软枣猕猴桃根蒽醌类化合物的提取及其体外抗肿瘤实验

目的 建立软枣猕猴桃根蒽醌类化合物的提取方法,观察其对白血病细胞JARKET、RAJI、L1210和K562的抑制作用.方法 采用优化的乙醇回流提取法提取软枣猕猴桃根蒽醌类化合物,MTT法测定其对四种白血病细胞的生长抑制情况.结果 建立了软枣猕猴桃根蒽醌类化合物的提取方法并证实其对四种白血病细胞株均有明显抑制作用.结论 初步确定蒽醌类化合物为软枣猕猴桃根抗肿瘤的活性成分,软枣猕猴桃根蒽醌类化合物具有一定的体外抗肿瘤作用.     

Urantide降低动脉粥样硬化大鼠胸主动脉中p38 MAPK表达

目的探讨尾加压素拮抗剂urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠胸主动脉中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)基因和蛋白的影响。方法 180只Wistar大鼠分为:正常组(NC)、模型组(AS)[采用腹腔注射维生素D_3(VD_3)并联合高脂饲料喂养的方法建立AS大鼠模型]、辛伐他汀组(灌胃给予辛伐他汀5μg/kg)、urantide 3、7、14 d组(尾静脉注射urantide 30μg/kg)。给药结束后,HE染色大鼠胸主动脉;免疫组织化学染色、RT-qPCR以及Western blot检测大鼠胸主动脉中p38 MAPK mRNA和蛋白表达。结果 AS组大鼠胸主动脉出现典型的AS病理改变,urantide使胸主动脉AS病变明显减轻。AS组大鼠胸主动脉中p38 MAPK阳性表达以及基因和蛋白水平与NC组相比显著升高(P0.01);Urantide各给药组大鼠胸主动脉中p38 MAPK阳性表达以及基因和蛋白水平与AS组相比显著降低(P0.01)。结论 Urantide可通过抑制p38的表达而起到保护胸主动脉,防治AS的作用。     

Urantide对动脉粥样硬化大鼠肝功能及组织形态学的影响

目的:探讨urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠肝功能及组织形态学的影响。方法:采用腹腔注射维生素D3(VD3)及高脂饮食的方法复制Wistar大鼠AS模型,随机分为正常对照组、AS模型组、阳性药组和uran-tide组。生化分析仪检测各组大鼠肝功能指标;HE染色观察大鼠胸主动脉和肝脏的病理学变化;RT-qPCR和Western blot法检测大鼠肝脏中尾加压素Ⅱ(UII)及其受体GPR14的mRNA和蛋白表达水平。结果:AS模型组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)和碱性磷酸酶(ALP)水平较正常对照组显著升高(P 0.05);urantide组大鼠上述各项指标较模型组均显著降低(P 0.05);各组血清中直接胆红素(DBIL)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)和白蛋白(ALB)水平均无显著变化。Urantide可延缓AS大鼠肝细胞脂肪变性,修复肝细胞损伤。AS组大鼠肝脏中UII和GPR14mRNA及蛋白表达水平均较正常组显著增高(P 0.05);随着给药时间的延长,urantide治疗组大鼠肝脏中UII和GPR14 mRNA及蛋白表达水平较AS模型组显著降低(P 0.05)。结论:Urantide可明显减轻AS大鼠肝脂肪变性所引起的肝功能损伤。     

Urantide 对动脉粥样硬化大鼠肾组织中STAT3 表达的影响

目的??探讨 U Ⅱ受体拮抗剂——Urantide 对动脉粥样硬化（AS）大鼠急性肾损伤（AKI）中信号传 导与转录激活因子 3（STAT3）表达的影响。方法??采用经腹腔注射维生素 D 3 （Vit?D 3 ）及饲以含高脂成分特制 饲料的方法复制 AS 大鼠模型,按照随机原则分为 4 组 ： 正常组、模型组、辛伐他汀组、Urantide 组。采用 HE 染色观察各组大鼠肾小球形态结构变化 ; 全自动生化分析仪检测大鼠血清中尿素氮（BUN）含量变化 ; Western blotting 检测肾组织中 STAT3、p-STAT3 蛋白表达水平。结果??模型组 HE 染色显示肾小管间质水肿,部分肾小 球萎缩,肾小球囊壁与周围组织粘连 ; 模型组大鼠血清中 BUN 含量及肾组织中 STAT3、p-STAT3 蛋白表达 水平较正常组升高（ P <0.05） 。与模型组比较,辛伐他汀组大鼠肾小球和肾小管间质的形态学变化趋于正常组, 大鼠血清中 BUN 含量降低（ P <0.05） ,肾组织中 STAT3、p-STAT3 蛋白表达水平升高（ P <0.05） ; Urantide 组 大鼠肾小球萎缩和肾小管间质水肿的形态学变化有所改善,大鼠血清中 BUN 含量降低（ P <0.05） ,肾组织中 STAT3、p-STAT3 蛋白表达水平降低（ P <0.05） 。结论??Urantide 可通过调节 STAT3 的表达缓解 AKI,以及改善肾小球的功能。     

urantide对动脉粥样硬化大鼠血钙、血脂和心肌酶学指标的影响

目的：探讨urantide对动脉粥样硬化（AS）大鼠血钙、血脂和心肌酶学指标的影响,阐明其防治AS的作用机制。方法：选取180只Wistar大鼠,随机分为正常对照组、AS组、阳性药（辛伐他汀）组和urantide组（3、7和14 d组）,每组30只。采用腹腔注射维生素D₃（VD₃）和高脂饲料喂养的方法建立大鼠AS模型。各组大鼠在实验前、用药前和实验结束时分别称体质量,并应用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清中Ca²⁺、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）水平。结果：正常对照组大鼠体质量随着饲养时间的延长而增加;与正常对照组比较,AS组大鼠用药前体质量明显降低（P<0.01）;与AS组比较,各给药组大鼠给药后体质量不同程度增加（P<0.05或P<0.01）。与正常对照组比较,AS组大鼠血清中Ca²⁺、TC、TG、LDL、CK和LDH水平均明显升高（P<0.01）,而HDL水平则明显降低（P<0.01）;与AS组比较,urantide组大鼠血清中Ca²⁺、TC、TG、LDL、CK和LDH水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）,而HDL水平升高（P<0.05或P<0.01）。结论：urantide可通过下调或上调AS大鼠血清中Ca²⁺、血脂和心肌酶学指标水平而起到防治AS的作用。     

低水平活性氧对Ras癌基因诱导肝肿瘤发生的影响

目的 探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在Ras癌基因诱导体内肝肿瘤发生中的作用.方法 采用H-ras12V转基因肝癌小鼠模型,原位灌流法分离3个月龄雄鼠肝细胞和DCF-DA染色,流式细胞术检测肝细胞中的ROS水平;免疫荧光测定试剂盒检测7个月龄雄鼠肝组织ROS水平.对3和7个月龄雄鼠肝组织及肝肿瘤组织进行总蛋白提取,蛋白质印迹法检测ERK、p-ERK、p53、p21和Caspase-3的表达水平.结果 流式细胞检测结果表明,3个月龄转基因雄鼠肝细胞中的ROS水平为7.81±0.53,比非转基因雄鼠肝细胞的1.00±0.16显著升高,t=21.31,P＜0.001.免疫荧光检测表明,7个月龄转基因雄鼠肿瘤周围(P)组织中的ROS水平为18.25±4.41,比非转基因雄鼠肝(Wt)组织的2.42±0.61显著升高,t=6.16,P=0.004;比转基因雄鼠肿瘤(T)组织的3.18±1.75也显著升高,t=5.50,P=0.005.蛋白质印迹法检测表明,3个月龄转基因雄鼠肝组织中的p-ERK水平为5.36±0.32,比非转基因雄鼠肝组织的0.08±0.04显著升高,t=16.55,P=0.003.7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中p-ERK蛋白水平为22.09±6.57,比非转基因雄鼠肝组织的0.08±0.02显著升高,t=5.80,P=0.004;比转基因雄鼠肿瘤周围组织的8.60±3.23也显著升高,t=3.19,P=0.033;7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中p53蛋白水平为4.86±2.18,比非转基因雄鼠肝组织的39.23±13.43显著降低,t=-3.31,P=0.046;比转基因雄鼠肿瘤周围组织的31.09±7.60也显著降低,t=-3.32,P=0.029.7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中p21蛋白水平为4.38±3.28,比非转基因雄鼠肝组织的33.47±8.04显著降低,t＝-5.95,P=0.010;比转基因雄鼠肿瘤周围组织的24.02±10.18也显著降低,t=-3.18,P=0.034.7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中的Caspase-3活化片段所占比例(17×103/35×103)为0.09±0.05,比非转基因雄鼠肝组织的0.22±0.04显著降低,t=-3.84,P=0.018;转基因雄鼠肿瘤周围组织的活化片段为0.10±0.05,比非转基因雄鼠肝组织的也显著降低,t=-3.68,P=0.021.结论 在H-ras12V转基因小鼠肝肿瘤周围组织中,Erk信号通路的激活,诱导了ROS水平的升高,进而抑制了肝细胞的癌变.而在肝肿瘤中,Ras癌基因通过某些机制诱导了ROS水平的降低及p53/p21及Caspase-3凋亡通路的下调,进而促进了肝肿瘤的发生发展.     

多肽化合物urantide抑制动脉粥样硬化大鼠心脏Ⅰ型胶原的表达

目的 观察多肽类化合物urantide对动脉粥样硬化（As）大鼠心脏组织中Ⅰ型胶原（ColⅠ）表达的影响,探讨其防治损伤的作用机制。方法 选取健康雄性3周龄SPF级Wistar大鼠60只,采用腹腔注射维生素D3（VD3）损伤动脉内膜及高脂饲料饲养的方法建立大鼠As模型,随机分为：正常组、As模型组、辛伐他汀组和urantide（3 d、7 d、14 d）组。采用HE染色和Masson三色染色方法,观察大鼠心脏组织形态和胶原纤维表达,免疫组织化学、Western blotting和Real-time PCR方法检测大鼠心脏Col Ⅰ蛋白和基因的表达。结果 与正常组相比,As模型组大鼠心脏组织中出现心肌细胞变性,细胞间浸润大量的中性粒细胞,且有散布的泡沫细胞及充血出血等病理现象,同时胶原纤维增加,ColⅠ的基因和蛋白表达水平升高。与As模型组相比,经urantide治疗后心脏病理现象有缓解。随着给药时间的延长,胶原纤维减少,ColⅠ的基因和蛋白表达水平逐渐下调,尤以给药14 d时效果最佳。 结论 Urantide可抑制As大鼠心脏组织ColⅠ表达以缓解心肌间质损伤,对As大鼠的心脏具有保护作用。     

远志对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经相关神经元胞体凋亡的影响

目的:探讨远志对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠坐骨神经相关神经元胞体的保护作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、DPN模型组和远志治疗组,DPN模型组和远志治疗组均建立DPN模型。待建模后,远志治疗组大鼠给予远志灌胃6周。尼氏染色法观察背根节神经元胞体形态,免疫组织化学显色检测背根节神经元胞体Bcl-2、Bax蛋白的表达,TUNEL法检测背根节神经元凋亡指数。结果:与空白对照组比较,DPN模型组大鼠背根节神经元胞体形态异常,Bcl-2表达降低,Bax表达升高,凋亡指数升高;与DPN模型组比较,远志治疗组大鼠背根节神经元胞体形态接近正常,Bcl-2表达升高,Bax表达降低,凋亡指数降低。结论:远志可通过上调DPN大鼠背根节神经元胞体Bcl-2的表达,减少Bax的表达,抑制背根节神经元凋亡,发挥对DPN大鼠背根节神经元胞体的保护作用。