和脂多糖诱导的两种急性肝损伤模型中肝细胞凋亡的病理特点。方法雄性BABL/c小鼠随机分为正常组、CCl4模型组与脂多糖模型组。CCl4和脂多糖模型小鼠分别腹腔注射0.03 mL/kg 50?l4/橄榄油混合液和10μg/kg脂多糖与900μg/kg半乳糖胺。9 h后采集标本,检测肝细胞凋亡,血清ALT、AST活性,肝组织SOD活性、MDA含量。结果与正常组比较,CCl4和脂多糖模型小鼠血清ALT与AST活性均明显升高(P<0.01),且脂多糖模型高于CCl4模型(P<0.01);模型小鼠均有明显肝细胞凋亡(P<0.01),且两组间无显著差异,但CCl4模型呈局灶性,以中央静脉周围为主;脂多糖模型呈弥漫性,肝细胞坏死与肝组织炎症更显著(P<0.01)。CCl4和脂多糖模型肝组织均SOD活性升高、而MDA含量下降(P<0.01),但CCl4模型更显著(P<0.05)。结论CCl4与脂多糖诱导的急性肝损伤小鼠模型均有明显的肝细胞凋亡,但CCl4模型以中央静脉区为主,脂质过氧化损伤更为明显;脂多糖模型呈弥漫性,肝细胞坏死与肝组织炎性反应较重。     

全国肝纤维化专题研讨会纪要

20 0 1年 9月 15～ 18日 ,全国肝纤维化专题研讨会在上海顺利召开。本次大会由中国中西医结合学会肝病专业委员会主办 ,上海中医药大学承办。来自全国大部分省、区、市代表 170人 ,其中香港代表 15人 ;大多为从事中西医结合肝纤维化基础与临床研究的专家以及研究生、博士生、研究人员等 ,全国与上海市中西医结合学会肝病专业委员会全体委员出席了本次会议 ,部分企业代表列席了会议。会议学术氛围浓厚 ,有专题讲座、大会发言以及壁报交流等多种形式 ,提问讨论争相踊跃 ,会后也进行了广泛个别交流。大会集中回顾展示了我国近 10年来在肝纤维化…     

2004年第十三次全国中西医结合肝病学术会议纪要

2004年第十三次全国中西医结合肝病学术会议于8月26日一29日在北京市召开,本次大会由首都医科大学附属北京友谊医院与上海中医药大学肝病研究所承办。大会共收到论文195篇,实际到会代表200余人。其中特邀专题讲座10篇,大会发言22篇,壁报展示60余篇。大会的主题为中西医结合治疗慢性肝炎肝硬化的临床研究,专题讲座内容包括中西医结合治疗慢性乙型肝炎,中西医病证结合治疗肝纤维化的策略,循证医学在病毒性肝炎中的应用与意义,中医药抗肝纤维化机制研究,肝硬化及其并发症、肝癌等的临床治疗进展,肝脏疾病的基因治疗等。     

扶正化瘀方对肝纤维化大鼠间质性基质金属蛋白酶活性的影响

为探讨扶正化瘀方影响间质性基质金属蛋白酶活性的抗肝纤维化作用机制。采用二甲基亚硝胺腹腔注射4w诱导大鼠肝纤维化模型。随机分为正常组、模型组与治疗组;治疗组成模后以扶正化瘀方灌胃4w。模型组予以等量生理盐水;检测血清肝功能与肝组织羟脯氨酸含量。蛋白印迹法分析肝组织α-平滑肌肌动蛋白、I型胶原、基质金属蛋白酶-13和纤溶酶原激活物抑制剂-1蛋白表达,同位素标记底物凝胶法检测间质性基质金属蛋白酶活性。结果：扶正化瘀方显改善模型大鼠肝功能与肝组织胶原沉积;明显降低肝组织羟脯氨酸含量。抑制肝组织α-SMA、I型胶原蛋白表达;对基质金属蛋白酶-13蛋白表达无影响,但明显降低PAI-1蛋白表达。促进间质性基质金属蛋白酶活性。提示扶正化瘀方可促进肝纤维化大鼠间质性基质金属蛋白酶酶原的激活与活性水平。该作用是扶正化瘀方逆转肝纤维化的重要机制之一。