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以聚合酶链反应(PCR)法在mRNA水平检测T淋巴细胞受体α链可变区基因表达为例,介绍用~(32)P标记的人工合成寡核苷酸探针对PCR产物特异性作阳性证实的方法。该法以干琼脂糖凝胶作为支持物、相对较为简便和省财。用Ca探针以干凝胶作支持物的杂交结果,证实29个Vα基因的PCR扩增中物均为特异性的,放射自显影的带型与位置和溴乙锭染色所示完全吻合。 相似文献
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子宫内膜癌组织中p16 mRNA及P16蛋白的表达 总被引:7,自引:3,他引:4
①目的 探讨抑癌基因 p16与子宫内膜癌发生、发展的关系。 ②方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组织化学技术 ,对 4 2例子宫内膜癌及 15例正常子宫内膜组织中 p16mRNA及P16蛋白进行检测 ,并结合临床病理特征进行分析。③结果 子宫内膜癌组织中p16mRNA及P16蛋白的阳性表达率分别为6 9.0 5 %和 5 9.5 2 % ,显著低于正常组织 (χ2 =6 .0 15、8.6 2 5 ,P <0 .0 5 )。p16mRNA及P16蛋白的表达缺失与肿瘤的组织学类型无关 (χ2 =0 .10 0、0 .2 94 ,P >0 .0 5 ) ,而与组织学分级和临床分期有关 (χ2 =3.95 4、6 .873,P <0 .0 5 )。④结论 p16mRNA和P16蛋白的表达缺失在子宫内膜癌的发生和发展中可能起重要作用 相似文献
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目的 探讨脊麻药中复合微量芬太尼对牵拉反应的防治效果。方法 选择美国麻醉医师协会(american society of anesthesiologists,AsA)Ⅰ-Ⅱ级、足月、初产及单胎而需行剖宫产术的病人60例,随机分成2组,每组30例。2组病人的年龄、性剐、体重、局麻药用量、麻醉方法均无显著性差异,均选用腰硬联合麻醉(combined spinal—epidural anesthesia,CSEA)。A组:等比重0.5%罗哌卡因9-11mg+芬太尼10μg。B组:等比重0.5%罗哌卡因9-11mg。观察术中牵拉反应和生命体征并记录,进行统计学处理。结果 2组间麻醉前、后相对应的MAP(平均动脉压)、HR(心率)、RR(呼吸频率)和SpO2(血氧饱和度)变化均无显著性差异(JP〉0.05),2组间新生儿Apgar评分均无显著性差异(P〉0.05),比较2组术中的牵拉反应,A组明显优于B组,有显著性差异(P〈0.05)结论 脊麻药中加入微量芬太尼对牵拉反应有良好的防治效果。 相似文献
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血管紧张素对增生性瘢痕成纤维细胞纤维连接蛋白合成的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其Ⅰ型、Ⅱ型受体阻断剂和钙调神经磷酸激酶(CaN)的阻滞利环胞素A(CsA)对增生性瘢痕来源的成纤维细胞纤维连接蛋白mRNA和蛋白表达的作用。方法:体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞,分别将一定浓度的AngⅡ(10^-9~10^-5mmol/L),和AngⅡ10^-6mmol/L加上不同阻滞剂losartan、PD123319、环胞素A(浓度均为10^-5mmol/L)加入细胞培养液中刺激48h,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)及Westernblot印迹方法检测增生性瘢痕成纤维细胞纤维连接蛋白(FN)的mRNA及蛋白表达。结果:体外成功地培养增生性瘢痕成纤维细胞。经AngⅡ刺激48h后,FN mRNA和蛋白表达量明显增高,增高程度与AngⅡ浓度呈正比;加入losaartan和环胞素A后,FN原mRNA和蛋白表达量较单用AngⅡ组下降,而加入PD123319后,FNmRNA和蛋白表达量较单用AngⅡ组无明显改变。结论:AngⅡ可促增生性瘢痕成纤维细胞的FN合成,可能在增生性瘢痕的发展过程中起重要作用,该作用主要通过AngⅡ的Ⅰ型受体介导完成,该作用可能与CaN信号通路有关。 相似文献
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Survivin转录变异体在胃癌组织中的表达及其与预后的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究survivin各转录变异体在胃癌组织中的表达情况及与其预后的关系。方法采用实时荧光定量RT-PCR技术,对77例胃恶性肿瘤患者的肿瘤组织、正常胃黏膜的成对标本进行mRNA定量检测。结果在检测患者肿瘤组织中野生型survivin、survivin-2B与survivin-△Ex3的表达量均显著高于其对应正常胃黏膜组织中的表达量(P<0.01)。在胃癌组织中,survivin的表达率为100%(77/77),survivin-2B的表达率为79.8%(61/77),survivin-△Ex3的表达率为64.9%(50/77)。survivin高表达组患者的生存率明显低于低表达组(P<0.01)。结论Survivin的3个转录变异体中,野生型survivin对胃癌患者预后具有重要的评估价值。 相似文献
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INTRODUCTION Under physiological conditions, interferon-α (IFN-α) is a key cytokine produced by virtually all cells in the mammalian organism in response to a variety of bacterial and viral stimuli. In response to viral infection, IFN-α produced by the infected target cells induces a number of cellular genes involved in inhibition of viral replication. In addition, IFN-α is secreted by stimulated NK-cells and T-cells and exerts a multitude of immune stimulatory effects of innate a… 相似文献
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