不同成分灌注液对超声乳化术中兔角膜内皮细胞形态结构的影响

背景:灌注液的成分与其保护角膜内皮功能之间的联系一直是眼科界和制药业研究的热点课题。目的:观察超声乳化术中使用不同灌注液对兔眼角膜内皮细胞结构及功能的影响。设计:随机分组对照动物实验。单位:锦州医学院实验动物中心室,一所市级医院实验动物手术中心实验室。材料:实验于2004-09/2005-03在锦州医学院实验动物中心实验室和锦州市亚东眼科医院实验动物手术中心实验室进行。清洁级3.5月龄纯种日本大耳白兔16只,随机分为4组:正常对照组、生理盐水组、世可组和平衡盐液组,每组4只。灌注液世可(沈阳齐兴制药有限责任公司生产);平衡盐液(美国Alcon公司生产)。方法:用100mL/L水合氯醛(3mL/kg)腹腔麻醉,眼部用4%盐酸奥布卡因滴眼液表面麻醉。行双眼手术。使用美国Alcon超声乳化仪,常规显微手术器械,于上方巩膜缘后2mm作长约3.5mm的巩膜隧道切口,穿刺入前房,注入粘弹剂Viscoat(Alcon公司生产)0.25mL;环行撕囊,直径约5mm;超声乳化头置于中央区乳化吸出晶体核及皮质;术毕关闭切口。于术前和术后6h采用接触性角膜内皮显微镜进行角膜内皮细胞形态学定量测定:角膜内皮细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率和变异系数。术后6h应用锥蓝-茜素红活性染色,光镜下观察各组角膜内皮细胞微细结构的变化。主要观察指标:①角膜内皮细胞形态学定量分析(角膜内皮细胞密度、细胞平均面积、变异系数和六边形细胞百分率)。②角膜内皮细胞形态结构特征。结果:16只大耳白兔均进入结果分析。①术前各组间各项指标比较差异均无显著性。②细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率、变异系数:术后6h生理盐水组、世可组和平衡盐液组均低于正常对照组(P<0.05),世可组和平衡盐液组对比差异无显著性(P>0.05)。③光镜显示生理盐水组角膜内皮细胞形态改变明显,世可组和平衡盐液组角膜内皮细胞改变轻微,无细胞坏死。结论:在超声乳化术中,灌注液对角膜内皮的损伤为化学性损伤,在相同手术条件下,国产灌注液世可对角膜内皮细胞具有良好的保护作用。     

紫草素抗雌激素对人乳腺癌MCF-7细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 探讨紫草素(shikonin,SK)在雌激素作用下对人乳腺癌MCF-7细胞周期蛋白(cyclin D1)表达的影响。方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,不同浓度的紫草素及在雌激素干预下作用于细胞后,通过免疫组织化学技术、Western blot法检测cyclin D1蛋白的表达变化。结果 与空白对照组比较,雌二醇组cyclin D1表达量显著增多,SK各组表达含量显著降低,且cyclin D1蛋白表达量随SK浓度升高逐渐被抑制(P<0.05);雌二醇干预后,SK对cyclin D1蛋白量的表达同样具有抑制作用(P<0.05)。结论 SK能降低MCF-7细胞中cyclin D1蛋白水平表达,具有浓度依赖性,并且对雌激素上调cyclin D1表达具有明显的抑制作用。     

二仙汤及其组方中药对幼年大鼠卵巢形态学影响

目的:通过二仙汤及其组方中药对幼年大鼠卵巢的形态学观察,探讨其对卵巢功能的影响机制。方法:幼年SD大鼠54只,分为正常对照组、阳性对照组、二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、巴戟天组、当归组、黄柏组和知母组9组。各组给药6d后麻醉大鼠,取血清测量卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)的含量,分离摘取双侧卵巢,称重后常规石蜡包埋切片,行HE染色和免疫组织化学染色。结果:阳性对照组、仙茅组和黄柏组卵巢系数与正常组对比增加明显,差异有统计学意义(P<0.05)。仅阳性对照组E2含量升高。HE染色发现阳性对照组、二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、当归组和黄柏组卵泡数量明显增多,其中阳性对照组、仙茅组和黄柏组可见黄体形成。免疫组织化学染色发现雌激素受体α(ERα)在各组大鼠的卵巢颗粒细胞中未见表达,雌激素受体β(ERβ)主要表达于各组大鼠的卵巢颗粒细胞的细胞核中;二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、当归组和黄柏组ERβ表达显著增强(P<0.05)。结论:二仙汤及其方中温肾药(淫羊藿、仙茅),滋阴药(黄柏)和调理冲任药(当归)通过上调卵泡颗粒细胞ERβ表达,促进卵泡发育成熟和排卵。     

二仙汤及其组方中药对幼年大鼠肾上腺雌激素受体表达的影响

目的通过观察二仙汤及其组方中药对幼年大鼠肾上腺雌激素受体(ER)表达的影响,探讨其对肾上腺功能的影响机制。方法幼年SD大鼠54只,分为正常对照、阳性对照、二仙汤、淫羊藿、仙茅、巴戟天、当归、黄柏和知母9组,各组给药6d后麻醉大鼠,取血清测量睾酮的含量,分离摘取双侧肾上腺,称重后常规石蜡包埋切片,行免疫组织化学染色。结果阳性对照组、二仙汤组肾上腺系数增加,二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组和知母组血清睾酮水平降低,以二仙汤组最明显(P0.01)。ERα主要分布于肾上腺皮质球状带和束状带细胞的细胞质中,二仙汤组平均光密度值升高,而阳性对照组下降;ERβ主要分布于肾上腺皮质球状带和束状带细胞的细胞核中,二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组和知母组平均光密度值与阳性对照组比较下降。结论二仙汤及其方中温肾药(淫羊藿、仙茅)和滋阴药(知母)通过影响不同类型ER在肾上腺皮质中的分布发挥植物雌激素样作用。     

顺铂诱导颗粒细胞损伤及二仙汤含药血清保护颗粒细胞的作用机制

目的:探讨顺铂对卵巢颗粒细胞的影响及二仙汤含药血清改善大鼠卵巢颗粒细胞损伤的作用机制。方法:选取大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂处理的方法,将顺铂处理后卵巢颗粒细胞随机分为:c DDP组、c DDP+雌二醇组、c DDP+二仙汤组,另设正常组,加入相应药理血清连续培养48 h。采用Western Blotting法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax蛋白表达; RT-PCR法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax mRNA表达。结果:与正常对照组比较,c DDP组bax mRNA及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与c DDP组比较,CDDP+雌二醇组及c DDP+二仙汤组Bax mRNA及蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与正常组比较,c DDP组bcl-2 mRNA水平及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与c DDP组比较,CDDP+雌二醇组及c DDP+二仙汤组bcl-2 mRNA转录及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:二仙汤能够抑制c DDP诱导的卵巢颗粒细胞损伤,其作用机制可能与调节bcl-2/bax平衡有关。     

糖尿病患者冠状动脉狭窄程度与血脂的关系研究

目的 探讨2型糖尿病患者冠状动脉狭窄程度与血脂代谢异常的关系。方法 将临床确诊为2型糖尿病且已行冠状动脉造影的80例患者，根据冠状动脉造影结果分为冠脉造影阴性组、轻度狭窄组和中、重度狭窄组，分别检测患者的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及空腹血糖(BG)。结果轻度狭窄组及中、重度狭窄组的TG、LDL-C、HDL-C及BG水平与冠脉造影阴性组间差异有显著性意义；轻度狭窄组与中、重度狭窄组的TG，LDL-C，HDL-C水平间差异均有显著性意义。结论糖尿病血脂代谢异常与患者的冠状动脉狭窄程度关系密切，TG，LDL-C及HDL-C水平可影响冠状动脉病变程度。     

大鼠生后肾内皮型一氧化氮合酶的定量分析

为探讨内皮型一氧化氮合酶在大鼠生后肾发育中的作用,采用SD大鼠按生后年龄随机分为6组,即新生组、生后3天组、5天组、7天组、14天组和成年组,用免疫印记技术和光密度分析法对各组大鼠生后肾内皮型一氧化氮合酶进行定量检测,以测得的一氧化氮合酶最大量为1(100%),计算蛋白相对含量,SPSS10.0统计软件包统计分析。结果显示,新生组酶含量最高为1,随年龄增长酶含量逐渐减少,至第7天达到最少为44.60±2.41%,以后又增高至14天达成年水平为71.55±4.35%。提示大鼠生后不同年龄组肾内皮型一氧化氮合酶有明显的变化规律,NO可能在肾脏的成熟与发育中起重要作用。     

超声乳化术中粘弹剂对角膜内皮保护作用的定量分析

目的观察两种粘弹剂V iscoat和Amvisc Plus在超声乳化术中对角膜内皮细胞的保护作用,并作定量分析。方法10只纯种日本大耳白兔随机分为两组:V iscoat组和Amvisc Plus组。每组5只兔,每只兔双眼行超声乳化术,术后6小时应用裂隙灯显微镜检查角膜,并用接触性角膜内皮显微镜观察角膜内皮细胞密度,同时在透射电镜下观察角膜内皮细胞的形态学变化。结果V is-coat组角膜大多透明,内皮细胞损失率最小(4.99±2.70)%,而Amvisc Plus组角膜水肿明显,内皮细胞损失率(8.22±1.52)%,与V iscoat组对比差异显著(P<0.05),透射电镜显示V iscoat组内皮细胞损害小。结论在相同的手术条件下,弥散性粘弹剂V iscoat对比其他粘弹性物质保护效果要好。     

胚胎小鼠肾脏发育中神经型一氧化氮合酶的定量分析

目的:探讨神经型一氧化氮合酶在胚胎小鼠妊娠不同时期肾脏发育中的意义。方法:选用成年健康昆明小白鼠,按雌雄比例3:1同窝饲养,采用检查阴道栓脱落的方法确定雌鼠受孕时间。选取胚龄12天(ED12)、14天(ED14)、16天(ED16)、18天(ED18)的胎鼠及出生时(PD0)仔鼠,分5组,每组各6只母鼠,每只母鼠取2只胎鼠或仔鼠,剖腹取肾脏,用免疫印迹技术(Westernblot)及光密度分析系统分别对各组胎鼠或仔鼠肾脏内nNOS进行定量检测。结果:Western blot及光密度分析显示,ED14组肾脏nNOS含量最少,随后逐渐增多,PD0组肾脏nNOS含量最多。结论:胚胎小鼠肾脏nNOS在胚胎第14天开始呈阳性表达,以后含量逐渐升高,出生时含量最高,表明nNOS在胚胎小鼠肾脏发育的早期阶段起重要作用。     

卵巢早衰颗粒细胞凋亡调控机制的研究进展

卵巢早衰是妇科疾病中常见病之一,近年来其发生率呈逐年增加的趋势,且低龄化趋向愈益明显。卵巢早衰发生的主要机制是卵泡细胞闭锁进程的加速,而其进程加速主要是由于颗粒细胞的凋亡,所以颗粒细胞在评判卵母细胞是否健康,胚胎生长状态是否良好这两方面起到了举足轻重的作用。因此对于总结研究近年来颗粒细胞凋亡调控机制相关文献十分必要。本文总结归纳了相关文献,根据具体机制的不同,分为3个角度,调控颗粒细胞凋亡的相关基因,介入颗粒细胞凋亡过程的细胞因子和调节颗粒细胞的相关激素,从这几方面进行了综述。