地龙蛋白肽30d经口染毒对Wistar大鼠的亚急性毒性作用

<正>地龙,为蚯蚓干燥体,是一种传统的动物源性天然中药材,性寒味咸,具有活血化瘀,镇痛消炎等作用,其药用价值在《神农本草经》及《本草纲目》均有记载。地龙中提取的地龙蛋白含有多种蛋白质组分,包括胶原酶、纤溶酶、蚓激酶、纤溶激活蛋白和钙调素结合蛋白等。对于地龙蛋白的药理活性已经有不少研究,认为地龙可以通过调节体内凝血系统和纤溶系统,抑制并促溶血栓,改善微循环及防治心脑血管疾病~([1-3]);可通过抑制血管紧张素转化酶活力控制高血压~([4]);可通过促进细     

固定矫治在正畸治疗中潜在并发症的临床探讨

目的探讨固定矫治在正畸治疗中潜在并发症的情况。方法收集口腔门诊132例错颌畸形患者在固定矫治的正畸治疗病例资料进行分析。结果 132例病例中,因医源性失误引起并发症21例（15.9%）,因患者不注意口腔卫生引起并发症48例（36.4%）。结论要想获得良好的矫治效果,避免固定矫治正畸治疗的潜在并发症,口腔正畸医生需要具备扎实的专业理论知识和丰富的临床实践经验;需要医生和患者两方面的密切配合。     

某伤科中成药抗疲劳作用的研究

[目的]研究某伤科中成药对实验性动物抗疲劳作用的影响。[方法]将昆明小鼠随机分组,高、中、低剂量组分别经口给予不同浓度(4、2、1g/kg)受试样品,阴性对照组则给予同体积生理盐水,连续给药15d后进行负重游泳试验,记录游泳时间并测定血清尿素氮,观测运动后血清乳酸升高和运动休息后血清乳酸的消除情况。[结果]高剂量组与对照组相比,小鼠游泳时间显著延长(P<0.01);小鼠运动后血清尿素氮含量显著降低(P<0.01);血清乳酸含量升高幅度无明显变化,但其消除幅度明显加大(P<0.05)。中剂量组与阴性对照组相比较,小鼠游泳时间变化不大,但小鼠运动后血清尿素氮含量显著降低(P<0.01),血清乳酸含量升高幅度无明显变化,但其消除幅度明显加大(P<0.05)。低剂量组与阴性对照组相比较各指标无明显变化。[结论]某伤科中成药具有缓解体力疲劳的功能。     

Anti-TgAb和Anti-TpoAb测定用国家标准品的建立

目的:为规范国产Anti-TgAb 和Anti-TpoAb定量测定试剂盒,本实验室研制并建立了Anti-TgAb 和Anti-TpoAb免疫测定用国家标准品.方法和结果:选择经临床检测Anti-TgAb、Anti-TpoAb高值血清,经离心、过滤等处理后,分装、冻干制成标准品候选品.以WHO Anti-TgAb 1st IRP (65/093)为对照品,经协作标定,候选品中Anti-TgAb免疫活性均值为3691IU/支,以WHO Anti-TpoAb RS (66/387)为对照品,经协作标定,候选品中Anti-TpoAb免疫活性均值为434IU/支.结论:本标准品中Anti-TgAb免疫活性定义为4000IU/支,Anti-TpoAb免疫活性定义为430IU/支.本标准品的建立,为国产Anti-TgAb 和Anti-TpoAb试剂盒提供了定量依据,本文还对目前国内常用的几种进口Anti-TgAb 和Anti-TpoAb定量免疫分析试剂盒进行了比较分析,供临床和检验医生参考.     

炭疽毒素保护性抗原和LFn介导的增强型绿色荧光蛋白进入HeLa细胞的研究

目的 研究炭疽毒素保护性抗原(protective antigen,PA)和致死因子(lethal factor,LF)N端254个氨基酸(LFn)在辅助增强型绿包荧光蛋白(EGFP)进入细胞中的作用.方法 分别扩增炭疽毒素的基因片段和EGFP的基因全长,将两片段先后克隆至pET-21a(+),构建成重组表达质粒pET-LFn-EGFP,在大肠杆菌中诱导表达,并对融合蛋白LFn-EGFP进行纯化.利用荧光共聚焦显微镜和流式细胞术研究LFn-EGFP融合蛋白进入细胞的情况.结果 获得较高纯度的融合蛋白LFn-EGFP,纯度可达90%以上,体外实验显示该融合蛋白保留了LFn与PA结合的活性,并且能够进入到HeLa细胞中.结论 LFn-EGFP蛋白本身也会以未知的机制进入细胞,在PA辅助时,LFn-EGFP进入细胞的效率会有所增加.     

保乳患者术前诊断MRI与术后俯卧位定位CT基于形变配准的靶区比较研究

目的 基于形变配准比较保乳患者术前诊断MRI与术后俯卧位定位CT相应靶区间体积和位置的关联与差异。方法 18例早期乳腺癌保乳术后拟行俯卧位部分乳腺外照射（EB-PBI）患者入组,所有患者保乳术前均行俯卧位诊断MRI扫描并行术后俯卧位定位CT扫描。基于术前MRI勾画肿瘤靶区（GTV_MRI）,边界外扩10和20 mm构建CTV_MRI+1和CTV_MRI+2,边界外扩15和25 mm构建PTV_MRI+1和PTV_MRI+2,勾画患侧全乳靶区CTV_Breast-MRI;在定位CT图像上,基于术腔金属夹勾画瘤床GTV（GTV_TB）,边界外扩10和15 mm构建CTV_TB和PTV_TB,勾画患侧全乳靶区CTV_Breast-CI。在MIM系统中,将MRI与CT图像进行形变配准。结果 基于术后定位CT所得GTV_TB、CTV_TB、PTV_TB分别大于基于术前诊断MRI所得GTV_MRI、CTV_MRI+1、PTV_MRI+1 （Z=-3.593、-3.593、-2.983, P<0.05）。基于GTV_TB与GTV_MRI靶区中心点形变配准时GTV_TB-GTV_MRI、GTV_TB-CTV_MRI+1、CTV_TB-GTV_MRI、CTV_TB-GTV_MRI+1的适形指数（CI）和包含度（DI）较基于胸廓形变配准有所改善（Z=-3.724、-3.724、-2.591、-3.593, P<0.05;Z=-3.724、-3.724、-3.201、-3.724,P<0.05）。结论 对早期乳腺癌患者,基于术前俯卧位MRI所得EB-PBI靶区体积显著小于基于术后俯卧位CT所得EB-PBI靶区体积,但对应靶区体积间呈正相关。即使采用形变配准,术前MRI与术后定位CT间,无论全乳靶区间还是肿瘤靶区与瘤床靶区间的空间对应性仍然较差,因此,基于术前MRI与术后瘤床进行俯卧位EB-PBI靶区融合性勾画是不合理。     

人神经生长因子在CHO细胞中的高效稳定表达

神经生长因子 (nervegrowthfactor,NGF)是神经系统重要的营养因子[1 ] 。NGF的主要生物学效应是维持外周交感、感觉神经元和中枢胆碱能神经元的存活和发育 ,促进神经系统损伤后修复 ,同时还参与调节免疫和造血等非神经系统的功能[2 ] 。NGF在治疗神经损伤、早老性痴呆和外周神经病等方面具有广阔的临床应用前景[3] 。基因工程方法是获得人神经生长因子 (hNGF)的重要手段之一 ,大肠杆菌表达的hNGF ,其体外折叠困难 ,复性后的蛋白生物比活性低。而在哺乳动物细胞中可产生具有较高生物学活性的类似天然蛋白的人神经生长因子。国内尚未有h…     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的克隆、表达、纯化及生物学活性鉴定

目的：在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的可溶性片段（soluble TNF-related apoptosis-inducing Ligand，sTRAIL），并鉴定其生物学活性。方法：以人胎盘cDNA为模板，根据GenBank中序列NM_003810设计引物，以PCR方法扩增sTRAIL基因，将其克隆人pET-32a，转化BL21（DE3），IPTG诱导后，收集菌体，超声破碎，离心取上清纯化，鉴定其生物学活性。结果：表达载体经DNA测序鉴定，氨基酸序列与预期一致。宿主菌高效表达目的蛋白，经SDS-PAGE、氨基酸测序鉴定均正确。可溶部分占表达总量的20％。经过两步纯化，sTRAIL纯度达到95％，表达量可达20mg／L培养基。纯化产物在体外能够明显诱导L929、NCI157、BEL7402、DU145等细胞凋亡，Hela细胞不敏感。对于L929，其半数致死量为0．10μg／ml。结论：本研究在原核表达系统中表达了sTRAIL，获得高纯度sTRAIL蛋白，为其进一步研究提供了良好基础。