宫颈癌细胞FHIT基因启动子CpG岛甲基化状态分析

FHIT基因是一种与凋亡有关的肿瘤抑制基因,广泛存在于各种细胞凋亡系统中,在多种肿瘤及细胞系中失活,其启动子部位CpG岛甲基化是FHIT基因失活的主要机制之一。本研究应用甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)对不同宫颈鳞癌细胞系FHIT基因启动子CpG岛甲基化状态进行检测,在分子水平上了解FHIT异常甲基化与宫颈癌的相关性,为宫颈癌去甲基化治疗提供依据。     

人胃癌细胞株MGC-803 FHIT基因转染对阿霉素敏感性的影响

目的：将FHIT基因导入该基因表达缺失的人胃癌细胞株MGC-803，探讨胃癌中FHIT基因表达对阿霉素（ADM）敏感性的影响。方法：将载有人外源性FHIT基因的真核表达质粒pRcCMV-FHIT用脂质体介导转入FHIT蛋白表达缺失的胃癌细胞株MGC-803，筛选阳性克隆，同时以空载体pRcCMV转染的胃癌细胞及未转染的胃癌细胞株作为对照，以ADM作用于三组细胞，用MTT法测定细胞的生长抑制率，用流式细胞仪检测ADM处理前后各组胃癌细胞的凋亡率及细胞周期的变化。结果：经ADM处理后，转染FHIT基因的MGC-803细胞的凋亡水平（40.66%）与空质粒转染组（13.94%）及胃癌细胞株组（15.81%）相比明显增高（P＜0.01），并且FHIT基因与ADM有轻度的协同促进凋亡作用（P＜0.05）；同时ADM处理前后实验组胃癌细胞的生长周期较对照组均出现了明显的G0/G1期阻滞（74.43% vs 56.30%，99.27% vs 95.10%），且细胞的生长抑制率存在浓度和时间依赖性。结论：外源性FHIT基因表达与ADM协同促进MGC-803细胞凋亡及细胞周期阻滞，FHIT基因可增加胃癌细胞对ADM的敏感性。     

FHIT与肝癌关系的研究进展

FHIT是在染色体3p14．2上找到的一个肿瘤抑制基因，在多种恶性肿瘤中存在表达减少和缺失。本文结合FHIT的结构和功能对FHIT与原发性肝癌关系的研究进展情况进行综述。     

抑癌基因WWOX 和FHIT在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:观察抑癌基因-包含WW域的氧化还原酶(WWOX)和脆性组氨酸三联体(FHIT)在结直肠癌和癌旁正常大肠组织中的表达水平及与临床病理特征、预后之间的关系并探讨两者表达是否具有相关性.方法:应用免疫组织化学PV-9000通用型二步法检测75例结直肠癌和30例癌旁正常大肠组织中WWOX和FHIT、基因的蛋白表达.结果:在结直肠癌组织中WWOX和FHIT蛋白阳性表达率明显低于癌旁正常大肠组织(P＜0.05),且这种表达状态与组织学分级、Dukes分期及5年生存率密切相关(P＜0.05).而与部位和年龄无显著相关.WWOX和FHIT蛋白表达之间有相关性,这种相关性可能与常见脆性位点对DNA损伤的易感性相一致有关.结论:WWOX和FHIT基因在结直肠癌的发生、发展过程中可能具有较为重要的作用,并可能联合预测结直肠癌的预后.     

FHIT、MLH1及Ki67与宫颈癌的关系

目的：探讨FHIT、MLH1及Ki67在宫颈鳞癌发生、发展中的作用和意义，以及三者之间的关系。方法：应用免疫组化方法检测50例宫颈癌和20例正常宫颈组织中FHIT，Ki67和MLH1蛋白的表达。结果：MLH1蛋白的表达随病理分级的升高而降低（P〈0．05），与年龄、临床分期、组织学类型、淋巴结转移无明显相关性。FHIT蛋白的表达与MLH1的表达成正相关（rs=0．340，P〉0．05），与Ki67的表达成负相关（rs=-0．292，P〈0．05）。结论：FHIL、MLH1及Ki67在宫颈鳞癌中的表达可作为预后指标；三者有协同作用，共同检测有助于预测宫颈癌的侵袭、转移、预后。     

FHIT、p21^waf1/cip1基因在膀胱移行细胞癌中的表达与意义

目的：通过测定脆性组氨酸三联体基因（FHIT）及p21waf1/cip1基因在膀胱移行细胞癌组织、正常膀胱组织中的表达,探讨FHIT基因以及p21waf1/cip1基因与膀胱癌的关系及其临床意义。方法：采用免疫组织化学SP法对43例膀胱移行细胞癌（BTCC）组织及14例正常膀胱组织中的FHIT基因及p21waf1/cip1基因的蛋白表达进行检测。结果：FHIT蛋白表达与肿瘤的分期、分级无相关性（P〉0.05）而p21waf1/cip1蛋白的表达与之有相关性（P〈0.05）;FHIT蛋白的表达在GI肿瘤、浅表性肿瘤中明显低于在正常膀胱组织中的表达（P〈0.05）而p21waf1/cip1蛋白的表达在上述组织比较中无差别（P〉0.05）;FHIT蛋白的表达在初发肿瘤中与复发肿瘤中无明显差别（P〉0.05）而p21waf1/cip1蛋白的表达在上述两种组织比较有明显差别（P〈0.05）。FHIT蛋白与p21waf1/cip1蛋白的表达没有相关性（P〉0.05）。结论：FHIT基因可能成为早期诊断膀胱移行细胞癌的指标。p21waf1/cip1基因可能成为估计膀胱移行细胞癌的恶性程度及肿瘤侵袭性、预后的指标。FHIT基因在膀胱移行细胞癌中的作用机制可能与p21waf1/cip1基因没有关系。     

子宫内膜癌患者FHIT、SLIT2、EDNRB基因杂合性丢失

目的：探讨子宫内膜癌患者FHIT、SLIT2、EDNRB基因3个微卫星位点D3S1287、 D4S1593、D13S160杂合性丢失（loss of heterozygosity，LOH），以确定侯选的抑癌基因。方法：应用PCR-变性 PAGE-银染方法分别对35例子宫内膜癌患者癌组织及相对应的正常子宫内膜组织在FHIT、SLIT2、EDNRB基因3个微卫星位点D3S1287、D4S1593、D13S160 行LOH检测。结果：LOH总检出率为54.3%，D3S1287、D4S1593、D13S160位点分别为34.5%、20.5%、19.3%。FHIT、SLIT2、EDNRB基因的3个微卫星位点发生LOH率与子宫内膜癌手术-病理分期无明显相关性。结论：子宫内膜癌患者肿瘤组织在FHIT、SLIT2、及EDNRB基因的微卫星位点D3S1287、D4S1593、D13S160 均有LOH。FHIT、SLIT2及EDNRB基因为抑癌基因，其失活可能与子宫内膜癌的发生有关。     

非小细胞肺癌组织FHIT和突变型P53表达的关联性及相互作用

目的:探讨FHIT和突变型P53在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达的相关性以及两者潜在的相互作用. 方法: 采用免疫组化PicTureTM通用型二步法,检测FHIT和突变型P53蛋白在63例NSCLC和12例肺良性病变组织中的表达. 结果: NSCLC组织FHIT阳性率(42.9%)低于肺良性病变组织(75.0%);FHIT表达与病理分级(r=0.358, P＜0.05), TNM分期(r=0.314, P＜0.05)及淋巴结转移(r=0.380, P＜0.05)相关. 突变型P53在NSCLC组织中阳性率(52.4%)高于正常肺组织(8.3%);突变型P53表达与TNM分期(r=0.391, P＜0.05)及淋巴结转移(r=0.250, P＜0.05)相关,与病理分级无关联性. FHIT与突变型P53蛋白在63例NSCLC中表达相关(r=0.258, P＜0.05). 结论: P53突变和FHIT表达下调对NSCLC发生、发展均可能起重要作用, 在其病变过程中可能同时存在两条途径, 并可能相互交叉.     

FHIT基因微卫星变异与宫颈癌关系的分析

[目的]探讨FHIT基因微卫星变异与宫颈癌的关系。[方法]选取FHIT基因的两个微卫星多态标记,采用聚合酶链反应法（PCR）对50例宫颈癌及40例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织进行杂合性丢失（LOH）和微卫星不稳定性（MI）的检测。[结果]在D3S1234位点上宫颈癌的LOH发生率为46%（23/50）,CIN的LOH发生率为40%（16/40）,宫颈癌与CIN的LOH发生率差异无统计学意义（P〉0.05）,宫颈癌的MI发生率为18%（9/50）,CIN的MI发生率为12.5%（5/40）,差异无统计学意义（P〉0.05）;在D3S4103位点上宫颈癌的LOH发生率为40%（20/50）,CIN的LOH发生率为37.5%（15/40）,差异无统计学意义（P〉0.05）,宫颈癌的MI发生率为14%（7/50）,CIN的MI发生率为7.5%（3/40）,差异无统计学意义。但宫颈癌在两位点上LOH和MI发生频率均高于CIN,且高级别CIN发生率高于低级别CIN。[结论]FHIT基因的变异发生在宫颈癌变的晚期;FHIT基因的LOH与MI对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值。     

人抑癌基因FHIT真核表达质粒的构建与鉴定

[目的]构建人抑癌基因FHIT真核细胞表达载体。[方法]采用PCR方法，从人胎脑组织的总cDNA中扩增出444bp的人FHIT cDNA片段，然后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3．1／myc-His（-）B中，用限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒；用该表达质粒转染COS-7细胞，Western blot法检测FHIT蛋白的表达情况。[结果]人FHIT基因cDNA以正确方向插入到真核细胞表达载体DcDNA3．1／myc-His（-）B中；转染COS-7细胞后，可见转染细胞有Fhit蛋白的表达。[结论]本实验成功地构建了人抑癌基因FHIT的真核表达质粒pcDNA3．1／myc-His（-）B-FHIT，为研究FHIT基因在肿瘤的发生中的作用提供了有效的工具。