小鼠胚胎睾丸Leydig细胞培养、纯化及其功能研究

目的:探讨小鼠胚胎睾丸Leyd ig细胞体外培养、鉴定、纯化的方法,并进行形态学观察、分泌睾酮能力等生物学特性检测。方法:选择胎龄16 d的胎鼠睾丸,0.03%胶原酶Ⅰ消化,3β-羟基类固醇脱氢酶(HSD)染色鉴定及纯度测定,锥虫蓝染色检测细胞活率。放免法测定Leyd ig细胞不同培养时间及密度下分泌睾酮的水平。结果:Leyd ig细胞培养前和培养72 h后纯度分别为(45.10±1.66)%和(81.17±2.32)%;培养液中可检测到睾酮,睾酮水平与Leyd ig细胞数、培养时间相关,单个Leyd ig细胞睾酮分泌能力逐日下降。结论:该法分离的胚胎Leyd ig细胞纯度较高,生长性好,保持增殖和分泌睾酮的生物学特性,可应用于相关的研究。     

邻苯二甲酸二乙基己酯对新生小鼠睾丸及Leydig细胞影响的实验研究

目的:探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对新生小鼠睾丸及Leyd ig细胞形态结构及功能的影响。方法:DEHP分别以低、中、高3组剂量[100、200、500 mg/(kg.d)]灌胃作用于怀孕12 d到产后3 d(GD12~PND3)的KM母鼠,观察DEHP对新生雄性仔鼠体重、睾丸重量、Leyd ig细胞形态结构和3β-羟基类固醇脱氢酶(3-βHSD)活性、酶反应面积的影响。结果:DEHP作用于母鼠后,其雄性子代幼鼠体重和睾丸重量减轻,睾丸Leyd ig细胞形态、超微结构发生改变;高剂量组Leyd ig细胞数量明显增多;低、中剂量组睾酮合成关键酶3β-HSD酶活性下降,酶反应面积减小,但高剂量组在仔鼠出生后15 d时酶活性降低[(吸光度值(0.154±0.011)vs空白对照组(0.222±0.013),P<0.01],而酶反应面积增大[(6 303.0±745.6)μm2vs空白对照组(5 091.4±214.4)μm2,P<0.01)]。结论:DEHP能影响新生雄性小鼠体重、睾丸重量、Leyd ig细胞的形态结构和3β-HSD活性,具有抗雄激素效应。     

引入关联维的表面肌电信号的特征提取

考虑到表面肌电信号的非平稳特性,本研究在传统特征提取的基础上,又引入了非线性动力学中的关联维,通过小波系数的标准差和关联维重新构造特征向量,将其送入自组织映射网络对拇指弯曲、食指弯曲和无名指弯曲三种手势动作进行分类识别。结果表明:引入关联维的特征提取方法其识别正确率明显优于传统的小波变换的方法。可见,关联维作为一种新的特征参数,为肌电信号的特征提取提供了新的思路。     

膀胱灌注逆转录病毒载体HSV-TK基因治疗大鼠膀胱癌

目的：研究膀胱内灌注逆转录病毒载体单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(HSVtk)基因治疗膀胱癌的作用。方法：用N-甲基-亚硝基脲(MNU)膀胱灌注诱导建立大鼠原位膀胱肿瘤模型，该肿瘤与人类膀胱肿瘤病理特点非常相似。随后经尿道膀胱灌注逆转录病毒载体HSV-TK(基因，腹腔内注射羟基无环鸟苷(ganciclovir，GCV)，连续6天。结果：经尿道膀胱灌注逆转录病毒HSV-TK基因后48小时RTPCR检测出膀胱肿瘤中HSV-TK基因表达。GCV处理后．肿瘤体积以及膀胱总重量检测表明膀胱肿瘤的生长被显著抑制。肿瘤细胞DNA电泳显示诱导凋亡可能是HSV-TK／GCV系统治疗肿瘤的重要机制。结论：经尿道膀胱灌注重组逆转录病毒载体可以向肿瘤转导HSV—TK基因。HSV-TK／GCV系统能抑制鼠原位膀胱肿瘤的生长。     

微山湖区及运河沿岸饮用水中碘含量的调查

目的：抽样调查微山湖区及运河沿岸居民饮用水中的碘含量。方法：在微山湖东西两岸及运河沿岸随机抽取水样若干份，用砷铈分光光度法测定其含量。结果：湖西区、湖东区、运河沿岸水碘均值分别为170μg/L，75μg/L，30μg/L，呈正态偏态分布。结论：调查显示微山湖区及运河沿岸调查区内的地下水碘含量适中。     

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对胚胎及新生小鼠睾丸Leydig细胞INSL3 mRNA表达的影响

目的:通过体内体外实验探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对胚胎及新生小鼠睾丸Leydig细胞INSL3 mRNA表达的影响. 方法:DEHP 50,100,200 mg/L分别作用于原代培养的小鼠胚胎Leydig细胞,应用RT-PCR和原位分子杂交技术检测DEHP对Leydig细胞INSL3 mRNA表达的影响;DEHP分别以低、中、高三组剂量(100,200和500 mg/kg·d)灌胃作用于GD(Gestation day)12～PND(Postnatal day)3孕鼠,RT-PCR检测新生小鼠睾丸INSL3 mRNA表达的相对强度. 结果:DEHP改变原代培养的小鼠胚胎Leydig细胞和新生小鼠睾丸的形态结构;各实验组包括原代Leydig细胞及不同时间点的新生鼠睾丸INSL3 mRNA表达水平、表达相对强度均明显低于对照组(P＜0.05,或P＜0.01). 结论:DEHP下调小鼠睾丸Leydig细胞INSL3 mRNA的表达,可能是影响引带发育导致隐睾的机制之一.     

医用塑料增塑剂DEHP安全性研究及对策

DEHP作为广泛使用的通用型增塑剂,大量应用于塑料制品中,包括医用塑料制品。研究证实DEHP可通过多种途径进入人体,对机体多个系统均有毒性作用,被认为是一种环境内分泌干扰因子。PVC医疗器械中的DEHP释放到患者体内,对患者具有更大的危害性,尤其是处于发育早期和分化发育敏感阶段的儿童和孕妇。世界各国针对性地制定了相关的环保战略。本文就DEHP的理化性状、体内代谢、对机体损害、安全性评估及各国相关的环保政策作一综述。     

经尿道灌注自杀基因治疗大鼠膀胱癌的实验研究

目的:探讨经尿道膀胱灌注脂质体和逆转录病毒载体介导的自杀基因(HSVtk),观察在羟基无环鸟苷(ganciclovir,GCV)作用下大鼠膀胱肿瘤的生长情况.方法:用N-甲基-亚硝基脲(MNU)膀胱灌注建立大鼠原位膀胱癌模型.经尿道膀胱灌注脂质体、逆转录病毒载体HSVtk基因,随后腹腔内注射GCV,连续6天.结果:经尿道膀胱灌注HSVtk基因后48h,RT-PCR检测出膀胱肿瘤中HSVtk基因表达.逆转录病毒组和脂质体组膀胱总重量与裸质粒组和对照组相比有显著差异,表明膀胱肿瘤的生长被抑制.TUNEL法原位检测肿瘤组织中凋亡细胞不仅出现在表层细胞,而且深层细胞大量凋亡,推测旁观者效应可能发挥了一定作用.结论:经尿道膀胱灌注脂质体DNA或重组逆转录病毒载体可以向肿瘤转导HSVtk基因.HSVtk/GCV系统能抑制大鼠原位膀胱肿瘤的生长,显示出抗肿瘤作用.     

谈谈羊肠线

有一次我看见一位平时操作很熟练、经验很丰富的手术室护士,将“不可煮”的羊肠线放在高压蒸汽灭菌器内灭菌,结果全部都损坏了。因此特将羊肠线提出来与大家共同研究。一、羊肠线的制造“羊肠线”从16世纪才开始使用。以前称为猫肠线,这个名称不妥当,因为它不是用猫肠制成的。最先用小牛肠,以后才改用羊肠。制法是选择健康的小羊,最好是春季出生的,到秋初宰杀,然后取出羊肠,将小肠剪下,用软水洗净肠中的粪便,按