西红花酸对过氧化氢诱发心肌细胞[Ca2+]i改变的作用

目的 观察西红花酸对H2O2诱发培养心肌细胞[Ca^2 ]i改变的效应，并探讨其机制。方法 应用Fluo-3／AM荧光标记技术和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测不同因素处理的单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i。结果 H2O2呈浓度依赖性地使单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i增加，并不受细胞外环境是否存在Ca^2 的影响，L-型Ca^2 通道阻滞剂维拉帕米也不能完全中止[Ca^2 ]i的增加；不同剂量的西红花酸则能减低H2O2引发的单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i增高的幅度。结论 西红花酸能明显抑制H2O2诱发培养心肌细胞[Ca^2 ]i增加的作用，可能与调整胞内钙库Ca^2 的释放和摄取、Ca^2 内流等机制有关。     

石墨烯对氧化应激引起的毛细胞损伤的保护作用研究

目的通过建立由H2O2诱导的HEI-OC1细胞氧化应激模型,验证石墨烯对氧化应激后毛细胞的保护作用,并探究石墨烯减轻毛细胞氧化应激损伤的可能机制。方法我们将二维石墨烯材料(2D-G)作为实验组,TC玻片(TCPs)作为对照组。首先用不同浓度的H2O2处理接种于两种材料上的HEI-OC1细胞,分别作用4h和12h后,通过CCK-8法检测两组细胞存活率的差异,与此同时,通过免疫荧光法(通过观察myosin7a抗体,即毛细胞特异性抗体的染色情况)观察两组细胞的存活情况。接下来我们利用DCFH-DA和Mito-sox两种荧光探针分别测定细胞内和线粒体内ROS(活性氧)水平,运用流式分析法和免疫荧光法对氧化应激后的两组细胞内ROS水平的变化进行了直接和间接的检测。随后,我们通过TUNNEL法检测发生氧化应激后两组细胞凋亡水平的差异。结果石墨烯能够显著提高短期/较长时间氧化应激后耳蜗毛细胞系HEI-OC1细胞的存活率;石墨烯能够显著降低氧化应激后HEI-OC1细胞内及线粒体内的ROS水平;石墨烯能够显著降低氧化应激后HEI-OC1细胞的凋亡水平。结论石墨烯能够显著降低氧化应激后耳蜗类毛细胞系HEI-OC1胞质及线粒体内的ROS水平,从而抑制凋亡现象,对氧化应激引起的耳蜗毛细胞损伤具有一定的保护作用。     

从人的肝癌组织中快速分离纯化γ-谷氨酰转移酶

目的应用KTATMexplorer 100蛋白质快速色谱纯化系统从人肝癌组织中分离纯化特异性γ-谷氨酰转移酶(GGT),为制备其抗血清提供抗原材料,以便对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、离心、溶解、透析和色谱等步骤进行纯化;纯化过程中用国际临床化学学会推荐方法测定GGT催化活性,用紫外法监测蛋白质出峰图谱,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。结果人肝癌组织经过粗提、疏水色谱、DEAE阴离子交换色谱等纯化步骤得到电泳纯的GGT,其比活为0.36 U/mg蛋白质,纯化倍数为24,回收率为5.0%。结论该纯化方法能较好且有效地分离纯化肝癌特异性GGT。     

盐酸氨溴索中杂质DHTQ的分离及合成

目的：分离及合成盐酸氨溴索原料药中的杂质反式四氢喹唑啉环己醇盐酸盐（DHTQ）.方法：通过柱层析分离出盐酸氨溴索原料中的杂质DHTQ;以盐酸氨溴索为原料,经过甲醛水溶液环化一步合成DHTQ.结果：分离并首次合成了DHTQ,结构经核磁共振氢谱、碳谱、质谱、红外光谱和元素分析确证,为盐酸氨溴索的质量标准检查提供了对照品.结论：该合成方法简单方便,收率高.     

淫羊藿苷对异丙肾上腺素所致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的在异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导原代培养乳鼠心肌细胞损伤的模型上,探讨淫羊藿苷对心肌细胞的保护作用。方法采用ISO损伤心肌细胞,通过MTT法检测心肌细胞存活率,以荧光染色激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生。结果ISO处理心肌细胞72h后降低心肌细胞的存活率,诱导心肌细胞发生凋亡,凋亡率达35%,线粒体的膜电位明显降低。预先给予0.1～10μmol.L-1淫羊藿苷,可提高心肌细胞的存活率,改善线粒体的膜电位,降低心肌细胞的凋亡率。结论淫羊藿苷对ISO诱导原代培养心肌细胞损伤具有明显的保护作用。     

西红花酸对心肌细胞氧化应激性损伤的作用

目的：探讨西红花酸对心肌细胞氧化应激性损伤的效应。方法：采用过氧化氢(H2O2)诱导法制备大鼠培养心肌细胞氧化应激损伤模型，通过观察培养心肌细胞的形态，检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性及培养细胞台盼蓝摄取率，反映西红花酸对该模型的影响。结果：在本实验使用浓度范围内，H2O2损伤培养心肌细胞的作用呈浓度依赖性地增大；西红花酸则能减少该氧化应激细胞的形态学改变、降低培养液中LDH活性和胞内MDA含量、增加胞内SOD活性及减少细胞死亡数量。结论：西红花酸对H2O2，造成的培养心肌细胞氧化应激性损伤具有明显的保护作用。     

西红花酸对过氧化氢诱发心肌细胞[Ca2+]i改变的作用

目的 观察西红花酸对H2O2诱发培养心肌细胞[Ca^2 ]i改变的效应，并探讨其机制。方法 应用Fluo-3／AM荧光标记技术和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测不同因素处理的单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i。结果 H2O2呈浓度依赖性地使单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i增加，并不受细胞外环境是否存在Ca^2 的影响，L-型Ca^2 通道阻滞剂维拉帕米也不能完全中止[Ca^2 ]i的增加；不同剂量的西红花酸则能减低H2O2引发的单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i增高的幅度。结论 西红花酸能明显抑制H2O2诱发培养心肌细胞[Ca^2 ]i增加的作用，可能与调整胞内钙库Ca^2 的释放和摄取、Ca^2 内流等机制有关。     

地龙2号对大鼠肝纤维化α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究地龙2号对肝纤维化大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响.方法采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,52只雄性Wistar大鼠随机分成6组:正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和地龙2号小剂量组,8周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达情况.结果与模型组相比,地龙2号组肝纤维化程度明显减轻,α-SMA、TGF-β1、及TIMP-1蛋白表达均显著降低,MMP-13表达显著升高.结论地龙2号抑制大鼠肝脏纤维组织的形成可能与其降低α-SMA、TGF-β1、TIMP-1蛋白表达并促进MMP-13蛋白表达有关.