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31.
目的探讨人端粒酶催化亚基(hTERT)反义cDNA(pAdeasy-hTERT)在体外对胶质瘤细胞生长的抑制作用。方法将腺病毒介导的pAdeasy-hTERT作用于人胶质瘤细胞系U251,用MTT法检测细胞存活率、端粒酶重复序列扩增法测定端粒酶活性、Westem杂交鉴定hTERT蛋白的表达、RT-PCR法检测hTERT cDNA水平、PCNA观察肿瘤细胞的凋亡情况以及用流式细胞仪对转染后肿瘤细胞的周期进行分析。结果pAdeasy-hTERT在体外明显抑制肿瘤细胞生长,降低端粒酶活性,抑制hTERT表达。结论pAdeasy-hTERT显著抑制人胶质瘤细胞生长,可成为恶性胶质瘤基因治疗的靶基因。 相似文献
32.
血管内皮生长因子反义RNA对C6鼠胶质瘤细胞体外作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨VEGF反义RNA对C6鼠胶质瘤细胞体外作用。方法用Lipofectamine介导的方法将VEGF反义eDNA转染入C6鼠胶质瘤细胞系,观察其对细胞增殖和凋亡的影响。结果在体外VEGF反义RNA可有效抑制C6鼠胶质瘤细胞内源性VEGFmRNA和VEGF蛋白的产生,但对细胞增殖和凋亡无明显影响。结论采用VEGF反义RNA可能成为抗血管形成肿瘤治疗的新策略之一。 相似文献
33.
由神经外胚叶组织发生的肿瘤,称胶质瘤。世界卫生组织曾在1977年发表了脑瘤的命名标准并分类进行统计,胶质瘤占全部脑瘤的33.3%~58%。平均43.5%。临床上大多数胶质瘤有典型的神经系统症状,而得到早期诊断,但部分患者神经系统症状不明显,特别是少年儿童对早期出现的神经系统症状叙述不清或认识不足,因而以并发症首诊于眼科。本文回顾性分析1999年~2004年间首诊于我科,后经神经内科确诊为胶质瘤的完整病例5例,现报告分析如下。 相似文献
34.
目的构建抑制黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)的siRNA表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系SHG-44细胞中对MAGE-1基因表达的干涉作用。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE-1基因寡核苷酸链,克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建RNA干涉(RNAi)质粒载体。利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后SHG-44细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干扰效果。结果重组构建的pSUPER-MAGE-1载体经双酶切电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功插入到预计位点,并且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的SHG-44多克隆细胞MAGE-1的表达经RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干涉作用。结论成功构建了针对MAGE-1基因的siRNA表达载体,抑制SHG-44细胞中的MAGE-1分子的表达。 相似文献
35.
人胶质瘤干细胞内在自我更新能力 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 了解胶质瘤干细胞内在的自我更新和增殖能力。方法 观察原代胶质瘤细胞在单纯改良Eagle/F12培养液(DMEM/F12)中胶质瘤干细胞球的形成,并检测其CD133、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、微管相关蛋白(MAP2)、髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达。通过二代球体形成、细胞增殖测定、分化实验分析其自我更新、增殖、多能分化能力。通过裸鼠移植瘤实验观察所分离细胞球细胞与原代培养胶质瘤细胞成瘤能力的差异。结果 在单纯DMEM/F12培养液中形成的胶质瘤细胞球细胞表达神经干细胞标记CD133,不表达分化标志GFAP、MAP2,少数细胞表达MBP。分离出的胶质瘤细胞球细胞可在单纯DMEM/F12培养基中增殖,并能形成CD133阳性的二代细胞球,可分化为GFAP、MAP2、MBP阳性表达的肿瘤细胞。裸鼠成瘤实验显示其成瘤能力显著高于原代胶质瘤细胞。结论 胶质瘤干细胞能在无血清、无外源性细胞因子培养基中形成肿瘤干细胞球,胶质瘤干细胞的自我更新和增殖不依赖于外源性生长因子,它可能拥有自我更新的自身活化机制。 相似文献
36.
脑胶质瘤严重危害人类的健康,其发生系多因素、多阶段、多基因异常累计的过程。基因异常主要表现为原癌基因活化,抑癌基因失活和DNA损伤修复基因的突变或丢失。细胞周期控制系统由细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶( cyclin-dependent kinase, CDK) 和CDK抑制因子(cdk inhibitor, CKI) 组成。cyclin与CDK以cyclin-CDK复合物的形式发挥作用,cyclin为调节亚单位,CDK为催化亚单位。CKI能竞争性地与CDK结合,抑制其活性,从而调整细胞周期。CKI作为细胞周期调控中的主要成员,分为两类: 相似文献
37.
目的研究5-FC/CD::UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6的杀伤效应。方法扩增yCD::UPRT融合基因并构建含yCD::UPRT基因的重组表达载体;载体转染包装细胞PT67,所获重组病毒转染胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆;用MTT法检测不同浓度5-FC对CD::UPRT转基因细胞的杀伤效应。结果PCR法扩增出全长CD::UPRT基因,经测序证实序列正确,重组逆转录病毒表达载体pLXSN-yCD::UPRT经双酶切获目的条带,载体转染包装细胞获重组逆转录病毒(滴度达3.5×10~6CFU/ml)并转染C6,经筛选获得转基因阳性克隆C6-yCD::UPRT细胞株,检测显示该细胞株有效表达目的基因。当5-FC终浓度≥10μmol/L时,实验组与对照组的细胞增殖力出现显著差异(P<0.01),5-FC作用96h后电镜观察到凋亡小体。结论5-FC/yCD::UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6有明显的杀伤作用。 相似文献
38.
综合疗法治疗视神经萎缩疗效观察 总被引:2,自引:0,他引:2
王兴刚 《牡丹江医学院学报》2006,27(1):35-36
为了探讨视神经萎缩的治疗方法,采用采用西医治疗的基础上,配合中药、针刺治疗24眼,总有效率87.50%,综合疗法为视神经萎缩有效方法之一. 相似文献
39.
1995年10月~1996年12月,我们利用X-刀对74例脑胶质瘤进行大剂量单次照射治疗与小剂量分次照射治疗对比,并进行前瞻性研究,探讨两者对脑胶质瘤的疗效。回临床资料三.l一般资料本组74例中男49例,女25例;年龄6~79岁,平均43.8岁。大脑半球胶质瘤40例,小脑胶质瘤15例,丘脑胶质瘤7例,脑干胶质瘤9例,松果体区胶质瘤2例,脑胶质瘤病1例。肿瘤直径12~69mm,平均38.smm;体积5.1~115.scm’,平均39.Zcm’。1.2临床表现颅内压增高6例,癫清发作14例,运动障碍20例,感觉障碍Ic例,精神症状5例,共济失调5例,颅神经麻痹8例,内… 相似文献
40.
腺病毒介导的HSV—tk基因治疗大鼠脑胶质瘤实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:带有HSV-tk基因的重组腺病毒(AdHCMV-tk)结合核苷类似物(NA)治疗大鼠C6脑胶质瘤。方法:用X-gal染色测定AdHCMV-lacZ转染大鼠C6胶质瘤细胞的效率。用AdHCMV-tk/ACV、GCV离体及活体治疗大鼠C6胶质瘤。结果:AdHCMV-lacZ感染C6细胞效率达100%,AdHCMV-tk感染C6细胞,在病毒感染复数为1000时,GCV和ACV半致死剂量分别为3μg/ml和20μg/ml,Ad-HCMV-tk/ACV治疗大鼠C6胶质瘤模型,大鼠生存期超过90天,而对照组分别为17.0±1.6天(生理盐水组)、14.5±1.3天(AdHCMV-lacZ组),P<0.001。结论:重组腺病毒对靶细胞感染效率可达100%,AdHCMV-tk用GCV的杀伤C6胶质瘤细胞比ACV强,而HSV-tk/ACV用腺病毒介导治疗大鼠脑肿瘤疗效显著。 相似文献