不同结合状态硫酸软骨素多糖链对体外二维三维培养背根节神经突起生长影响研究

目的构建鸡胚背根节细胞3D生长模型,观察CSPG对不同浓度的琼脂糖水溶胶培养基对鸡胚背根节神经突起生长的影响。方法①利用多肽缩合剂1’1羰基二咪唑介导CS-B长链与琼脂糖凝胶共价结合。②分别配制0.5%、0.75%、1%、1.25%、1.5%的SeaPrep琼脂糖凝胶溶液和共价结合了CS-B多糖长链的琼脂糖凝胶溶液。取孵育9~10天后鸡胚背根节加入上述凝胶溶液加培养液培养。③培养24小时之后在24 h、48 h7、2 h、96 h进行观察拍照。观察各时间点神经突起生长情况。结果①鸡胚背根节神经突起在1.25%的琼脂糖凝胶溶液中开始呈3D生长,在小于1%的琼脂糖溶液中只能2D生长。②在同一时间点,呈2D生长的背根节突起和呈3D生长的背根节突起在突起长度方面没有统计学差异(P>0.05)。③3D生长的DRG神经突起在共价结合了CS-B的琼脂糖凝胶中生长长度明显短于普通琼脂糖水凝胶(P<0.05),并且可观察到部分突起长出短而直的成束突起。但是对于呈2D生长的DRG突起长度在两种培养基中却未见差异(P>0.05)。结论鸡胚背根节神经元周围突起生长长度在3D培养中与在2D培养中有没有明显的差异。硫酸软骨素能够有效抑制呈3D生长的神经节突起生长,并且影响到神经突起的生长方式。但是在2D培养基中,未能看到上述的抑制作用。     

针刺对备用背根节神经元NP-1表达的影响

目的探讨针刺对备用背根节（dorsal root ganglion，DRG）NP-1表达的影响。方法将25只成年雄猫分为5组，即假手术组、单侧备用背根手术7d组、单侧备用背根手术并针刺7d组、单侧备用背根手术14d组和单侧备用背根手术并针刺14d组。通过免疫组化ABC法，观察各组备用DRG中NP-1的免疫反应神经元数目。结果在假手术组，NP-1阳性神经元主要定位于部分中小神经元及少数大神经元胞浆中；部分背根切断7d后NP-1阳性中小神经元数较假手术组明显减少（P〈0．05），NP-1阳性大神经元数与假手术组者差异无统计学意义（P〉0．05）；而术后14d，NP-1阳性中小神经元数较7d组明显增多（P〈0．05），且回升至假手术组水平，NP-1阳性大神经元数与手术7d组差异无统计学意义（P〉0．05）；针刺7d组较手术7d组NP-1阳性中小神经元数增多（P〈0．05），但尚未回升至假手术组水平，NP—1阳性大神经元数减少（P〈0．05）；针刺14d组各类阳性神经元数目与手术14d组及针刺7d组差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论针刺可上调NP-1在备用DRG中小神经元的表达。     

KTDA抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的探讨3-Keto-tirucall-8,24-dien-21-oic acid(KTDA)体外抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察KTDA对肿瘤细胞的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察肿瘤细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳法检测它们对细胞DNA降解的影响。结果KTDA浓度为100、10、1μg.mL-1,作用72 h时,能抑制人乳腺癌细胞系MCF-7、人肝癌细胞株SMMC-7721、人慢性髓性白血病细胞系K562、人宫颈癌细胞系Hela、人舌癌细胞系Tca 8113的生长,并呈浓度依赖性。当KTDA浓度为10μg.mL-1时,处理72 h后,于荧光显微镜下观察到凋亡小体,电泳结果显示典型的DNA梯状条带。结论KTDA能抑制5种肿瘤细胞的增殖,并呈浓度依赖性,KTDA对MCF-7、SMMC-7721、K562、Hela比较敏感,Tca 8113次之,其机制可能为通过诱导5种肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤的作用。     

两色紫金牛化学成分研究

目的研究两色紫金牛的活性化学成分。方法应用柱色谱分离化学成分,波谱方法鉴定化合物结构。结果从两色紫金牛中分离得到10个化合物,分别鉴定为3-βO-{-αL-吡喃鼠李糖基-(1→2)--βD-吡喃葡萄糖-基(1→4)--αL-吡喃阿拉伯糖基}-16-酮-西克拉敏A(1),3-βO-{-βD-吡喃木糖基-(1→2)--βD-吡喃葡萄糖-基(1→4)--αL-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(2),3-βO-{α-L-吡喃鼠李糖-基(1→2)--βD-吡喃葡萄糖基-(1→4)--αL-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(3),3-βO-{-αL-吡喃鼠李糖基-(1→2)--βD-吡喃葡萄糖-基(1→4)-[-βD-吡喃葡萄糖-基(1→2)]--αL-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(4),3-βO-{-αL-吡喃鼠李糖基-(1→2)--βD-吡喃葡萄糖-基(1→4)-[-βD-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--αL-吡喃阿拉伯糖基}-16α,28-二羟基-12-烯-30-齐墩果酸(5),α-菠菜甾醇(6),羽扇豆醇(7),去甲岩白菜素(8),咖啡酸(9)和4-甲氧-基3,5-二羟基苯甲酸(10)。结论化合物1~10均为首次从该种植物中分离得到,其中化合物7,9,10为首次从该属植物中分离得到。     

组织学与胚胎学双语教学对学生专业知识学习的影响

研究双语教学对基础医学专业五年制学生学习组织胚胎学专业知识的影响。比较基础医学专业五年制1998级和2002级学生组织胚胎学考试成绩差异，对1998级学生采用中文教材，授课和测试都用中文；对2002级学生采用的是中英文教材，双语授课，测试用全英文。两班进行的组织胚胎学专业水平测试难度相当。两班组织胚胎学考试成绩无显著差别。双语教学没有影响学生对组织胚胎学专业知识的学习和掌握。     

茵陈五苓糖浆质量标准研究

目的:完善茵陈五苓糖浆的质量标准.方法:采用TLC法鉴别方中桂枝、茵陈;采用HPLC法测定方中绿原酸含量.结果:薄层鉴别特征明显,专属性强.HPLC法测定绿原酸在0.033 ～0.602 μg范围内有良好的线性关系,r=0.999 8,平均回收率为99.8％,RSD=1.4％(n=6).结论:本方法简便、可靠、准确,可用于茵陈五苓糖浆的质量控制.     

部分背根切断对备用背根节神经元Bax、Bcl-2及Caspase-3表达的影响

目的　研究部分去背根对备用背根节 (DRG)神经元 Bax、Bcl- 2、Caspase- 3表达的影响。方法　制作单侧备用背根模型 ,3d、7d和 14 d后取备用背根节分别用兔抗 Bax、Bcl- 2及 Caspase- 3行免疫组化 ABC法染色 ,同时另设一正常对照组。分别计数单位面积内各组大、中小阳性神经元的数量。结果　正常组 Bax、Bcl- 2、Caspase-3阳性反应物主要分布于背根节的中小神经元和少数大神经元。术后 3d,Bax总阳性神经元数较正常组明显增加(P<0 .0 5 ) ,至术后 14 d Bax总阳性神经元数下降并恢复到正常水平。各时间段 Bcl- 2总阳性神经元数无显著性差异。3d组 Caspase- 3总阳性神经元数与正常组比较显著增加 (P<0 .0 5 ) ;7d组、14 d组与 3d组无显著差异。 Bax、Bcl- 2和 Caspase- 3阳性大神经元数在各时间段均无显著性差异 ,阳性中小神经元数的变化规律与总阳性神经元数的变化规律相同。结论　部分去背根主要对备用 DRG中小神经元 Bax、Bcl- 2、Caspase- 3表达有影响 ,三因子表达高峰可能在术后 3～ 7d。     

部分背根切断对备用背根节神经元CNTF、PDGF表达的影响

目的　研究部分去背根对备用背根节神经元睫状神经营养因子 (CNTF)和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法　制作猫备用背根模型 ,分别在 3d、7d及 14 d时取备用背根节用 CNTF抗血清、PDGF抗血清行免疫组织化学 ABC法染色。分别计数各组阳性神经元总数以及大、中小阳性神经元的数量。结果　两因子在备用背根节的大、中小神经元均有表达。 CNTF阳性神经元总数及中小阳性神经元数均在 3d时明显减少 (P<0 .0 5 ) ,7d、14 d时与正常比较无差异 ,大阳性神经元在各个时间段与正常相比无差异。PDGF阳性神经元总数及中小阳性神经元数在 3d、7d时均较正常显著减少 (P<0 .0 5 ) ,14 d时与正常无差异 ,大阳性神经元数各个时间段均无差异。结论　部分背根切断对备用背根节内不同神经元表达 CNTF、PDGF有不同的影响。     

HPLC法测定浓维磷糖浆3种成分的含量

目的：建立同时测定浓维磷糖浆中咖啡因、维生素B₁和烟酸含量HPLC方法。方法：采用UltiMate XB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱；以0.1%辛烷磺酸钠(含0.1%磷酸)为流动相A、乙腈为流动相B,梯度洗脱；流量1.0 mL.min_-1；柱温30℃；检测波长261nm。结果：咖啡因、维生素B₁和烟酸的线性范围分别为38.22μg/ml～382.25μg.mL_-1(r=1.0000)、7.28μg/ml～72.75μg.mL_-1(r=0.9995)和0.78μg/ml～7.84μg.mL_-1(r=1.0000)；平均回收率(n=9)分别为99.3%、99.8%、98.6%,RSD分别为0.66%、1.14%、1.30%。结论：所建方法快速、准确、可靠,可用于浓维磷糖浆的质量控制。