重组酶介导的隐孢子虫属特异性等温核酸扩增 方法的建立及评价

目的　建立一种可用于隐孢子虫检测的重组酶介导的等温核酸扩增（RAA）方法,并对其检测敏感性和特异性进行评价。方法　以隐孢子虫属特异性18S rRNA核酸序列作为检测靶标,采用Amplfix软件设计、合成引物及荧光检测探针,构建并优化RAA荧光反应体系;分别以不同拷贝数的含18S rRNA靶序列的重组质粒、不同浓度隐孢子虫卵囊基因组DNA及不同数量隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板进行RAA荧光法检测,以评价其敏感性;分别以隐孢子虫卵囊、蓝氏贾第鞭毛虫包囊、日本血吸虫虫卵、似蚓蛔线虫虫卵、华支睾吸虫虫卵、沙门氏菌、志贺氏菌基因组DNA为模板进行RAA荧光法检测,以评价其特异性。结果　成功建立了隐孢子虫检测RAA法,该方法可在39 ℃、20 min内得到隐孢子虫属18S rRNA基因片段的有效扩增。以不同拷贝数的含18S rRNA靶序列的重组质粒、不同浓度隐孢子虫卵囊基因组DNA及不同数量隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板,该方法最低检出限分别为102拷贝/μL、1 pg/μL和1个/50 μL;以蓝氏贾第鞭毛虫包囊、日本血吸虫虫卵、似蚓蛔线虫虫卵、华支睾吸虫虫卵、沙门氏菌、志贺氏菌基因组DNA为模板的荧光RAA扩增结果均为阴性。结论　成功建立了一种可用于检测隐孢子虫卵囊DNA的RAA法,该方法操作简便、反应快速,敏感性和特异性均较好。     

小切口去脂术在眼睑整形中的应用

应用微小切口去除睑部脂肪的技术进行睑部美容形术９８例。在上睑，将小切口去脂技术与非切开法重睑术联合应用，增强了缝线法或埋线法重睑形成的稳定性。尤其适用于典型蒙古人种眼要求“西化”者。利用眶内脂肪小叶的滑动性，这种去脂技巧可以很容易的进行并较少合并出血，小切口的位置一般被设计在重睑标记线的内侧或外侧。这种去脂技巧也被用于下睑袋的整形术中，不同的是２￣４ｍｍ的小切口被设置在下睑结膜囊侧。这些微小切口的     

卡托普利与硝苯地平治疗高血压275例临床观察

卡托普利和硝苯地平治疗高血压单独应用效果不够理想，应用大剂量副作用明显增多。本文报道1993年元月～1997年元月采用两药并用治疗高血压115例，并与单方卡托普利80例和单方硝苯地平80例，进行比较，结果总有效率为90％，78％，75％，（P＜0．02），（P＜0．01），副作用的发生率为6％，16％，20％（P＜0．01），（P＜0．05），合并用药未见不良反应，提示合并用药可明显提高降压疗效，并减少副作用。     

重组酶介导的隐孢子虫属特异性等温核酸扩增 方法的建立及评价

目的　建立一种可用于隐孢子虫检测的重组酶介导的等温核酸扩增（RAA）方法，并对其检测敏感性和特异性进行评价。方法　以隐孢子虫属特异性18S rRNA核酸序列作为检测靶标，采用Amplfix软件设计、合成引物及荧光检测探针，构建并优化RAA荧光反应体系；分别以不同拷贝数的含18S rRNA靶序列的重组质粒、不同浓度隐孢子虫卵囊基因组DNA及不同数量隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板进行RAA荧光法检测，以评价其敏感性；分别以隐孢子虫卵囊、蓝氏贾第鞭毛虫包囊、日本血吸虫虫卵、似蚓蛔线虫虫卵、华支睾吸虫虫卵、沙门氏菌、志贺氏菌基因组DNA为模板进行RAA荧光法检测，以评价其特异性。结果　成功建立了隐孢子虫检测RAA法，该方法可在39 ℃、20 min内得到隐孢子虫属18S rRNA基因片段的有效扩增。以不同拷贝数的含18S rRNA靶序列的重组质粒、不同浓度隐孢子虫卵囊基因组DNA及不同数量隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板，该方法最低检出限分别为102拷贝/μL、1 pg/μL和1个/50 μL；以蓝氏贾第鞭毛虫包囊、日本血吸虫虫卵、似蚓蛔线虫虫卵、华支睾吸虫虫卵、沙门氏菌、志贺氏菌基因组DNA为模板的荧光RAA扩增结果均为阴性。结论　成功建立了一种可用于检测隐孢子虫卵囊DNA的RAA法，该方法操作简便、反应快速，敏感性和特异性均较好。     

重组酶介导的核酸等温扩增荧光法检测日本血吸虫感染性钉螺的效能评价

目的　评价重组酶介导的核酸等温扩增（recombinase?aided amplification,RAA）荧光法检测日本血吸虫感染性钉螺的效能。方法　采用群体法检测。每50只钉螺作为1个检测样本,阴性样本不含感染性钉螺,阳性样本含不同数量感染性钉螺。设置阴性样本10个和分别含有1、2、3只感染性钉螺的阳性样本各10个,40个样本随机分组后,以盲法经荧光RAA法检测,并以逸蚴法检测结果为金标准,计算荧光RAA法检测灵敏度、特异度、正确指数及符合率。设置阴性钉螺样本5个和分别含有1、2、3只感染性钉螺的阳性样本各5个,20个样本随机分组后,采用配对设计法对同一个样本以盲法分别经压碎镜检法和荧光RAA法进行检测并比较检测结果。 结果　荧光RAA法检测30个阳性样本,29个检测结果为阳性,灵敏度为96.67%;检测10个阴性样本,其中8个检测结果为阴性,特异度为80.00%;约登指数为0.77,同一样本重复检测10次符合率为100%。荧光RAA法与压碎镜检法检测感染性钉螺结果差异无统计学意义（[χ2] = 0,P > 0.05）,检测结果与实际符合率分别为95.00%（19/20）和90.00%（18/20）。结论　荧光RAA法对日本血吸虫感染性钉螺具有良好检测效能,在日本血吸虫感染性钉螺筛查中具有一定应用前景。     

重组酶介导的斯氏并殖吸虫等温扩增荧光检测方法的建立及检测效果初步评价

目的　建立一种基于重组酶介导的等温扩增（recombinase⁃aided isothermal amplification, RAA）技术的斯氏并殖吸虫快速核酸检测方法,并对其检测效果进行初步评价。方法　从溪蟹样本中分离出斯氏并殖吸虫、卫氏并殖吸虫和三平正并殖吸虫囊蚴,提取基因组DNA进行分子鉴定。以斯氏并殖吸虫线粒体细胞色素c氧化酶亚基I基因（cytochrome c oxidase 1, cox1）基因序列作为靶序列设计、制备、筛选引物及探针。以河南省济源市和洛阳市宜阳县斯氏并殖吸虫囊蚴基因组DNA为模板进行荧光RAA检测方法验证。以含斯氏并殖吸虫cox1基因序列的不同浓度重组质粒和斯氏并殖吸虫囊蚴基因组DNA为模板进行荧光RAA扩增,评价其检测灵敏度;应用建立的荧光RAA法同时检测卫氏并殖吸虫、三平正并殖吸虫、华支睾吸虫和日本血吸虫基因组DNA,评价其检测特异性。结果　从溪蟹样本中分离出斯氏并殖吸虫、卫氏并殖吸虫和三平正并殖吸虫囊蚴,经分子鉴定和系统进化分析确认其与GenBank中并殖吸虫标准株基因序列具有同源性。成功建立了斯氏并殖吸虫荧光RAA检测方法,可在5 min内扩增到河南省济源市和洛阳市宜阳县采集的斯氏并殖吸虫囊蚴基因组DNA,而阴性对照无扩增。以重组质粒为模板,荧光RAA法最低检出限为10 拷贝/µL重组质粒,且均在5 min内出现阳性扩增;以基因组DNA为模板,可检测到的最低模板DNA浓度为10 pg/µL,且均在10 ~ 15 min内出现阳性扩增。荧光RAA法检测卫氏并殖吸虫、三平正并殖吸虫、日本血吸虫和华支睾吸虫基因组DNA结果均为阴性。结论　成功建立了一种基于荧光RAA技术的快速、敏感、特异的斯氏并殖吸虫核酸检测方法,在斯氏并殖吸虫病流行区溪蟹现场快速检测与虫种鉴定中具有潜在应用价值。     

外科胃肠减压临床护理

胃肠减压是临床上常用的一种治疗手段,随着医学科学的不断发展,新的诊疗技术不断涌现,胃肠减压这一古老方法仍是目前临床中一项重要的治疗措施和护理技术操作。胃肠减压是将胃管经鼻腔插入胃内,通过引流胃肠液或气体达到减轻胃肠道压力,使胃肠肌肉得以休息,有助于恢复功能。2007年10月至2008年10月我院外科收治胃肠减压59例患者,现将护理体会报告如下。     

眉上提术在眼睑部整形中的应用

目的 解决眼睑松弛、眼眉下垂所至的容貌老态和功能障碍，如眼睑皮肤肌肉松弛、良睑皱襞形成、眶隔脂肪松垂、倒睫、眼裂外下斜、眉梢下垂或眉形不美等。方法 通过眼轮匝肌悬吊进行眉上提术或联合重瞪术式来进行眼睑整体的修复。结果 对５６例患者进行治疗眼睑部修整与眼眉上提及眉形修整均得到满意效果。结论 应用眉上提术能解决以上氧老态或先天畸形，功能得到改善并达到持久的眼睑美化、年轻化，并且无并发症。     

卡托普利致血管神经性水肿1例

1病历介绍患者,女,65岁,因右侧肢体活动不利2 d于2006年10月14日入院。既往无过敏史,无家族遗传性疾病史。入院查体:T 37.0℃,P 84次/min,R 20次/min,BP 25/12 kPa,神志清楚,精神软,双侧瞳孔等大等圆,直径2.5 mm,对光反射灵敏,伸舌右偏,颈无抵抗,心、肺、腹(-),双下肢无水肿,右侧肢体肌力3级,左侧肢体肌力5级,右Babinski征( ),左Babinski征(-),经脑CT证实为:左基底节区脑梗死。入院诊断:左基底节区脑梗死,高血压病3级。入院后给予甘露醇、速尿脱水减轻脑水肿,胞二磷胆碱保护神经元,低分子肝素抗凝,卡托普利降压(12.5 mg,2次/d)以及对症…     

慢性腹泻在辨证施治中要重视的若干问题

腹泻常由于饮食不当或感受外邪等而引起,初起病在肠胃,治之较易;如治疗不及时或治疗不当,以致病程延长或反复发作,病及脾肾,而渐成慢性腹泻,治疗就比较困难了.笔者自2004年以来,用中医中药治疗慢性腹泻,在摸索过程中体会到,在辨证施治时要重视以下几个问题,以利于提高临床疗效.