新型冠状病毒核酸检测在眼科医院疫情防控中的实践与有效性研究

目的:探索以系统化、标准化的新型冠状病毒核酸检测为核心和重要组成部分,建立适合于眼科医院新冠疫情精准防控切实可行的防控体系。方法:系列病例研究。自2020年2月24日至3月2日期间,以标准化病毒核酸检测联合血常规、C反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)等检测作为所有眼科手术患者术前筛查常规检测项目,同时也为返岗员工提供病毒核酸检测。设计调查问卷了解受检者对鼻咽拭子采样的接受度以及核酸检测结果对其心理状态的影响。结果:99例患者血液学检测结果有一定的异常比例,其中SAA检测结果增高13例,淋巴细胞计数减低12例、增高5例,白细胞计数增高11例、减低1例,CRP增高2例,新型冠状病毒核酸检测均阴性。33例本院职工新型冠状病毒核酸检测均阴性。12%的受访者对鼻咽拭子采样接受度评分较低。受检者在核酸检测前后思想压力评分较高的比例分别为46.7%和6.7%。结论:该项举措一方面为术前新冠病毒肺炎筛查及鉴别诊断提供了客观依据,很大程度上排除了隐性无症状感染者传播的可能,有利于减少二次传播的风险,降低院内交叉感染的概率;另一方面,核酸检测阴性结果有利于调整患者术前的心理状态并缓解医护人员在疫情防控期间的心理压力。     

lncRNA MLK7-AS1通过抑制miR-375的表达促进胶质瘤U251细胞的增殖和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）MLK7-AS1在人脑胶质瘤组织中表达及其对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭的影响。方法 选择2016~2017年手术切除的脑胶质瘤组织标本45例，2007版WHO分级Ⅰ级8例，Ⅱ级15例，Ⅲ级10例，Ⅳ级12例。另选择其中10例瘤旁正常脑组织作对照。体外培养U251细胞和人正常星形胶质细胞（NHA）。U251细胞根据转染质粒分成四组:转染miR-375 mimic组、转染si-MLK7-AS1组、同时转染miR-375 inhibitor和si-MLK7-AS1组以及只转染miR-375 inhibitor组。RT-qPCR检测MLK7-AS1和miR-375的表达水平；荧光素酶报告基因实验验证MLK7-AS1与miR-375之间的关系；CCK-8法检测U251细胞增殖活性，Transwell实验检测U251细胞侵袭能力。结果 高级别胶质瘤组织MLK7-AS1表达水平明显高于低级别胶质瘤组织（P<0.05），而后者明显高于瘤旁正常脑组织（P<0.05）；高级别胶质瘤组织miR-375表达水平明显低于低级别胶质瘤组织（P<0.05），而后者明显低于瘤旁正常脑组织（P<0.05）。U251细胞MLK7-AS1表达水平明显高于NHA（P<0.05），miR-375表达水平明显低于NHA（P<0.05）。序列分析显示MLK7-AS1和miR-375 存在特异性结合序列，荧光素酶报告基因实验表明U251细胞MLK7-AS1负调控miR-375表达。沉默MLK7-AS1表达通过上调miR-375表达明显抑制U251细胞增殖和侵袭（P<0.05）。结论 lncRN AMLK7-AS1可能通过调节miR-375的表达水平在人脑胶质瘤中发挥着促癌的作用     

环状RNA在神经退行性疾病和动脉粥样硬化中的作用研究进展

环状 RNA（circRNA）是近年来新发现的一类内源性闭合环状非编码 RNA，可作为微小 RNA 吸附海绵、RNA 结合蛋白、转录调控因子等多种形式调控靶基因表达，在细胞增殖、迁移、凋亡和 衰老等生物过程中发挥重要作用。circRNA 在神经系统及心血管系统高丰度表达，并通过多种机制广 泛参与衰老相关疾病发生、发展进程。最新研究表明，circRNA 在阿尔茨海默病、帕金森病及动脉粥样 硬化等衰老相关疾病中扮演关键角色。现就 circRNA 在神经退行性疾病及动脉粥样硬化的作用及机制 进行综述。     

应用单分子触发式级联指数恒温扩增技术检测长链非编码RNA方法的建立

目的建立一种利用核酸恒温指数扩增技术特异性检测长链RNA的高灵敏度检测方法。方法利用恒温指数扩增(EXPAR)反应对所建立的方法进行反应条件的优化,并对该方法的通用性、特异性和灵敏度进行了系统分析。结果单分子触发反应产物可以作为引物触发指数恒温扩增;柔性引物可以提高检测特异性,柔性臂长7nt;单分子触发式级联指数恒温扩增技术能够有效检测出待检样品浓度在10fmol/L～100pmol/L范围内的靶标RNA,线性响应良好(R 2=0.955)。结论单分子触发级联式恒温指数扩增技术可以快速、准确检测长链RNA。     

DEAD盒RNA解旋酶17在乳腺癌细胞中的表达及定位

目的研究DEAD盒RNA解旋酶17 (DDX17)在人乳腺癌细胞和组织中的表达和定位。方法蛋白印迹法检测DDX17在人乳腺癌细胞系中蛋白的表达,激光共聚焦扫描显微镜和Western blot检测DDX17在MCF-7乳腺癌细胞中的定位。结果 DDX17在人乳腺肿瘤细胞系中蛋白表达水平增高,激光共聚焦扫描显微镜和Western blot观察发现DDX17主要定位于MCF-7细胞核中。结论 DDX17在人乳腺癌细胞系中高表达,主要定位于乳腺癌细胞核内,可能是人乳腺癌重要的调节因子。     

HOTAIR在Matrigel三维培养乳腺癌细胞的表达

目的建立乳腺癌MDA-MB-231细胞株三维培养模型,观察三维培养条件下乳腺癌细胞的形态、增殖以及HOTAIR表达水平的变化。方法 Matrigel三维培养乳腺癌细胞,采用倒置显微镜观察乳腺癌细胞的生长情况,通过检测DNA含量测定细胞增殖情况,Real time-RCR检测HOTAIR表达水平。结果与二维细胞培养条件相比,Matrigel三维培养的乳腺癌细胞成团生长,细胞数量显著增加,并且HOTAIR mRNA表达水平上调。结论 Matrigel三维培养体系能较好维持乳腺癌MDA-MB-231细胞形态,长链非编码RNA-HOTAIR表达在三维培养时显著升高。     

microRNAs及miR-214在神经损伤再生中的作用

microRNAs(miRs)是一类短的非编码RNA基因,参与了神经系统的生理和病理过程,许多miRs在获得性脑损伤、脊髓损伤和周围神经损伤等均存在差异表达,这些miRs主要通过靶向特异性mRNA来影响神经存活、神经再生和神经胶质表型,从而导致miRs的翻译抑制或mRNA降解。周围神经损伤会使患者躯干和四肢出现神经功能障碍,严重影响患者的劳动力和生活质量。因此,研究miRs在神经损伤和再生中的调控作用,可为治疗神经系统疾病找到潜在的治疗靶点,对拓展神经系统疾病治疗的策略具有重要的意义。microRNA-214(miR-214)是miRs家族的成员之一,有研究显miR-214在神经元分化中被调节,并且在体外控制神经突生长。本文就miRs在神经损伤中的研究进展和miR-214在周围神经再生过程中可能的作用作一综述。