不同干燥方法对丹参毛状根有效成分含量及其抗氧化活性的影响

目的：探讨不同干燥方法对丹参毛状根中主要化学成分含量及其抗氧化活性的影响,尤其关注采后干燥对丹参毛状根酚酸类成分是否也有类似对植物根一样的胁迫诱导作用。方法丹参毛状根经冷冻干燥、真空干燥、阴干和晒干四种不同干燥方式处理后,采用高效液相色谱法测定毛状根中包括9种酚酸类和4种酮类成分的含量;利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（ DPPH）自由基清除试验、超氧阴离子清除试验、脂质过氧化抑制试验测定毛状根提取物的抗氧化活性。结果与冷冻干燥相比,真空干燥和阴干对酚酸类成分的影响不大,但酮类成分下降约50％;晒干处理后二类成分均严重损失达90％左右;晒干样品提取物抗氧化活性也显著下降。结论冷冻干燥是最适合丹参毛状根的干燥方法;与丹参根不同,采后干燥对毛状根的酚酸类成分无诱导作用。     

沼泽红假单胞菌生物转化丹参醇提物转化酶初步定域

目的比较丹参醇提物经沼泽红假单胞菌以及其各细胞部位转化后化学成分的变化,对其转化酶在细胞部位水平上进行初步定域。方法利用沼泽红假单胞菌各细胞部位分别对丹参醇提物进行生物转化,高效液相色谱法(HPLC)分析转化前后主要化学成分的变化,用主成分分析法(PCA)对转化后变化程度进行评估。结果经不同细胞部位转化后,丹参醇提物的化学成分均发生变化。与对照比较,经细胞质、细胞膜化转后化学成分改变最大,表明细胞质、细胞膜含转化酶更多。结论沼泽红假单胞菌对丹参醇提物转化酶主要分布于细胞质、细胞膜上。     

关于丹参及其制剂高效液相色谱指纹图谱参照物的选择研究概况

近年来,国内外学者在丹参及其制剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的建立上进行了大量研究。参照物的选择是指纹图谱研究过程中必不可少的内容,在图谱的建立与谱峰鉴别方面具有重要的意义。以丹参、HPLC指纹图谱和参照物为关键词,通过CNKI、万方数据库和Elsevier等专业数据库系统查阅相关文献,有参考价值的文献近40篇,本文综述了近十年来丹参及其制剂的HPLC指纹图谱参照物选择的情况,期望今后能够更好地为丹参HPLC指纹图谱标准化研究提供参考和依据。     

丹参联合葛根对糖尿病眼病模型大鼠的协同作用

目的:研究丹参联合葛根对糖尿病眼病模型大鼠的协同作用。方法:腹腔注射链脲佐菌素-弗氏完全佐剂联合喂饲高脂饲料以复制大鼠糖尿病眼病模型。实验分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、葛根(33 g/kg)组、葛根丹参(33 g/kg+33 g/kg)组,灌胃给药,每天2次,连续15 d。于电镜下观察大鼠眼组织形态变化。分别灌胃葛根(33 g/kg)、葛根丹参(33g/kg+33 g/kg),给药0、10、20、30、45、60、90、120、240、360、480 min时取血,高效液相色谱法测定大鼠血浆中葛根素的血药浓度。色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(25∶75,V/V),检测波长为250 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为25Ⅸ,进样量为10μl。以WinNonlin软件分析药动学参数。结果:模型组大鼠眼组织视网膜细胞萎缩,脉络膜血管增生、扩张、充血,出现新生血芽,内皮细胞核数目增多,给药后上述病理状态均得到改善,其中葛根丹参组改善情况优于葛根组。葛根素质量浓度在0.1⁸.0 mg/ml范围内与其同内标峰面积比值呈良好线性关系,精密度试验RSD均小于3%,稳定性试验RSD均小于4%,回收率在86.02%8.0 mg/ml范围内与其同内标峰面积比值呈良好线性关系,精密度试验RSD均小于3%,稳定性试验RSD均小于4%,回收率在86.02%⁹0.28%。葛根组与葛根丹参组AUC分别为(156.49±32.62)、(462.27±119.86)mg·min/L,cmax分别为1.426 5、1.986 2 mg/ml,t1/2kα分别为(9.62±1.59)、(10.07±2.11)min。结论:丹参与葛根配伍,可明显促进葛根素的体内吸收、分布,减缓其消除,促进葛根素在血液中的富集且能改善模型大鼠眼组织病变。丹参对葛根改善模型大鼠糖尿病眼病具有较好协同增效作用。     

HPLC法测定石见穿中丹酚酸B的含量

目的:建立测定石见穿中丹酚酸B含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Thermo C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(21∶79,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为286 nm,柱温为23℃。结果:丹酚酸B的进样量在0.153³.060μg范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<1%;平均加样回收率为97.70%,RSD=0.56%(n=6)。结论:该方法操作简便、准确可靠、重复性好,可作为石见穿药材的质量控制方法。     

肉眼和电镜观察聚-DL-乳酸可吸收生物膜联合丹参预防硬膜外粘连的效果

目的观察聚-DL-乳酸（PDLLA）可吸收生物膜联合丹参预防腰椎术后硬膜外粘连的效果。方法将60只新西兰白兔随机均分成5组,施以L5—L7全椎板切除术,A组放置明胶海绵片,B组明胶海绵片＋丹参注射液,C组PDLLA可吸收膜．D组明胶海绵片＋丹参注射液＋PDLLA可吸收膜,E组空白对照组不作特殊处理,于术后2周、4周、8周、12周分别行肉眼大体观察、电镜观察瘢痕生长及硬膜外粘连情况。结果B组、C组和D组有非常明显防粘连效果,与E组及A组之间存在显著性差异（P〈0．05）,虽然B组,C组和D组之间在防粘连效果方面无显著差异（P〉0．05）,但D组的防粘连效果更为突出,直到12周时电镜下成纤维细胞和胶原纤维仍呈现生长缓慢,排列紊乱和结构疏松的镜像。结论丹参＋PDLLA可吸收膜有很好的三维防粘连效果．可作为理想的预防硬膜外粘连材料。     

丹参注射液与尼莫地平联合用药治疗高血压脑出血的临床研究

目的：分析研究丹参注射液与尼莫地平联合用药治疗高血压脑出血的临床效果。方法60例高血压脑出血患者,随机分为试验组和对照组,每组30例,对对照组患者采取常规药物治疗方法;对试验组中患者在常规治疗基础上采取丹参注射液联合尼莫地平进行药物治疗,观察两组患者的临床效果,分析临床中应用丹参注射液与尼莫地平联合治疗高血压脑出血的效果。结果试验组总有效率为93.3%,对照组总有效率为56.7%,试验组患者临床治疗效果要优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论对于高血压脑出血患者进行治疗,采用丹参注射液与尼莫地平联合用药治疗,较常规药物治疗具有更好疗效,不仅能取得满意的临床疗效,使得患者的病情明显好转,还可以有效降低临床中患者并发症的发生,值得在实际临床治疗工作中推广。     

丹参晚期胚胎富集蛋白基因的克隆及表达模式分析

目的克隆丹参晚期胚胎富集蛋白(late embryogenesis abundant protein,LEA)基因,并进行生物信息学和表达模式分析。方法对丹参转录组数据库进行BLAST同源性比对,发现一条新的与LEA基因家族同源性较高的序列,命名为Sm LEA2,Gen Bank登录号为HQ676610。进一步利用PCR和RT-PCR技术从丹参g DNA以及c DNA水平克隆得到了Sm LEA2基因全长。采用软件分析蛋白质结构性质和系统进化关系。利用实时荧光定量PCR的方法对不同部位、不同发育时期以及不同处理丹参的Sm LEA2表达量进行检测。结果获得Sm LEA2 g DNA长1 961 bp,由1个外显子和1个内含子组成,并且内含子位于ATG的上游;开放阅读框长为960 bp,共编码319个氨基酸。生物信息学分析显示,Sm LEA2是存在于细胞质中的亲水蛋白,无跨膜结构域和信号肽,其相对分子质量为35 340,等电点为4.77。该基因在丹参的根、茎、叶中均有表达,并且在茎中的表达量最高。随着花的成熟和种子的发育,该基因表达量逐渐升高,并且该基因的表达受茉莉酸甲酯(Me JA)以及脱落酸(ABA)的诱导作用影响。结论克隆得到的丹参Sm LEA2可能参与种子发育过程,并在丹参防御反应中发挥作用。     

丹参对门脉高压血流动力学影响的实验与临床研究

为研究丹参对肝硬化门脉血流动力学的影响，利用血管插管测定用药前后胆管结扎肝硬化犬门脉系统压力变化，超声多普勒监测肝硬化患者用药后门静脉系统血流动力的改变。结果：（１）丹参静脉给药可使肝硬化犬门静脉压（ＰＰＶ）、嵌塞肝静脉压（ＷＨＶＰ）、肝静脉压力梯度（ＨＶＰＧ）显著降低（Ｐ＜０．０５～０．０１），而平均动脉压（ＭＡＰ）、心率（ＨＲ）无明显变化（Ｐ＞０．０５）；（２）丹参长期口服（１０～１２周），可显著降低肝硬化患者（Ｃｈｉｌｄ－ＰｕｇｈＡ、Ｂ级）门静脉内径（ＤＰＶ）、脾静脉内径（ＤＳＶ）、门静脉血流量（ＱＰＶ）、脾静脉血流量（ＱＳＶ）（Ｐ＜０．０５～０．０１），并对患者乏力、厌食、腹胀及肝功能（ＡＬＴ）具有部分改善作用，未见副作用。本研究表明，丹参为安全有效的降低门静脉压力药物，值得对其做进一步研究。     

丹参提取物改善大鼠重症急性胰腺炎肺损伤模型的ROS-NLRP3炎症小体信号通路机制

摘 要 目的：探讨活性氧簇（ROS） 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体信号通路在丹参提取物改善急性胰腺炎肺损伤大鼠的作用机制。 方法: 60只SD大鼠随机分组5组：假手术组、模型组、丹参提取物（1.5 g·kg-1）组、ROS抑制剂组[N 乙酰 L 半胱氨酸（NAC）,20 mg·kg-1]、丹参提取物+NAC组（1.5 g·kg-1＋20 mg·kg-1）,每组12只。以逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠（1 ml·kg-1）法建立急性胰腺炎肺损伤大鼠模型,各组灌胃给药,模型组和假手术组给予等量生理盐水,qd,持续5 d。处死大鼠,测量腹水量、右肺干质量、右肺湿质量,计算湿质量/干质量（W/D）比值,采用苏木精 伊红（HE）染色法对大鼠肺组织病理症状进行Holfbauer评分,以全自动血气分析检测仪检测动脉血中氧分压（PaO2）、二氧化碳分压（PaCO2）、氧合指数（OI）,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清肿瘤坏死因子 α（TNF α）、白介素 6（IL 6）水平,ROS检测试剂盒检测肺组织中ROS水平,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶 1（caspase 1）、凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）表达。 结果: 与假手术组比较,模型组大鼠腹水量、W/D比值、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达显著升高（P＜0.05）,PaO2、OI显著降低（P＜0.05）;与模型组比较,各药物处理组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达显著降低（P＜0.05）,PaO2、OI显著升高（P＜0.05）;与丹参提取物组及NAC组分别比较,丹参提取物+NAC组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达均显著降低（P＜0.05）,PaO2、OI显著升高（P＜0.05）。结论: 丹参提取物可以保护急性胰腺炎肺损伤大鼠的肺组织,可能通过下调ROS-NLRP3炎症小体信号实现。