高效液相色谱法测定当归苦参丸中苦参碱和氧化苦参碱

目的建立测定当归苦参丸中苦参碱和氧化苦参碱含量的高效液相色谱法。方法采用Phenemonex C18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相：乙腈-0．1％三氟醋酸溶液（5：95），流速：1．0mL·min^-1，检测波长：208nm，柱温：35℃。结果苦参碱和氧化苦参碱线性范围分别为0．0512～0．3584μg（r=0．9990）和0．1924～1．3468μg（r=0．9999）；平均回收率分别为98．73%,100．14％（n=6）。结论该方法操作简单，重现性好，检测灵敏度、准确度高，且样品分离效果好。适用于当归苦参丸中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定。     

均匀设计法制备苦参碱渗透泵型控释片

目的制备苦参碱渗透泵型控释片,同时建立一种新的设计初级渗透泵处方的方法。方法利用均匀设计法得到释放速率与各处方因素间的定量关系,通过回归方程预测合适的处方。结果回归方程的显著性和精度较好,以其为依据制备了苦参碱控释片。结论对于初级渗透泵的处方设计,均匀设计法是可行的方法。     

肝力注射液逆转人肝癌细胞获得性多药耐药的体外研究

目的研究肝力注射液体外逆转人肝癌细胞5-Fu获得性多药耐药的作用。方法MTT法检测肝力注射液对人肝癌BEL-7402/5-Fu耐药细胞株的增殖抑制率及对5-Fu获得性多药耐药的逆转指数,倒置显微镜及Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细胞内阿霉素荧光强度。结果人肝癌BEL-7402/5-Fu细胞株对临床常用化疗药物显示出不同程度的交叉抗药性,肝力注射液(以苦参碱计)在0.230、0.115、0.058mg/mL3个质量浓度对人肝癌BEL-7402耐药细胞株72h的增殖抑制率分别为(9.25±2.38)%、(8.46±1.90)%、(4.23±2.05)%,对5-Fu的逆转指数分别为5.50、3.83、2.25,肝力注射液在0.230mg/mL质量浓度预处理细胞2h能提高细胞内阿霉素的量约38.61%。结论肝力注射液在体外具有逆转人肝癌细胞5-Fu获得性多药耐药的作用。     

高效液相色谱法测定人血浆中苦参碱的浓度

目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定人血浆中苦参碱的浓度。方法以0．02mol／L磷酸二氢钾溶液（含0．4％三乙胺，以磷酸调节pH值至6.0±0．1）-乙腈（88：12）为流动相，尼扎替丁为内标，血浆样品经二氯甲烷萃取后采用HPLC法测定。结果苦参碱质量浓度的线性范围是0．102～20．4μg／mL，平均相对回收率为93．3％～108，6％，日内和日间精密度RSD均小于10％，苦参碱的最低检测限为25ng／mL。结论该方法快速、准确、灵敏，可用于苦参碱的药代动力学研究。     

HPLC法测定苦参总碱中苦参碱与氧化苦参碱的含量

目的:采用高效液相色谱法测定苦参总碱中苦参碱和氧化苦参碱的含量。方法:采用 Elite Hypersil NH_2柱(5μm,250mm×4.6 mm),乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(81:10:9)为流动相,流速:1.0 mL·min~(-1),检测波长220 nm,柱温:25℃,进样量:10 μL。结果:苦参碱、氧化苦参碱的线性范围分别为5.32～53.2μg·mL~(-1)(r=0.9997),65.7～525.6μg·mL~(-1)(r=0.9995)。苦参碱平均加样回收率为99.5%,RSD=1.0%(n=6);氧化苦参碱的平均加样回收率为99.7%,RSD=0.6%(n=6)。结论:本方法操作简便、快速、可靠,可用于控制苦参总碱质量。     

反相高效液相色谱法测定肤疾洗剂中苦参碱的含量

目的建立肤疾洗剂中苦参碱的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法，Inertsil NH2色谱柱（250him×4．6him，5um），以乙腈-无水乙醇-3％磷酸溶液（83：8．5：8．5）为流动相，流速1．0mL／min，检测波长为220nm。结果苦参碱在0．039～1．560μg范围内线性关系良好（r=0．9997），平均回收率为97．8%，RSD=1．1%。结论本法简便、快速、准确，可用于该制剂的质量控制。     

苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶表达的影响

目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48、72、96 h后,经透射电镜和DNA Ladder实验了解到细胞凋亡的发生,PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT的mRNA表达水平。结果各种质量浓度的苦参碱作用A549细胞48 h后,均显著抑制细胞的增殖且呈浓度依赖性;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞不同时间后,经透射电镜形态学检测和DNA Ladder实验,均显示A549细胞发生了凋亡改变;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48 h后,端粒酶活性明显受抑,hTERT mRNA表达显著降低。结论苦参碱能抑制肺腺癌A549细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。     

苦参碱白蛋白亚微粒的制备和体外性质研究

 目的制备肝靶向性苦参碱白蛋白亚微粒,并对其理化性质和体外释药特性进行考察。方法采用复凝聚法制备苦参碱白蛋白亚微粒,以亚微粒包封率为考察指标,均匀设计法优化处方工艺,对优化工艺产品采用透射电镜、激光粒度分布与Zeta电位分析仪、差示扫描量热法和X-射线衍射法分析理化性质,超滤离心法考察其体外释药动力学特征。结果分析结果证明,亚微粒已经形成,其外观形态均匀圆整,平均包封率为(84.25±0.95)%,平均载药量为(6.94±0.05)%,平均粒径为(312.6±12.5)nm。体外释药具有双相动力学特征,方程:100-Q=0.476e^-0.351t+0.3253e^-0.0322t,r_α=0.9985,r_β=0.9987。结论实验建立的制备工艺简单可行,理化性质稳定,可用于肝靶向苦参碱白蛋白亚微粒的制备。     

苦参碱对肝癌患者肿瘤浸润淋巴细胞的影响

目的:研究不同浓度苦参碱对肝癌患者肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)增殖、体外杀瘤活性的影响.方法:将苦参碱分为0.1,0.2,0.4,0.6,0.8 g/L 5个浓度组,分别加入含有IL-2的DMEM培养基,体外诱导扩增TIL,通过MTT法检测TIL增殖、体外杀瘤活性,采用流式细胞术测定T淋巴细胞亚群,研究苦参碱体外对肿瘤免疫功能的影响.结果:苦参碱低浓度组(终浓度分别为0.1,0.2 g/L)对TIL作用不明显, 高浓度组(终浓度为0.8 g/L)能抑制TIL增殖和体外杀瘤活性(P＜0.01),中浓度组(终浓度分别为0.4, 0.6 g/L)能促进TIL增殖和体外杀瘤活性(P＜0.01),CD8 数量有所增加,CD4 /CD8 比值有所下降(P＜0.01).结论:合理利用苦参碱可增强患者肿瘤免疫能力.     

还原型谷胱甘肽联合苦参碱治疗慢性乙肝的临床观察

目的观察还原型谷胱甘肽联合苦参碱对慢性乙型肝炎的疗效。方法将163例慢性乙型肝炎患者随机分为两组,治疗组83例给予苦参碱及还原型谷胱甘肽治疗;对照组80例单纯给予还原型谷胱甘肽。两组疗程均为8周。观察患者血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰转肽氨酶(r-GT)、总胆红素(TBil)、透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)I、V型胶原(IV-C)、Ⅲ型胶原(PCⅢ)及门静脉内径(D)值变化情况。结果治疗组治疗后的ALT、AST、ALPr、-GT、TBil、HA、LN、IV-C、PCⅢ均降低,D值变小,与治疗前比较有显著性差异(P<0.05)。与对照组治疗后比较,改善更明显,有非常显著性差异(P<0.01)。治疗组与对照组的总有效率分别为85.54%和67.5%,差异有非常显著性(P<0.01)。结论还原型谷胱甘肽联用苦参碱治疗慢性乙型肝炎,在降酶、退黄、抗肝纤维化、缩小D值及改善临床症状方面有协同作用。