XE-2100血细胞分析仪两种检测血小板方法的评价及常见问题

目的对XE-2100血细胞分析仪两种血小板(PLT)测定方法进行评价，同时与手工法进行比较，并对临床常见问题进行探讨。方法对XE-2100两种测定PLT方法进行精密度、线性、干扰以及与手工法的对比实验，同时对临床偏差较大的标本进行涂片观察、分析。结果阻抗法的精密度好于激光法，两法在常见范围内线性良好、与手工法一致性良好。激光法与手工法结果无显著差异，在一定范围内能抗小红细胞(RBC)及RBC碎片干扰。在低水平PLT标本中激光法与手工法拟合度稍好，同时在小PLT较多的标本中激光法、阻抗法结果与手工法相比均有偏低现象。结论激光法有一定抗干扰能力，临床中对低值标本可以阻抗、激光双方法检验，并结合报警信息、阻抗法直方图与激光法散点图进行综合分析、判断，但对于小PLT增多的情况仍应以手工法复检。     

丙酸氟替卡松与酮替芬对季节性过敏性鼻炎患者的疗效与炎性因子的影响

目的探讨丙酸氟替卡松与酮替芬治疗季节性过敏性鼻炎的疗效以及对患者Th1/Th2细胞分泌白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、免疫球蛋白E(Ig E)和血管细胞间黏附分子-1(s VCAM-1)水平的影响,以期为季节性过敏性鼻炎的治疗提供药物选择参考。方法选择2016年1月至2016年12月我科收治的100例季节性过敏性鼻炎患者为研究对象,随机分为白色面粉圆片安慰剂+生理盐水喷剂治疗组(A组)、白色面粉圆片安慰剂+丙酸氟替卡松喷剂治疗组(B组)和酮替芬治疗+生理盐水喷剂治疗组(C组)。观察并比较三组患者的治疗前后疗效、症状评分及ELISA试剂盒检测血清中IL-4、IFN-γ、TNF-α、Ig E和s VCAM-1水平。结果给予丙酸氟替卡松与酮替芬治疗后,患者过敏性鼻炎症状得到缓解,且总有效率B组(93.94%,与A组比较P=0.023)高于C组(82.35%,与A组比较P=0.042)。B组和C组患者分别经丙酸氟替卡松和酮替芬治疗,血清中IL-4、IFN-γ、TNF-α、Ig E和s VCAM-1的含量治疗前后比较,IFN-γ水平均显著升高,IL-4、Ig E、TNF-α和s VCAM-1水平均显著降低(P0.01,0.05),其中丙酸氟替卡松治疗效果最好。结论丙酸氟替卡松与酮替芬对季节性过敏性鼻炎均具有较好的治疗效果,且丙酸氟替卡松有效率高于酮替芬,能显著改变患者血清中IL-4、IFN-γ、TNF-α、Ig E和s VCAM-1水平,值得临床推广应用。     

肺动脉高压三尖瓣反流压差与血脑钠肽前体及并发心力衰竭的关系

目的 探讨肺动脉高压三尖瓣反流压差与血清脑钠肽前体(PRO-BNP)及并发心力衰竭的关系.方法 选取2016年2月至2018年11月无锡市精神卫生中心收治的肺动脉高压病人87例(疾病组),另选取同期体检健康者79例(健康组),均采用多普勒超声心动图检测三尖瓣反流压差及采用电化学发光法测定血清PRO-BNP水平,分析三尖瓣反流压差与血清PRO-BNP水平的关系;另根据病人是否并发心力衰竭情况将疾病组分为心衰组与无心衰组,对比两组三尖瓣反流压差、血清PRO-BNP水平,并采用logistic回归分析法分析其与心衰的关系.结果 疾病组三尖瓣反流压差及血清PRO-BNP水平分别为(52.17±6.58)mmHg、(619.72±113.47)ng/L,健康组分别为(21.09±4.51)mmHg、(194.37±41.26)ng/L,疾病组均高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析,疾病组三尖瓣反流压差与血清PRO-BNP水平呈显著正相关(r=0.643,P<0.05);87例肺动脉高压病人中共有26例伴发心力衰竭,心力衰竭并发率为29.89％(26/57);心衰组三尖瓣反流压差及血清PRO-BNP水平分别为(60.15±6.23)mmHg、(698.79±115.08)ng/L,无心衰组分别为(48.77±5.87)mmHg、(586.02±109.21)ng/L,心衰组均高于无心衰组,差异有统计学意义(P<0.05);经logistic回归分析法分析,三尖瓣反流压差>50 mmHg及血清PRO-BNP>600 ng/L均是肺动脉高压病人伴发心力衰竭的危险因素(OR=3.146、2.737,P<0.05).结论 肺动脉高压病人三尖瓣反流压差明显增大,血清PRO-BNP水平明显升高,此二者呈显著正相关,且三尖瓣反流压差可作为预测心衰的一项重要指标.     

荧光载体CS-Qdots的构建及生物相容性分析

目的：构建一种可通过荧光成像进行体内外示踪的纳米基因载体,并对其生物相容性进行初步评价。方法：在量子点Qdots表面修饰壳聚糖后形成荧光纳米颗粒CS-Qdots,检测其电镜形态、光学特征、表面电荷和傅里叶转换近红外光谱（FTIR）,并将其注射入裸鼠移植瘤内观察体内成像信号;以凝胶阻滞电泳检测CS-Qdots携带质粒DNA的能力,并利用激光共聚焦显微镜观察其转染报告基因绿色荧光蛋白在细胞内的表达情况。通过MTT试验检测细胞相对增殖率（RGR）、测定溶血率和小鼠急性毒性试验评价CS-Qdots的生物相容性。结果：电镜观察显示CS-Qdots纳米颗粒粒径为20~30 nm,zeta电位分析其表面电位为(28.02 ± 1.15)mV,FTIR图谱显示出壳聚糖的特征谱带,发射光谱分析CS-Qdots 最大发射峰值在630 nm。凝胶阻滞电泳显示纳米颗粒和DNA的比例大于10∶1混合以后不再向正极泳动,激光共聚焦观察CS-Qdots能携带质粒pEGFP-C1在HepG2细胞内表达绿色荧光蛋白,小鼠活体成像中CS-Qdots在裸鼠移植瘤内有较强荧光成像信号。MTT试验显示,50、100、200和400 μg/mL的CS-Qdots共孵育的细胞RGR分别为1.000、1.000、0.917和0.875,而相应浓度的Qdots孵育细胞RGR为1.000、0.850、0.621和0.326;浓度在100 μg/mL 以上的Qdots量子点溶血率均大于5%,而CS-Qdots纳米颗粒在400 μg/mL以内溶血率均小于5%。小鼠尾静脉注射CS-Qdots 72 h急性毒性试验显示,与生理盐水对照组相比,没有明显的脏器病理损伤,肝肾功能正常,血细胞计数正常。结论：成功构建了荧光纳米颗粒CS-Qdots,它能有效转染基因在细胞内表达,具有较高的生物相容性,并可在体内外进行荧光成像,是可示踪基因的运送纳米载体。     

人心肌肌钙蛋白ⅠcDNA的克隆及分泌表达

克隆人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因全序列,并进行分泌表达.从人心肌组织提取总RNA,经逆转录得到cDNA第一链,以此为模板,PCR扩增目的条带,重新设计上游引物,用相同PCR程序完成点突变;突变后PCR产物克隆入Pfd5载体,并用PCR、SpeI+YhoI双酶切、载体测序等方法鉴定;用ITPG诱导cTnI的表达.PCR扩增出630 bp左右条带,Pfd5-cTnI融合表达载体用PCR、SpeI+XhoI双酶切均可见630bp左右条带,测序结果与预期序列一致;诱导后培养基及细胞周质均检测到cTnI蛋白免疫原活性.人心肌肌钙蛋白I得到成功表达.     

68Ga-PSMA-I&T PET/CT评估初诊前列腺癌原发灶的肿瘤负荷

目的 探讨68Ga标记的前列腺特异性膜抗原（PSMA）PET/CT原发灶肿瘤负荷在预测初诊前列腺癌（PCa）危险分层和转移风险中的价值。方法 回顾性纳入2018年6月~2019年7月行68Ga-PSMA-I&T PET/CT检查的36 例初诊PCa患者,年龄56~89岁,平均年龄71.3±8.6 岁。测量出PCa患者原发病灶最大标准化摄取值（SUVmax）和平均标准化摄取值,分析病灶组织对68Ga-PSMA-I&T的摄取程度。采用三维体积分割技术自动测量出所有PCa患者原发病灶PSMA肿瘤体积（PSMA-TV）并计算出病灶PSMA代谢（TL-PSMA）,分析原发灶SUVmax、PSMA-TV、TL-PSMA与血清前列腺特异性抗原(PSA)、Gleason评分(GS)的相关性。所有患者分别根据PSA水平、GS、是否转移和危险程度进行分组,包括PSA≤20 ng/mL组（22例）和PSA>20 ng/mL组 （14例）,GS≤7组（18例）和GS≥8（18例）,非转移组（23例）和转移组（13例）、低-中危组（16例）和高危组（20例）,比较不同亚组间PCa的原发病灶SUVmax、PSMA-TV、TL-PSMA之间的差异。用spearman等级相关分析不符合正态分布的定量数据之间的相关性,用Pearson相关系数分析正态分布的定量数据之间的相关性。结果 PCa原发灶SUVmax、PSMA-TV和TL-PSMA和PSA都有相关性（r分别为 0.463,0.550和0.638,P均<0.05）,SUVmax、PSMA-TV和TL-PSMA和GS都有相关性（r分别为 0.467, 0.437,0.540,P均<0.05）。PCa亚组分析显示：PSA>20 ng/mL组的SUVmax、PSMA-TV和TL-PSMA均显著高于PSA≤20 ng/mL组（z分别为 -3.606,-4.035和 -4.265,P均<0.001）。GS≥8组的SUVmax、PSMA-TV和TL-PSMA均显著高于GS≤7组（z分别为 -3.512,-4.145和 -3.987,P均<0.001）。转移组的PSMA-TV和TL-PSMA均显著高于非转移组（z分别为 -2.734,-2.421,P均<0.001）,而非转移组和转移组SUVmax的差异无统计学意义。高风险组的SUVmax、PSMA-TV和TL-PSMA均高于低-中风险组,差异有统计学意义（z分别为-3.273,-4.155和 -4.298,P分别为0.002,<0.001,<0.001）。结论 68Ga-PSMA-I&T PET/CT肿瘤负荷体积参数PSMA-TV和TL-PSMA在预测初诊PCa危险分层和转移风险中具有一定的潜在优势。     

灌注法制备肺脱细胞基质

 背景：对组织器官进行脱细胞,细胞外基质在经过去除细胞和可溶性蛋白处理之后,可维持正常的器官外形及组织结构基质成分。 目的：利用灌注法制备肺脱细胞基质。 方法：将40只Wistar大鼠随机均分为2组,常规麻醉处理后打开胸腔,获得完整的肺组织,实验组利用Langendorff灌注模型构建大鼠全肺脱细胞基质支架,对照组不予以特殊处理。动态观察和记录实验组肺脏颜色和形态变化,分别从2组大鼠肺脏不同部位获取小块组织,利用电子显微镜进行组织学观察,观察两组的Weigert弹力纤维联合Von Gieson结缔组织染色和苏木精-伊红染色情况。 结果与结论：经1%脱氧胆酸钠溶液灌注后,实验组大鼠肺脏颜色逐渐发生改变,表现为从内至外呈分段分叶状逐渐变为白色半透明状,并可观察到清晰肺叶结构,最终肺脏呈现出均一的白色半透明状。经Weigert弹力纤维联合Von Gieson结缔组织染色和苏木精-伊红染色发现,对照组新鲜肺组织切片中含有大量细胞,其中包括毛细血管和成纤维细胞及内皮细胞等,细胞呈整齐排列状,具有完整的肺泡结构,弹性纤维结构清晰,胶原纤维也呈整齐排列状,结构较为紧凑;实验组肺组织细胞基本已消失,仍具有完整的肺泡形态结构,但呈较为疏松的状态且裂隙增大,弹性纤维保存良好,胶原纤维呈较疏松排列状。表明利用灌注法课可有效构建大鼠全肺组织基质支架。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

肾纤维化大鼠细胞免疫状态分析

目的探讨肾纤维化大鼠细胞免疫功能状态。方法建立阿霉素肾病大鼠模型,3H-TdR掺入法检测脾细胞增殖能力,流式细胞术检测外周血T细胞亚群、NKT细胞及Th1/Th2细胞。结果肾纤维化大鼠脾细胞对Con A诱导的增殖能力明显下降(P<0.05),T亚群细胞的比例发生改变,随着肾纤维化的进程,CD3+、CD4+所占比例降低,而CD3+、CD8+细胞增多,CD4+/CD8+逐步下降(P<0.05)。外周血CD3+、CD56+细胞却呈上升趋势,机体处于明显的Th2偏移状态。结论肾纤维化大鼠出现明显的细胞免疫功能紊乱。     

结缔组织生长因子肽对大鼠凝血参数的影响

观察结缔组织生长因子肽（P1c）对大鼠凝血参数的影响。方法：大鼠连续五天静脉注射不同剂量（2、4、8 mg？kg－1）的P1c，测定凝血参数。结果：阳性抗凝血肝素钠组与生理盐水组相比较有显著性差异（P〈0.05），低、中、高剂量的P1c 与生理盐水组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：P1c 对大鼠凝血参数没有明显影响。     

正常甲状腺功能病态综合征FT3、FT4和TSH与老年性疾病相关性研究

目的 通过测定血清游离FT3、FT4和TSH含量,探讨不同疾病组老年患者甲状腺功能状况.方法 用化学发光法测定我院226例老年患者血清FT3、FT4和TSH水平,并进行统计分析.结果 FT3、FT4和TSH测定结果分别为2.19pg/mL(中位数,P2.5～P97.5:1.00～3.12pg/mL)、1.01 ng/dL(中位数,P2.5 ～ P97.5:0.67 ～ 1.44ng/dL)和1.44μIU/mL(中位数,P2.5 ～ P97.5:0.28 ～4.92μIU/mL),FT3和FT4降低发生率分别为31.86％和3.54％,TSH增高发生率为3.10％.不同性别老年患者FT3、TSH差异具有统计学意义,而FT4差异无统计学意义.FT3、FT4和TSH异常发生率在两性之间差异均无统计学意义.FT3和FT4水平在不同疾病组之间差异显著,TSH在不同疾病组之间差异无统计学意义.FT3和TSH异常发生率在不同疾病组之间差异显著,FT4异常发生率在不同疾病组之间差异无统计学意义.结论 在老年性疾病患者中正常甲状腺功能病态综合征甲状腺功能异常发生主要为FT3降低.