热休克对肝癌细胞HSP70、gp96表达的影响及与细胞周期关系

与肿瘤免疫密切相关的热休克蛋白（HSPs）主要有HSP70和gp96。因可诱导特异性抗肿瘤反应成为近期热点，不断有临床治疗试验报道。目前HSPs作用精确分子机制还不明确；特别是gp96，除发现其“管家”作用。还发现它在先天和获得性免疫中发挥重要调节作用。我们在不同条件下对BeL-7402肝癌细胞株的HSP70、gp96进行单项及共同表达的研究，结合细胞周期进行分析，对于HSP70、gp96表达，两者表达关联性，及其表达与细胞周期的关系进行了探讨。     

医学论文中数字的表达

2 .2　必须使用汉字数字的有 :①定型的词、词组、成语、惯用语、缩略语或具有修辞色彩的词语中作为语素的数字 ,必须使用汉字 ,如 :十滴水、十二指肠、三级护理、四氧化三铁、二氧化碳、五四运动、六六六粉(有机磷农药 )、七上八下等。②时间的中国干支纪年和夏历月日 ,如 :丙寅年十月十五日、正月初五、腊月二十三日。③中国清代和清代以前的历史纪年、各民族的非公历纪年。此类纪年不应与公历月日混用 ,并应采用阿拉伯数字括注公历。如 :秦文公四十四年 (公元前 72 2年 )、清咸丰十年 (公元 186 0年 )。④概数和约数中相连的两个数字并列…     

Agilent 2100 Bioanalyzer在基因差异表达研究中的应用

目的观察Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(以下简称Bioanalyzer)在基因差异表达研究中的应用。方法应用限制性显示技术分别从正常和热休克处理后的酿酒酵母细胞中分离出cDNA片段,然后再用Bioanalyzer和传统的琼脂糖凝胶电泳技术对RD-PCR产物进行检测分析。结果Bioanalyzer能更快速、敏感地分离和显示差异表达的基因片段,并且通过对差异片段进行定量比较,发现了数个表达有明显差异的基因片段。结论Bioanalyzer在基因差异表达研究中具有重要的应用价值。     

胞嘧啶脱氨酶的原核表达和多克隆抗体的制备

目的：在原核系统中表达并纯化大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（cytosine deaminase,CD)，制备鼠抗大肠杆菌CD多克隆抗体，方法：亚克隆CD基因到原核表达载体pMAL-c2和pBV222中，并转化入大肠杆菌DH5α内，诱导表达并纯化MBP-CD和6his-CD融合蛋白，用纯化的MBP-CD融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。结果：通过重组质粒的酶切筛选出重组阳性克隆，成功地表达和纯化出MBP-CD和6his-CD融合蛋白，用纯化的MBP-CD成功制备了鼠抗CD多克隆抗体，并用6his-CD和GST-CD重组蛋白进行Western印迹分析，证实了抗体的正确性，结论：应用多克隆抗体可以检测体内外CD基因的表达，为临床前和临床上深入开展CD基因的生物治疗研究提供重要的实验材料。     

人胎盘基因表达谱芯片的初步研究

目的：制备人胎盘基因表达谱芯片，并用于基因差异表达分析。方法：用基因芯片点样仪将胎盘基因文库探讨打印在氨基包被的玻片上制备表达谱芯片。分别提取对照组与三氧化二砷处理的K562细胞总RNA，纯化mRNA后反转录成cDNA，再以限制性显示技术进行荧光标记，将两组荧光标记的样品混合后与芯片进行杂交，杂交后清洗芯片，干燥后对芯片进行扫描，分析杂交结果。结果：建立了较可靠的制备与检测基因表达谱芯片的方法，并筛选出45个差异表达基因片段，结论：制备的人胎盘基因表达谱芯片可有效地应用于基因的差异表达分析。     

谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建

通过 PCR获得 E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因 ( gsh I,gsh II)片段 ,结合定点突变稀有起始密码子 ,设定 gsh I与 gsh II位置与距离 ,构建双顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I- gsh II,建立GSHI、GSH- II蛋白表达体系。结果表明 :以 0 .0 8mmol/L IPTG于 2 8℃诱导工程菌 E.coli BL2 1( DE3) ( p Trc99A/gsh I- gsh II) ,GSH- I、GSH- II蛋白比为 4.5∶ 1 ( m∶ m)时谷胱甘肽合成能力最高 ,达到每克湿菌体 8.5 mg。通过构建单顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I、p Trc99A/gsh II测定GSH- I与 GSH- II蛋白的最适配比 ,结果表明 :在 GSH- I、GSH- II蛋白总量恒定的情况下 ,要提高谷胱甘肽产率 ,两者比例以 3∶ 1～ 6∶ 1为宜     

浅谈原核基因工程细胞内不溶性表达产物的下游处理

基因工程或基因重组技术,是将不同生物的基因在体外人工剪切,组合并和载体(质粒、噬菌体、病毒)DNA连接,然后转入微生物或细胞内进行扩增,并使转入的基因在细胞内表达,产生所需要的蛋白质.     

冠心病寒凝证的蛋白组学分析

寒证是八纲辨证的重要组成，寒凝证是冠心病的常见证型。冠心病寒凝证的形成，可能是多种致病因子通过各种途径影响机体细胞内某些基因转录和表达为蛋白质，有些蛋白质表达增多，有些蛋白质表达减少，有的蛋白质表达停止，有的正常情况下不表达的蛋白质被启动，等等，机体的代谢、体温调节、神经系统感觉、内分泌等各方面的生物学行为发生改变，在临床表现出寒凝证。温阳法可通过调节一种或多种蛋白的表达，调节上述生物学行为达到治疗冠心病寒凝证的目的。“阳微阴弦”是冠心病的一个重要病机，[第一段]