左归丸促进骨髓形成肝细胞的研究

目的:观察补肾(左归丸)对小鼠骨髓形成肝细胞的影响,揭示"肾生骨髓,髓生肝"的科学内涵.方法:采用交叉性别骨髓移植模型,雌性BALB/c小鼠随机分为补肾组(左归丸)、补气血组(八珍汤)和对照组(生理盐水),接受9.0Gy60Co源γ射线照射后,经尾静脉注射输入同种系雄性小鼠骨髓细胞,骨髓移植后分别给予7g/(kg?d)左归丸、八珍汤、生理盐水灌胃,给药2、4、6mo处死动物,取肝组织标本.通过荧光原位杂交检测肝组织切片雄性性别决定基因Sry与白蛋白mRNA双阳性细胞(雄性骨髓来源的肝细胞),计算各组骨髓转化为肝细胞的阳性细胞率(%).结果:补肾组、补气血组和对照组的阳性细胞率均随着骨髓移植时间的延长而增加,移植后6mo时间点骨髓转化为肝细胞的阳性细胞率(18.25±3.36)与2、4mo时间点(4.00±1.73,4.80±1.30)相比显著升高(P<0.01).同一时间点不同组小鼠骨髓转化为肝细胞的阳性细胞率有显著差异,骨髓移植后2mo时补肾组阳性细胞率(4.00±1.73)高于补气血组(1.20±0.45)和对照组(1.00±0.61)(P<0.01),移植后4mo时补肾组阳性细胞率(4.80±1.30)高于补气血组(1.40±0.55)(P<0.01),移植后6mo时补肾组阳性细胞率(18.25±3.36)高于补气血组(7.20±1.33)和对照组(9.25±1.31)(P<0.01).结论:补肾(左归丸)能够促进骨髓形成肝细胞.补肾促进骨髓形成肝细胞的作用机制可能在于调节全身机能和改善肝脏微环境,有利于骨髓细胞移行至肝脏并转化为肝细胞.     

左归丸对肾虚仔鼠胸腺内CD4-CD8-T细胞分化的影响

目的:研究左归丸对肾虚仔鼠发育过程中CD4-CD8-T细胞在胸腺内分化的影响以及补肾填精法的应用价值,探索“肾为先天之本”的理论内涵。方法:采用大鼠2∶1进行雌雄配对,3种应激法复合构建肾虚模型,将孕鼠分为正常组,模型组,胸腺肽组(0.003 g·kg^-1),左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg^-1)。正常组不造模给予生理盐水灌胃;模型组造模给予生理盐水灌胃,胸腺肽组造模给予胸腺肽胶囊溶液灌胃,左归丸低、高剂量组造模给予左归丸悬浊液灌胃,选取胚胎16,19 d及出生第1天(E16,E19,P1)3个时期,计算仔鼠胸腺指数,电镜观察仔鼠胸腺上皮细胞超微结构形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测仔鼠胸腺内胸腺肽β4(TMSβ4)和胸腺肽α1(Tα1)的含量,流式细胞学检测仔鼠胸腺细胞表面CD4,CD8,CD25,CD44表达以鉴定T细胞类型。结果:电镜下模型组胸腺上皮细胞形态不规则,细胞核变形,核染色质明显聚集增加,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组胸腺上皮细胞变形不明显;ELISA法检测结果显示,与正常组比较,模型组不同时期的TMSβ4,Tα1含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组胸腺内TMSβ4和Tα1的含量明显升高(P<0.05);流式细胞检测显示,与正常组比较,模型组在E16,E19,P13个时期CD4^-CD8^-T细胞均明显增加(P<0.05),CD4^-CD8^-CD25^-CD44^-T(DN4)明显增加(P<0.05);与模型组比较,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组在E16,E19,P1时期CD4-CD8^-T细胞均明显减少(P<0.05),同时DN4也明显减少(P<0.05)。结论:左归丸可以改善肾虚仔鼠胸腺上皮细胞的结构,并通过增加仔鼠胸腺内TMSβ4和Tα1的分泌诱导胚胎期胸腺内T细胞从DN4至DP阶段的分化,说明左归丸通过补肾填精,促进T细胞发育成熟,调节仔鼠肾虚免疫失调状态。     

左归丸联合西药治疗再生障碍性贫血随机平行对照研究

[目的]观察左归丸联合西药治疗再生障碍性贫血疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将104例住院患者按抽签法随机分为两组。对照组52例,环孢素A5mg／kg／次,3次／d。康力龙6mg／次,3次/d。治疗组52例左归丸（熟地25g,山药15g,山茱萸、枸杞子各12g,鹿角胶6g,菟丝子15g,杜仲12g,当归、肉桂、丹皮各10g）,水煎200mL,1剂/d,早晚温服。西药治疗同对照组。连续治疗3个月为1疗程。观测临床症状、血常规、骨髓像、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组52例,基本痊愈21例,缓解13例,明显进步15例,无效3例,总有效率94．23％。对照组52例,基本痊愈12例,缓解9例,明显进步22例,无效9例,总有效率82．69％。临床疗效治疗组优于对照组（P〈0．05）.[结论]左归丸加减治疗再生障碍性贫血疗效显著,值得推广。     

左归丸提取液对2.2.15细胞乙肝病毒标志物的影响

目的:研究左归丸提取液对乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、表面抗原(HBsAg)的抑制作用。方法:应用2.2.15细胞株作为体外抗乙型肝炎病毒(HBV)实验模型,通过细胞毒性实验以确定对细胞无毒性作用的最高药物浓度,将此浓度药物直接加到细胞培养液中,分别取第4天、第8天的细胞培养上清液,用固相放射免疫方法测定其HBsAg、HBeAg含量。结果:浓度为25、12.5、6.25、3.125mg/ml的左归丸提取液对HBsAg、HBeAg有明显抑制作用;各浓度间存在量效关系;对HBeAg的作用优于对HBsAg的作用。结论:左归丸提取液对2.2.15细胞HBV标志物有显著的抑制作用。     

CCK-8与MTT法检测左归丸含药血清干预BMSCs增殖条件的比较

目的 探讨CCK-8与MTT法在检测左归丸含药血清干预大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖时所需的最佳实验条件,并比较两种方法的优缺点.方法 用左归丸含药血清进行干预P3 BMSCs,孵育结束后,分别加入CCK-8与MTT试剂,检测两种方法的最佳波...     

左归丸加减联合培哚普利叔丁胺片治疗气阴两虚夹瘀证早期糖尿病肾病临床观察

目的：观察左归丸加减联合培哚普利叔丁胺片治疗早期糖尿病肾病气阴两虚夹瘀证的疗效。方法：选择2020年9月至2021年11月广西中医药大学附属瑞康医院收治的气阴两虚夹瘀证早期糖尿病肾病患者77例,随机分为观察组(39例)和对照组(38例)。所有患者均接受基础治疗,对照组在此基础加用培哚普利叔丁胺片治疗,观察组在对照组的基础上加用左归丸加减治疗,疗程为3个月,观察治疗前后两组症状评分、血糖[空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、葡萄糖在目标范围内时间(TIR)]、肌酐(SCr)、尿素、预估肾小球率过滤(eGFR)、血清胱抑素-C(Cys-C)、血β₂-微球蛋白(Sβ₂-MB)、尿系列微量蛋白[24 h尿蛋白定量(24 h UmAlb)、24 h尿微量白蛋白定量(24 h MTP)及尿β₂-微球蛋白(Uβ₂-MB)]。结果：两组治疗前各项指标差异无统计学意义。治疗后,对照组总有效率为84.2%(32/38),观察组总有效率为94.9%(37/39),观察组疗效优...     

左归丸对肾阴虚模型大鼠神经-内分泌-免疫功能的影响

目的:探讨左归丸对肾阴虚模型大鼠神经-内分泌-免疫功能的作用机制。方法:按随机数字将60只清洁级健康雄性Wistar大鼠分均为正常组(同体积生理盐水),模型组(同体积生理盐水),预防组(与造模同时,1 g·kg~(-1)左归丸)及左归丸低剂量组(造模后,0.5 g·kg~(-1)左归丸),中剂量组(造模后,1 g·kg~(-1)左归丸),高剂量组(造模后,2 g·kg~(-1)左归丸),以甲状腺片灌胃制备肾阴虚模型;所有组均连续灌胃21 d。采集脾、胸腺、尿液和血液样本,计算脏器指数;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测促肾上腺皮质素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素(ACTH),皮质醇(CORT),三碘甲状腺原氨酸(T3),四碘甲状腺原氨酸(T4),甲状腺刺激激素(TSH),环磷酸腺苷(c AMP),环磷酸鸟苷(c GMP),17-羟皮质类固醇(17-OHCS),白细胞介素-6(IL-6),干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果:与正常组比较,模型组的T3,T4,c AMP,c GMP,IL-6,IFN-γ明显升高,TSH,c AMP/c GMP,脾指数,胸腺指数降低,差异显著(P0.05,P0.01),预防组各指标无明显变化。与模型组比较,左归丸各剂量组的T3,T4,c AMP,c GMP,IL-6,IFN-γ明显降低,TSH,c AMP/c GMP,脾指数、胸腺指数明显升高,差异显著(P0.05,P0.01);预防组T3,T4,CRH,ACTH,CORT,c AMP,c GMP,17-OHCS,脾指数,胸腺指数明显升高(P0.01),TSH,c AMP/c GMP,IL-6,IFN-γ明显降低(P0.01)。与预防组比较,左归丸各剂量组的T3,CRH,ACTH较高(P0.05,P0.01)。结论:左归丸能调节甲亢型肾阴虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴和下丘脑-垂体-甲状腺轴功能,改善免疫功能,这可能是干预甲亢型肾阴虚作用的机制之一。     

左归丸对痴呆鼠抗氧化作用及尼氏体的影响

目的 探讨左归丸对痴呆大鼠抗氧化作用及尼氏体的影响.方法 将84只Wistar雄性大鼠随机分成6组:A组腹腔注射生理盐水再脑内海马注射生理盐水,B、C、D、E、F组以D-半乳糖腹腔注射合并B淀粉样蛋白1-40注射海马制备老年性痴呆(AD)动物模型,C、D、E、F组同时分别灌胃抗脑衰胶囊、哈伯因和左归丸[5.4和2.7g/(kg·d)].采用生化法检测各组大鼠脑匀浆过氧化氢酶(CAT)、单胺氧化酶(MAO),尼氏染色观察各组大鼠海马神经元尼氏体及电镜观察各组超微结构变化.结果 灌服后左归丸组均能明显提高AD大鼠脑组织CAT活性、抑制MAO活性(P＜0.05);左归丸治疗组尼氏体溶解明显减少;F组神经纤维结构完好,尼氏体丰富,突触结构尚可.结论 左归丸通过提高抗氧化能力和改善神经元细胞损害对AD大鼠有一定的防治作用.     

不同补益方剂对老龄小鼠生精细胞凋亡的影响

目的:探讨不同补益方剂左归丸、右归丸、六味地黄丸、金匮肾气丸、五子衍宗丸、八珍汤对老龄小鼠生精细胞凋亡的影响。方法:将80只15月龄BALB/c小鼠随机分为老年组、左归丸组、右归丸组、六味地黄丸组、金匮肾气丸组、五子衍宗丸组、八珍汤组以及阳性药物(左卡尼汀)组,每组10只,另设10只2月龄BALB/c小鼠为青年组,各给药组按中药含生药2.5 g·kg-1分别灌胃给予相应药物,左卡尼汀组肌肉注射给药45 mg·kg-1,每天1次,连续4周。于末次给药24 h后将小鼠摘眼球取血,分离血浆、血清,利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血中丙二醛(MDA),一氧化氮合酶(NOS),促红细胞生成素(EPO),超氧化物歧化酶(SOD)以及外周血促卵泡生成激素(FSH),促黄体生成激素(LH),睾酮(T)的含量;采用免疫组化法检测各组小鼠睾丸组织Ki-67的表达;采用TUNEL法检测各组小鼠生精细胞凋亡情况。结果:与青年组比较,老年组小鼠MDA,NOS,EPO水平明显上升(P0.05);与老年组比较,各治疗组小鼠血清MDA,NOS,EPO水平明显下降(P0.05),除五子衍宗丸组和六味地黄丸组外,各治疗组小鼠血清SOD水平上升(P0.05)。与青年组比较,老年组小鼠血清FSH明显升高及LH,T含量明显下降(P0.05);与老年组比较,五子衍宗丸组小鼠血清FSH明显下降及LH,T含量明显升高(P0.05)。免疫组化法检测结果显示,与青年组比较,老年组小鼠睾丸组织内Ki-67表达水平明显下降(P0.05);与老年组比较,左卡尼汀组、六味地黄丸组、八珍汤组以及五子衍宗丸组小鼠睾丸组织Ki-67表达水平升高(P0.05)。TUNEL法检测结果显示,与青年组比较,老年组小鼠生精细胞凋亡率明显上升(P0.05);与老年组比较,各治疗组小鼠生精细胞凋亡率均明显下降,以五子衍宗丸下降率最显著(P0.05)。结论:6个不同的补益方剂对老龄小鼠生精细胞凋亡都有一定的抑制作用,其中以五子衍宗丸效果最佳。     

左归丸对GDM模型母鼠子鼠胰岛功能的影响

目的：探讨左归丸对妊娠期糖尿病（GDM）模型母鼠子鼠胰岛功能的影响，并基于胰腺产后增殖过程探讨左归丸改善子鼠胰岛功能的作用机制。方法：选取血糖正常的健康雌性SD大鼠与雄性大鼠按照2∶1比例同笼，以阴道栓或阴道涂片为依据，选取受孕雌性大鼠将其分为正常组、模型组、胰岛素组（地特胰岛素，20 U·kg-1）和左归丸低、高剂量组（1.89、3.78 g·kg-1）。除正常组外，用链脲佐菌素复制GDM大鼠模型，通过对母鼠血糖检测判断模型是否建立，除正常组和模型组外，其余组均每日给药。于子鼠出生后21 d时，每组检测6只子鼠空腹血糖值（FBG）与血清中空腹胰岛素（FINS），计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），每组另取12只子鼠进行口服糖耐量（OGTT）检测；出生22 d(B22d)腹主动脉取血，利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组子鼠血清中胰岛素（INS）、胰高血糖素（GC）、胰多肽（PPY）、生长抑素（SS）观察胰岛各细胞所表达激素的水平，利用苏木素-伊红（HE）染色观察各组子鼠胰腺组织病理变化；利用免疫荧光法（IF）观察子鼠胰岛面积与结构；且通过蛋白免疫印迹法（Western bl...