DADS通过Rac1-ADF/cofilin1通路抑制人结肠癌SW480 细胞迁移与侵袭

  目的   研究二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）通过Rac1-ADF/cofilin1通路对人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭的作用。  方法  划痕愈合和侵袭实验分别检测DADS对SW480细胞迁移与侵袭的影响；RT-PCR与Western blot检测DADS对SW480细胞Rac1-ADF/cofilin1信号分子表达的作用。  结果  40与50 mg/L DADS处理SW480细胞24 h后，穿膜细胞分别减少57.12%与64.59%（P < 0.05）。处理48 h细胞迁移率分别为23.23%与12.87%，较对照组75.86%明显降低（P < 0.05）。RT-PCR显示，45 mg/LDADS处理SW480细胞24、48h后，与对照组比较Rac1、Rock1、PAK1、LIMK1和destrin mRNA分别显著下调（P < 0.01）；而cofilin1 mRNA无显著性差异（P>0.05）。Western blot显示，45 mg/L DADS处理SW480细胞6、12、24、48 h后，与对照组比较Rac1、Rock1、PAK1、LIMK1和destrin蛋白分别呈时间依赖性下调（P < 0.05），但cofilin1蛋白无显著性差异（P>0.05），而p-LIMK1和p-cofilin1表达分别呈时间依赖性下调（P < 0.05）。  结论   DADS可通过Rac1-ADF/cofilin1通路下调Rac1、Rock1、PAK1、LIMK1、p-LIMK1、destrin与p-cofilin1抑制SW480细胞迁移与侵袭。      

DADS诱导人结肠癌细胞双向电泳图谱的差异分析

目的近年来,蛋白质组学技术已广泛应用于肿瘤研究领域,但对结肠癌的研究较少。该实验旨在研究二烯丙基二硫(DADS)体外诱导人结肠癌SW 480细胞蛋白质组差异表达的相关分子机制。方法采用蛋白质组学相关技术,如二维电泳、图像分析、质谱技术等方法,获得DADS体外培养的人结肠癌SW 480细胞蛋白质组的肽质量指纹图,将所得的数据进行生物信息学处理。结果在相同条件下,对DADS处理前后SW 480细胞两种样品的总蛋白质进行双向电泳,经PDQuest软件分析,结果显示,其中167个匹配的蛋白质点存在表达量上的差异,与对照组相比,处理组蛋白质表达量下调的有69个,利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱技术(MALD I-TOF-MS)对其中8个表达明显下调的蛋白质斑点进行分析鉴定,获得相应的肽质量指纹图谱(PMF),通过数据库搜索,初步确定这8个蛋白质分别是:细胞角蛋白19(Cytokeratin-19)、肌动蛋白解聚因子(Actin-de-polym erizing factor)、V-1蛋白(V-1 prote in)、果糖二磷酸醛缩酶(Fructose b isphosphate aldolase,FBA)、FK506结合蛋白(FK506-b ind ing prote in,FKBP)、成帽蛋白(Capp ing prote in)、硫氧还蛋白过氧化物酶(Th ioredoxin peroxidase)和敏感性转化蛋白(Transform ation-sensitive prote in)。结论这些差异蛋白质涉及细胞周期调控、细胞分化、细胞凋亡及细胞分裂增殖等众多事件,从而说明,DADS可能具有抑制结肠癌细胞生长,阻滞细胞周期,诱导细胞分化及凋亡的作用。     

二烯丙基二硫对人结肠癌HT-29细胞G_1期的阻滞作用

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌HT-29细胞G1期的阻滞作用及分子机制。方法采用MTT、细胞计数法、流式细胞术和免疫细胞化学方法分析DADS对体外培养的HT-29细胞增殖抑制作用、细胞周期分布及细胞周期相关蛋白表达的影响。结果MTT法显示,60、120μmol.L-1DADS作用HT-29细胞24 h后,生长抑制率分别达23.1%、45.6%。细胞计数法表明,常规培养HT-29细胞群体倍增时间为22.58 h,60μmol.L-1DADS作用HT-29细胞后,其细胞群体倍增时间延长到31.20 h。流式细胞仪分析结果显示,60μmol.L-1DADS阻滞HT-29细胞在G1期,与对照组相比,可使G1期细胞增加约2倍,而120μmol.L-1DADS显著地将细胞阻滞在G2/M期。免疫细胞化学分析表明在G1期阻滞同时有p21W af1蛋白表达上调,Cyc lin E、C-myc蛋白表达下降。结论低剂量DADS对HT-29细胞的抑制增殖作用可能与G1期阻滞有关,DADS对HT-29细胞G1期阻滞的分子机制可能与调节p21W af1、Cyc lin E、C-myc表达相关。     

生物传感器及其在卵巢癌诊治中的应用进展

生物传感器（Biosensor）是利用生物或生物衍生的敏感元件将生物反应所引起的化学、物理变化转换成光、电、磁等物理信号的检测装置，主要由识别元件（如蛋白质、核酸、抗体等）、信号转换器件（如氧电极、光敏管、场效应管等）和信号放大装置构成；它是由生物信息学、生物控制论、     

鼻咽癌代谢重编程与放疗抵抗

鼻咽癌是一种具有地域分布性的鼻咽上皮恶性肿瘤,放疗抵抗是鼻咽癌患者治疗失败的主要原因。代谢重编程是调控肿瘤发生发展的核心,代谢变化能够影响肿瘤的发生、发展及治疗抵抗。糖酵解、氧化磷酸化、脂肪酸氧化等代谢途径均参与肿瘤放疗敏感性的调控。肿瘤微环境变化、基因突变或基因异常表达、基因表观遗传修饰或某些信号通路异常激活是调控鼻咽癌放疗抵抗的主要机制。近年来,越来越多的研究显示,代谢重编程在鼻咽癌放疗抵抗中扮演了重要角色,可通过调控DNA损伤修复、细胞周期、凋亡与自噬、肿瘤细胞干性和免疫反应等来调节鼻咽癌细胞的放疗抗性。靶向代谢重编程可为鼻咽癌放疗增敏提供新的策略和思路。     

uPAR与肿瘤的研究新进展

尿激酶型纤溶酶原激活物受体(urokinase plasminogen activator receptor,uPAR)是一个糖基磷脂酰肌醇锚定的蛋白质,高亲和力结合并激活尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase plasminogen activator,uPA),由此调节细胞表面蛋白水解活性。uPAR在几乎所有人类肿瘤中高表达,其高表达与增强肿瘤增殖、迁移、侵袭有关。本文对uPAR增强肿瘤趋向性、诱导上皮-间质转变与促进胞葬作用等新功能以及靶向uPAR治疗进展进行综述。     

金樱子对实验性糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应的影响

目的 探讨金樱子对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应的影响,并探讨其作用机理.方法 STZ腹腔注射诱导建立SD(Sprague-Dawley)大鼠糖尿病模型后,随机分为糖尿病模型组和金樱子干预组,同时另设正常对照组和金樱子对照组.测定大鼠肾组织总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量.免疫组织化学、Western blot,Real-time PCR检测各组肾组织核转录因子κB(NF-κB)表达情况.结果 与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠肾组织T-AOC,SOD活性明显减弱,MDA含量明显增强(P<0.01),而糖尿病大鼠经金樱子处理后,肾组织T-AOC,SOD的活性显著增强,MDA含量显著降低(P<0.05),且能在mRNA和蛋白水平显著下调肾组织中NF-κB的表达.结论金樱子可通过降低糖尿病大鼠肾脏中NF-κB表达,抑制氧化应激,增强抗氧化酶活性起到保护肾脏的作用.     

DADS对人结肠癌SW480细胞裸鼠致瘤的影响

目的探讨二烯丙基二硫（DADS）对人结肠癌SW480细胞裸鼠致瘤的影响。方法建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型。15只实验裸鼠分为3组,每组5只。观察DADS对裸鼠致瘤的影响,并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率。光镜下观察移植瘤组织形态学改变,采用免疫组织化学法检测瘤组织内增殖细胞核抗原（PCNA）、p21WAF1蛋白表达情况,应用流式细胞术检测移植瘤细胞周期分布。结果 DADS能明显降低人结肠癌SW480细胞致瘤性,抑制移植瘤生长,降低肿瘤组织异型性,引起细胞周期G2/M阻滞,抑制PCNA蛋白表达,增强p21WAF1蛋白表达。结论 DADS可明显降低人结肠癌SW480细胞的致瘤性,抑制SW480细胞增殖,引起G2/M期阻滞,其可能与抑制PCNA蛋白表达、增强p21WAF1蛋白表达有关。     

二烯丙基二硫对人结肠癌SW480细胞周期的阻滞作用

背景与目的:前期研究表明,二烯丙基二硫(diallyl disulfide.DADS)能有效在体内外抑制人结肠癌细胞增殖,并将细胞阻滞于G2/M期.本实验旨在进一步探讨DADS对人结肠癌SW480细胞周期阻滞作用的可能机制.方法:采用MTT、细胞计数法检测DADS对SW480细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测DADS对SW480细胞周期的影响;免疫细胞化学法检测DADS作用后PCNA、P53表达情况,蛋白印迹法分析P21WAF1、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)表达的改变.结果:不同浓度DADS作用SW480细胞24、48、72 h后.对细胞增殖的抑制作用及细胞群体倍增时间呈浓度、时间依赖性增加.流式细胞仪分析结果显示,DADS作用SW480细胞后,G0/G1期细胞含量降低.S期细胞比例变化不大,而G2/M期细胞比例则明显增加,且随着处理浓度的增加和处理时间的延长,其G2/M期细胞含量逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).DADS作用后.免疫细胞化学检测显示,PCNA、P53蛋白表达明显下降.蛋白印迹分析显示,DADS作用SW480细胞后,Cyclin BI蛋白表达明显下降,P21WAF1蛋白的表达明显升高,均呈时间效应关系.结论:DADS可能通过下调PCNA、P53、Cyclin B1蛋白表达.上调P21WAF1蛋白表达引起SW480细胞G2/M期阻滞.     

Cdc25C在食管鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系*

目的 探讨食管鳞状细胞癌（以下简称食管鳞癌）组织中细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C（Cdc25C）的表达与放疗抵抗间的关系。方法 回顾性分析2011年1月—2016年12月在湖南省肿瘤医院接受根治性放疗的食管鳞癌患者50例,采用免疫组织化学法检测放疗前食管鳞癌组织中的Cdc25C的表达水平,分析Cdc25C表达与放疗后食管鳞癌患者近期疗效及生存预后的关系。结果 食管鳞癌Cdc25C高表达组患者与低表达组患者的生存率比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,高表达组患者生存率低于低表达组患者。Cdc25C在食管鳞癌中高表达与预后不良相关。结论 Cdc25C的高表达可能增强食管癌对放疗的抵抗,Cdc25C有望作为食管鳞癌放射治疗中潜在判断预后的分子标志物。