糖尿病性视网膜病变超广角荧光素眼底血管造影与标准7视野检查结果的对比分析

目的：对比分析糖尿病性视网膜病变(DR)超广角荧光素眼底血管造影与标准7视野检查结果,以期为DR的早期诊治提供理论依据。

方法：回顾性临床分析,收集2018-06/2020-06唐山市眼科医院诊治的120例DR患者临床资料,患者均接受超广角荧光素眼底血管造影与标准7视野检查,以眼底检查结果为金标准,评估超广角荧光素眼底血管造影与标准7视野检查在DR鉴别诊断中的价值。眼底病变特征的异同以及对DR分期评估价值。

结果：超广角荧光素眼底血管造影观察DR视网膜可视区面积、视网膜NP区面积、视网膜NV区面积、全视网膜激光光凝区面积、黄斑区拱环结构改变较标准7视野的明显高(P<0.05),取图平均时间明显短于标准7视野检查(P<0.05)。超广角荧光素眼底血管造影检查结果对DR病情程度正确检出率为94.8%(165/174),明显高于标准7视野的87.4%(152/174)(P<0.05)。

结论：超广角荧光素眼底血管造影技术在DR诊断中,在检查时间和检查空间方面较标准7视野检查更具优势,且前者更利于DR患者黄斑区、视盘区病变的检出,此外超广角荧光素眼底血管造影技术更利于DR患者病情程度的判断,可为DR的早期诊治提供更多参考。     

协同刺激分子B7-H3与B7-H4联合效应对胃癌患者预后的影响

目的 探讨胃癌组织中协同刺激分子B7-H3和B7-H4的表达水平对胃癌患者预后的影响及其与临床病理特征的关系.方法 采用回顾性研究随访调查157例胃癌患者的相关临床资料;应用免疫组织化学染色法检测相关病理指标及胃癌患者手术标本中B7-H3、B7-H4的表达;胃癌患者不同临床特征与B7-H3、B7-H4表达水平的相关性采用x2检验,不同临床特征患者的无进展生存期(PFS)及总生存期(OS)的比较采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验,拟合多因素Cox模型,用风险比(HR)及95％可信区间(CI)估计不同临床指标与复发和死亡结局的联系强度.结果 B7-H3、B7-H4表达水平与不同临床特征之间无明显相关;单因素生存分析显示年龄较大(＞60岁)、分期较晚、肿瘤较大(＞5 cm)、浸润较深(侵及深肌层)、远处转移及协同刺激分子B7-H4高表达等显著减少PFS及OS(P ＜0.05);多因素Cox模型分析提示,与Ⅰ期[5.58(95％ CI:1.27 ～24.58)]比较,Ⅳ期胃癌患者复发和死亡的HR分别为6.20(95％ CI:1.31 ～29.34);与肿瘤直径≤5 cm的患者[1.95(95％ CI:1.20 ～3.18)]比较,肿瘤直径＞5 cm的患者其为1.97(95％CI:1.19 ～3.25);相对于其他表达组,B7-H3低表达且B7-H4高表达的胃癌患者复发和死亡的HR分别为1.92(95％ CI:1.20 ～ 3.10),1.93(95％CI:1.19 ～3.10).结论 B7-H3、B7-H4不同表达水平对胃癌患者PFS和OS有显著影响.     

C6、C7椎弓根置钉的应用解剖学研究

目的:通过对C6、C7椎弓根的解剖学测量,设计一种以“峡部”为参考的C6、C7椎弓根置钉的方法.方法:15具经福尔马林浸泡的成人颈椎标本,不分性别、年龄,排除畸形及破坏.取C6、C7共30个椎体.先测量椎弓根宽度(PW)、椎弓根高度(PH).将C6、C7侧块中的一部分定义为“峡部”,即过上关节突下缘最低点、下关节突上缘最高点的水平线与过上关节突内外侧缘的垂线所围成区域.过上关节突内外侧缘之间划两条垂线,将“峡部”分为3等份,中份为“峡部”的后侧面,外份为“峡部”的后外侧面.取过横突根部中点的水平线与过“峡部”中外1/3垂线的交点为螺钉的进钉点.选择3.5mm直径及合适长度的螺钉,直视下沿椎弓根中轴线方向置入,使螺钉中轴线与椎弓根中轴线重合,螺钉前端穿出椎体或上终板.沿椎弓根中轴线的水平面锯开标本,可看到螺钉处在椎弓根中轴线上.螺钉在水平面上与“峡部”的后外侧面形成的角为横向角(E角);螺钉在矢状面上与“峡部”后侧面形成的角为纵向角(F角).测量椎弓根钉道全长(FSC).对数据进行t检验及类聚分析.结果:各指标同一节段左右侧数据比较无统计学差异(P＞0.05),故将同节段左右侧数据合并后进行统计分析.C6的PW为6.12±0.78mm,PH为7.48±0.81mm;C7的PW为6.85±0.73mm,PH为8.03 ±0.38mm;PW与PH均为C6＜C7(P＜0.05),同一节段PW＜PH(P＜0.05).利用聚类分析中的Hierarchical cluster过程对数据进行聚类分析,结果显示E角趋向于两类,即E1和E2.C6的E1角、E2角、F角及FSC与C7比较均无统计学差异(P＞0.05),将同一指标C6与C7数据合并统计结果为FSC 30.83±0.91mm,E1角89.61°±1.24°,E2角59.71°±1.10°,F角75.86°±112°.结论:在C6、C7以过横突根部中点的水平线与过“峡部”中外1/3垂线的交点为螺钉的进钉点,沿椎弓根中轴线方向,在水平面上按照E角、在矢状面上按照F角进钉,行椎弓根置钉具有可行性.     

TG2和Mertk基因共沉默腺病毒干扰载体的构建及其基因沉默作用

目的构建转谷氨酰胺酶2（TG2）和Mer受体酪氨酸激酶（Mertk）基因共沉默腺病毒干扰载体,并检测其基因沉默作用。方法首先构建能干扰TG2和Mertk蛋白表达的质粒载体pSUPER/TG2及pSUPER/Mertk,再将其干扰序列和H1启动子序列切下并连接到pAdTrack上,构建成pAdTrack/TG2/Mertk载体。将其转入含有pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌中,回收并酶切鉴定重组腺病毒载体。将阳性腺病毒载体感染HEK293细胞,收集病毒,反复扩增后测定病毒滴度。分别以pAdTrack/TG2/Mertk、pAdTrack/TG2、pAdTrack/Mertk及pAdTrack/绿色荧光蛋白（GFP）感染RAW264.7细胞,采用免疫印迹法检测其TG2蛋白和Mertk蛋白的表达水平。结果pAdTrack/TG2/Mertk载体的病毒滴度为6.13×1010GFU/mL。经酶切鉴定,pAdTrack/TG2/Mertk含有插入的2个启动子和2个干扰序列,载体构建成功。pAdTrack/TG2和pAdTrack/TG2/Mertk组TG2蛋白的表达水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但均低于pAdTrack/GFP和pAdTrack/Mertk组（P〈0.01）,后两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。pAdTrack/Mertk和pAdTrack/TG2/Mertk组Mertk蛋白的表达水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但均低于pAdTrack/GFP和pAdTrack/TG2组（P〈0.01）,后两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 TG2和Mertk基因共沉默腺病毒干扰载体pAdTrack/TG2/Mertk构建成功,其能显著降低小鼠巨噬细胞样RAW246.7细胞中TG2蛋白和Mertk蛋白的表达水平。     

血管内皮生长因子和骨形态发生蛋白7在细胞分化中的协同作用

目的：研究rhVEGF和rhBMP-7对成骨细胞分化能力的影响.方法：取大鼠颅盖骨组织块,采用改良组织块混合酶消化法培养成骨细胞,将不同浓度的rhVEGF和rhBMP-7加入第四代成骨细胞的培养基继续进行细胞培养,用碱性磷酸酶试剂盒检测定细胞在第1、3、5天的磷酸酶的活性,分析不同浓度的rhVEGF和rhBMP-7对成骨细胞分化的影响.结果：rhVEGF和rhBMP-7能促进成骨细胞的分化,其中,3.125ng/mlrhVEGF和50.000ng/ml rhBMP-7单独或者两者联合作用并于第3天时,对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响最明显.结论：一定剂量的rhVEGF和rhBMP-7可明显促进成骨细胞的分化.     

miR-154对前列腺癌细胞功能影响的实验研究

目的 研究miR-154在对前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞生物学功能的影响.方法 采用RT-PCR方法检测前列腺癌和癌旁正常组织样本中miR-154的表达.运用细胞增殖实验(CCK-8法)、克隆形成实验及细胞周期分析评估上调miR-154对前列腺细胞系DU145和PC-3的作用.结果 与癌旁正常前列腺组织相比,miR-154在前列腺癌组织中的表达水平显著下调.体外实验中,miR-154过度表达能显著抑制癌细胞的生长,细胞克隆形成数明显降低.流式细胞术检测发现癌细胞的生长受到抑制,在G0/G1期比率明显升高,而上调miR-154可以使前列腺癌细胞阻滞在G1期,而抑制细胞的增殖.结论 miR-154可以影响前列腺癌细胞的增殖功能,有望成为前列腺癌治疗的新靶点.     

Anti‐fibrosis effect of BMP‐7 peptide functionalization on cobalt chromium alloy

Orthopedic metallic prosthetic implants are commonly made of cobalt chromium (CoCr) alloys. However, such metal‐based implants are susceptible to fibrous capsule formation on the implant surface after implantation. At the bone‐implant interface, this capsule can prevent implant integration, resulting in loosening and failure. Minimizing the development of such a capsule on the CoCr surface would improve direct bone‐implant bonding leading to long‐term implant functionality. We evaluated the anti‐fibrosis effect of bone morphogenic protein‐7 (BMP‐7) peptide covalently bonded to CoCr alloy. This peptide, a biomimetic derivation of the knuckle epitope of BMP‐7, was conjugated at the N‐terminus with a cysteine amino acid. X‐ray photoelectron spectroscopy (XPS) and probe binding assay were used to evaluate different stages of grafting and surface functionalization using polydopamine coating. Cellular functions were studied using fibroblast attachment, cell proliferation, and MTT assays. Fibroblasts were grown on functionalized and pristine CoCr substrates, and the efficacy of BMP‐7 peptide on anti‐fibrosis was analyzed via gene expression and protein expression of fibrosis markers ACTA2, Collagen 1A1, and fibronectin. The peptide functionalized substrates showed significant reduction of fibrosis markers expression after 1 week of incubation compared to controls. BMP‐7 signaling pathway activation was shown by the presence of phosphorylation of Smad1/5/8. These findings may contribute to the improvement of CoCr implants in orthopedic surgery applications. © 2013 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 31: 983–990, 2013     

Altered thermogenesis and impaired bone remodeling in Misty mice

Fat mass may be modulated by the number of brown‐like adipocytes in white adipose tissue (WAT) in humans and rodents. Bone remodeling is dependent on systemic energy metabolism and, with age, bone remodeling becomes uncoupled and brown adipose tissue (BAT) function declines. To test the interaction between BAT and bone, we employed Misty (m/m) mice, which were reported be deficient in BAT. We found that Misty mice have accelerated age‐related trabecular bone loss and impaired brown fat function (including reduced temperature, lower expression of Pgc1a, and less sympathetic innervation compared to wild‐type (+/ +)). Despite reduced BAT function, Misty mice had normal core body temperature, suggesting heat is produced from other sources. Indeed, upon acute cold exposure (4°C for 6 hours), inguinal WAT from Misty mice compensated for BAT dysfunction by increasing expression of Acadl, Pgc1a, Dio2, and other thermogenic genes. Interestingly, acute cold exposure also decreased Runx2 and increased Rankl expression in Misty bone, but only Runx2 was decreased in wild‐type. Browning of WAT is under the control of the sympathetic nervous system (SNS) and, if present at room temperature, could impact bone metabolism. To test whether SNS activity could be responsible for accelerated trabecular bone loss, we treated wild‐type and Misty mice with the β‐blocker, propranolol. As predicted, propranolol slowed trabecular bone volume/total volume (BV/TV) loss in the distal femur of Misty mice without affecting wild‐type. Finally, the Misty mutation (a truncation of DOCK7) also has a significant cell‐autonomous role. We found DOCK7 expression in whole bone and osteoblasts. Primary osteoblast differentiation from Misty calvaria was impaired, demonstrating a novel role for DOCK7 in bone remodeling. Despite the multifaceted effects of the Misty mutation, we have shown that impaired brown fat function leads to altered SNS activity and bone loss, and for the first time that cold exposure negatively affects bone remodeling.     

A Novel Missense Mutation,Leu390Val,in the Cardiac ß-myosin Heavy Chain Associated with Pronounced Septal Hypertrophy in Two Families with Hypertrophic Cardiomyopathy

Objective: An examination of the genetic background and phenotypic presentation of familial hypertrophic cardiomyopathy (FHC) with respect to specific mutations in the MYH7     

SOX7、β-catenin和cyclin D1蛋白在浸润性乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 观察SOX7、β-catenin和cyclin D1蛋白在浸润性乳腺癌与乳腺良性增生病组织中的表达,探讨它们与浸润性乳腺癌临床病理学特征之间的关系,为浸润性乳腺癌的治疗、预后提供有价值的生物学标志.方法 应用免疫组化SP法分别检测50例浸润性乳腺癌与30例乳腺良性增生病中SOX7、β-cate-nin和cyclin D1蛋白的表达情况,分析SOX7、β-catenin和cyclin D1蛋白的表达与浸润性乳腺癌患者的发病年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、组织学分级、病理学分期(pTNM)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(Her-2)和危险度分组之间的关系.结果 在50例浸润性乳腺癌组织中,SOX7和cyclin D1蛋白的阳性表达率分别为42％(21/50)和70％(35/50),β-catenin蛋白的异常表达率为70％(35/50).在浸润性乳腺癌中,SOX7蛋白的阳性率明显低于乳腺良性增生病的70％ (21/30) (P =0.021＜0.05),两组间差异有统计学意义;β-catenin蛋白的异常表达率和cyclin D1蛋白的阳性表达率均高于乳腺良性增生病的43.3％ (13/30) (P =0.033 ＜0.05)和20％ (6/30) (P =0.000＜ 0.001),两组间差异均有统计学意义.在50例浸润性乳腺癌中,SOX7和β-catenin蛋白同时阳性表达12例,同时阴性表达5例;SOX7和cyclinD1蛋白同时阳性表达11例,同时阴性表达5例;β-catenin和cyclinD1蛋白同时阳性表达28例,同时阴性表达8例.经Spearman相关分析,SOX7蛋白的阳性表达分别与p-catenin的异常表达和cyclin D1的阳性表达呈负相关关系(r=-0.282,P=0.046 ＜0.05;r =-0.327,P =0.020 ＜0.05),β-catcnin的异常表达与cyclin D1的阳性表达呈正相关关系(r=0.333,P=0.018 ＜0.05).在浸润性乳腺癌中,SOX7蛋白的表达在发病年龄、腋窝淋巴结转移、组织学分级、pTNM分期、ER、PR、Her-2和危险度分组间差异有统计学意义(P＜0.05),而在肿瘤直径分组间比较差异无统计学意义(P ＞0.05);β-catenin蛋白的异常表达和cyclin D1蛋白的阳性表达在肿瘤直径、腋窝淋巴结转移和pTNM分期分组间差异有统计学意义(P＜0.05),而在发病年龄、组织学分级、ER、PR、Her-2和危险度分组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SOX7、β-cate-nin和cyclinD1蛋白在大多数浸润性乳腺癌组织中表达异常,且三者在浸润性乳腺癌发生、发展过程中可能通过同一通路发挥调节作用.SOX7、β-catenin和cyclin D1蛋白的表达与浸润性乳腺癌的临床病理学特征之间存在一定的相关性,检测三者的表达情况可成为临床上判断浸润性乳腺癌的恶性程度及预后的重要参考指标.