肺金生方抗非小细胞肺癌EGFR-TKIs耐药性的分子机制研究

目的探讨肺金生方抗非小细胞肺癌(NSCLC)酪氨酸磷酸酶抑制剂(TKIs)靶向药物耐药的作用及分子机制。方法选用NSCLC细胞系HCC827,按0.01、0.05、0.10、0.50和1.0μM浓度梯度诱导构建吉非替尼耐药细胞株,采用CCK8法检测耐药株是否构建成功,采用荧光定量PCR(q-PCR)检测耐药株c-MET扩增水平。20只BALB/c裸鼠按随机数字表法分成空白对照组、吉非替尼组、肺金生方组和肺金生方+吉非替尼组,每组5只。按每只4×10~7/200μL将吉非替尼耐药细胞株注射于裸鼠后肢皮下,构建皮下移植瘤模型。四组均腹腔注射生理盐水,吉非替尼组给予吉非替尼50mg/kg灌胃;肺金生方组给予肺金生方剂量53.6g/kg灌胃;肺金生方+吉非替尼组给予吉非替尼50mg/kg+肺金生方剂量53.6g/kg联合灌胃给药。给药频次每2天1次,连续给药4周。CCK8法检测耐药HCC827 GR细胞增殖率,流式细胞技术检测耐药HCC827 GR细胞凋亡率,Western blot检测耐药HCC827 GR细胞p-EGFR、p-MET、p-AKT、p-ERK1/2表达水平。结果与空白对照组比较,吉非替尼组裸鼠皮下移植瘤瘤重无差异[(1.34±0.16)g比(1.41±0.13)g,P>0.05],肺金生方组裸鼠皮下移植瘤瘤重明显减轻[(0.77±0.28)g比(1.41±0.13)g,P<0.01],吉非替尼+肺金生方组裸鼠皮下移植瘤明显小于肺金生方组和吉非替尼组[(0.34±0.16)g比(0.77±0.28)g、(1.34±0.16)g,P均<0.01];肺金生方单用或与吉非替尼联用能够明显抑制耐药HCC827 GR细胞的增殖能力[(43.45±4.47)%、(24.25±5.21)%比(100.00±2.14)%,P均<0.01];肺金生方组、吉非替尼+肺金生方组细胞凋亡率显著高于空白对照组[(7.40±0.56)%、(12.80±0.72)%比(3.05±0.54)%,P均<0.01];肺金生方组、吉非替尼+肺金生方组c-MET和p-c-MET表达水平明显降低,并明显抑制下游AKT/ERK1/2磷酸化水平。结论肺金生方或和吉非替尼联用能有效抑制吉非替尼耐药皮下移植瘤的生长,抑制耐药细胞的增殖并促进凋亡,其作用机制可能与下调c-MET蛋白表达以及下游AKT/ERK1/2磷酸化水平有关。     

益气复脉注射液对肥厚型梗阻性心肌病的临床疗效

目的观察益气复脉注射液对肥厚型梗阻性心肌病(HOCM)患者的临床疗效。方法纳入34例HOCM患者,随机分为观察组(n=16)和对照组(n=18例),观察组给予益气复脉注射液治疗,对照组给予灯盏花注射液治疗,疗程为28天。比较两组患者的临床疗效及治疗前、后超声心动图参数变化情况。结果观察组和对照组的临床总有效率分别为:81.3%和27.8%,两组患者治疗后总有效率有显著统计学差异(P0.01)。观察组患者治疗前、后心脏室间隔厚度(VS)、左室后壁厚度(LVPWT)、左室舒张末期内径(LVDED)、左室收缩末期内径(LVSED)、主动脉根部内径(AOD)、左室射血分数(LVEF)、心排出量(CO)水平比较,无统计学差异(P0.05)。观察组患者治疗前、后二尖瓣前叶前向运动分级(SAM分级)、左室流出道(LVOT)流速、二尖瓣舒张期A峰、E峰、左室等容舒张时间(IVRT)、左室舒张高峰充盈率(LVDPFR)、左室舒张高峰充盈时间(LVDPFT)水平比较,有显著统计学差异(P0.05),与对照组上述指标比较亦有统计学差异(P0.05)。对照组患者治疗前后上述指比较,均无无统计学差异(P0.05)。结论益气复脉注射液可改善HOCM舒张功能和降低左室流出道压力阶差,减低左室流出道梗阻,近期疗效满意。     

解郁止痛方对偏头痛-抑郁共病模型大鼠海马组织中BDNF/TrkB表达的影响

目的:探讨解郁止痛方(JYZT)对偏头痛-抑郁共病大鼠行为学及海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠,经行为学评分后选40只,随机分为5组:假手术组、模型组、JYZT高剂量(25 ml/kg)组、JYZT低剂量(12.5 ml/kg)组及阳性药物(氟西汀)组。除假手术组外,其余各组均采用慢性温和不可预知刺激结合电刺激大鼠上矢状窦的方法诱导偏头痛-抑郁共病模型。各组予以相应药物干预28 d,分别于2、4周时进行体质量测定、行为学测试;4周时,Western blot检测大鼠海马组织中BDNF及TrkB的蛋白表达水平。结果:①2周、4周时,模型组大鼠的体质量明显低于假手术组(P0.05);4周时,JYZT高剂量组和低剂量组大鼠的体质量明显高于模型组(P0.05)。②2周、4周时,模型组大鼠水平运动格数及垂直运动次数均明显少于假手术组(P0.05);4周时,JYZT高、低剂量组和阳性药物组大鼠的水平运动格数及垂直运动次数均显著高于模型组(P0.05)。③2周、4周时,模型组大鼠强迫游泳不动时间明显高于假手术组(P0.05);4周时,JYZT高剂量组和阳性药物组大鼠强迫游泳不动时间明显低于模型组(P0.05)。④4周时,模型组大鼠海马BDNF、TrkB蛋白表达较假手术组显著减少(P0.05);JYZT高剂量组的BDNF、TrkB蛋白表达较模型组明显增加(P0.05)。结论:解郁止痛方可显著改善偏头痛-抑郁共病大鼠症状,其作用机制可能与调节海马组织BDNF/TrkB的表达有关。     

注射用益气复脉(冻干)安全性医院集中监测研究

目的： 分析注射用益气复脉（冻干）临床应用中不良反应（ADR）发生特征和发生率。方法： 采用回顾性医院集中监测方法,利用合理用药监测系统对2017年1月-2017年11月使用注射用益气复脉（冻干）的住院患者进行监测。监测内容为患者的一般信息、诊断信息、用药信息、不良反应/事件信息等。结果： 2 476例患者中发生ADR 31例,发生率为1.25%,以全身性损害和皮肤及其附件损害最为常见,主要表现为皮疹、皮肤瘙痒、寒战、高热等;严重ADR 5例,新的ADR 16例;31例患者中男性14例,女性17例;患者用药1~7 d内发生ADR最多。结论： 注射用益气复脉（冻干）ADR发生率属常见,以老年人为主,临床应密切监测其不良反应发生。     

注射用酒石酸长春瑞滨胶束对中枢神经、消化、心血管和呼吸系统的安全药理学研究

目的 研究注射用益气复脉（冻干）（YQFM）对大鼠离体胸主动脉环的作用及机制。方法 采用大鼠离体胸主动脉血管环,观察YQFM及红参、麦冬、五味子提取物（HS、MD、WWZ）对血管的直接作用,YQFM对KCl或去甲肾上腺素所引发血管收缩作用的影响;对乙酰胆碱所致血管舒张作用的影响;对内钙释放所致血管收缩作用的影响。结果 YQFM在低浓度下对血管无刺激作用,但是在高浓度时,对血管有刺激收缩作用,且无内皮组收缩幅度明显超出有内皮组。不同浓度的3种药材提取物对血管刺激作用不显著;YQFM可显著抑制KCl或者去甲肾上腺素引起的血管收缩;YQFM对乙酰胆碱引起的血管舒张作用无显著抑制作用;YQFM不能抑制内钙释放。结论 YQFM在高浓度下对血管有一定的直接刺激收缩作用,且直接刺激作用可能和血管内皮相关;YQFM既有抑制受体操纵性钙通道又有抑制电压依赖性钙通道的调节作用。     

益气和胃胶囊联合瑞巴派特治疗慢性非萎缩性胃炎的临床研究

目的探讨益气和胃胶囊联合瑞巴派特片治疗慢性非萎缩性胃炎的临床疗效。方法选取2018年2月—2018年10月在荆州市中心医院进行治疗的94例慢性非萎缩性胃炎患者为研究对象,根据用药方案的不同分为对照组和治疗组,每组各47例。对照组口服瑞巴派特片,0.1g/次,3次/d;治疗组在对照组基础上口服益气和胃胶囊,2.0g/次,3次/d。两组均治疗4周。观察两组的临床疗效,比较两组的症状积分、血清学指标水平、胃黏膜炎症积分、胃黏膜炎症病理积分。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为80.85%、95.74%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组胃脘痞胀、胃脘疼痛、食欲不振、嗳气积分均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组症状积分明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、前列腺素E2(PGE2)水平均显著升高,表皮生长因子(EGF)水平显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗后,治疗组血清学指标明显优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组胃黏膜炎症积分、胃黏膜炎症病理积分均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗后,治疗组胃黏膜炎症积分、胃黏膜炎症病理积分明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气和胃胶囊联合瑞巴派特片特治疗慢性非萎缩性胃炎具有较好的临床疗效,可改善患者临床症状、胃黏膜炎症及病理情况,促进机体血清GAS、MTL、EGF、PGE2水平增高,具有一定的临床推广应用价值。     

平喘益气颗粒联合沙美特罗替卡松气雾剂治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期的临床研究

目的探讨平喘益气颗粒联合沙美特罗替卡松气雾剂治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期的临床疗效。方法选取2017年6月—2018年6月在天津市黄河医院治疗的94例慢性阻塞性肺疾病稳定期患者为研究对象,将患者按随机数表法分为对照组和治疗组,每组各47例。对照组吸入沙美特罗替卡松吸入气雾剂,2揿/次,2次/d。治疗组在对照组基础上口服平喘益气颗粒,2袋/次,3次/d。两组患者连续治疗3个月。观察两组的临床疗效,比较两组的肺功能指标、SGRQ评分、6 min步行距离、免疫功能、炎症因子。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为76.60%、91.49%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组第1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC均显著提高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组FEV1、FVC、FEV1/FVC明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组圣乔治呼吸问卷(SGRQ)评分显著降低,6 min步行距离显著增加,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组SGRQ评分低于对照组,6 min步行距离长于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+明显高于治疗前,且治疗组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)水平显著下降,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组炎症因子水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论平喘益气颗粒联合沙美特罗替卡松气雾剂治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期具有较好的临床疗效,可改善患者临床症状及肺功能,调节免疫功能及相关炎症因子,提高生活质量,具有一定的临床推广应用价值。     

补中益气颗粒联合曲美布汀治疗脾胃虚弱证腹泻型肠易激综合征的疗效观察

目的观察补中益气颗粒联合曲美布汀治疗脾胃虚弱证腹泻型肠易激综合征的临床疗效。方法选取2015年6月—2016年5月在天津中医药大学第一附属医院脾胃科门诊就诊的脾胃虚弱证腹泻型肠易激综合征患者60例,每组各30例。对照组患者口服马来酸曲美布汀片,0.2 g/次,3次/d。治疗组在对照组的基础上口服补中益气颗粒,3 g/次,3次/d。两组患者均连续治疗4周。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组症状积分、排便情况和焦虑抑郁症状评分的变化。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为83.33%和96.67%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者腹泻、腹痛、腹胀积分均较治疗前明显下降(P0.01);且治疗组低于对照组(P0.01)。治疗后,两组患者日排便次数及10 d内排便急迫天数均较治疗前降低(P0.05);且治疗后治疗组优于对照组(P0.05)。治疗后,两组SAS评分、SDS评分均较治疗前显著降低(P0.05);且治疗后治疗组SAS和SDS评分优于对照组(P0.05)。结论补中益气颗粒联合曲美布汀对脾胃虚弱证腹泻型肠易激综合征疗效确切,具有一定的临床推广应用价值。     

注射用益气复脉(冻干)的质量标志物研究

注射用益气复脉(冻干)是由红参、麦冬和五味子3味药材精制而成,临床上主要用于治疗冠心病劳累型心绞痛气阴两虚证及冠心病所致慢性左心功能不全II、III级气阴两虚证。根据质量标志物概念,从物质基础、药效、网络药理、药动学及药性等方面对注射用益气复脉(冻干)质量标志物进行预测分析,初步确定人参皂苷Rb1、Rg1、Rf、Rh1、Rc、Rb2、Ro、Rg3及麦冬皂苷C、麦冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、果糖、五味子醇甲13个成分为质量标志物,并以此为核心建立全程质量控制体系。基于质量标志物对注射用益气复脉(冻干)进行质控方法研究,可以为中药注射剂质量评价提供新的研究思路。     

基于正交试验设计与BP神经网络优化益气活血方水提工艺研究

目的优化筛选益气活血方的水提工艺参数。方法在单因素实验基础上,采用正交试验设计,以加水量、提取时间、浸泡时间为考察因素,丹酚酸B和羟基红花黄色素A的转移率及浸膏得率为评价指标,采用G1-熵权法赋权得到综合评分。通过正交试验设计进行分析得到最佳水提工艺,再通过BP神经网络建模进行网络模型优化和目标寻优。验证试验对比2种分析方法,寻找益气活血方的最佳水提工艺参数。结果基于2种分析方法对比发现,正交试验分析得到最佳水提工艺的综合评分略高于BP神经网络建模结果,故最终确定该益气活血方最佳水提工艺参数为水提3次、浸泡0.5h、加水量20倍、提取时间3.5 h。结论优选出的益气活血方水提最佳工艺稳定可行,为复方中药的新药开发和现代化研究提供了新的思路和参考。