Mangiferin exerts hepatoprotective activity against D-galactosamine induced acute toxicity and oxidative/nitrosative stress via Nrf2-NFκB pathways

Mangiferin, a xanthone glucoside, is well known to exhibit antioxidant, antiviral, antitumor, anti-inflammatory and gene-regulatory effects. In the present study, we isolated mangiferin from the bark of Mangifera indica and assessed its beneficial role in galactosamine (GAL) induced hepatic pathophysiology. GAL (400 mg/kg body weight) exposed hepatotoxic rats showed elevation in the activities of serum ALP, ALT, levels of triglycerides, total cholesterol, lipid-peroxidation and reduction in the levels of serum total proteins, albumin and cellular GSH. Besides, GAL exposure (5 mM) in hepatocytes induced apoptosis and necrosis, increased ROS and NO production. Signal transduction studies showed that GAL exposure significantly increased the nuclear translocation of NFκB and elevated iNOS protein expression. The same exposure also elevated TNF-α, IFN-γ, IL-1β, IL-6, IL-12, IL-18 and decreased IL-10 mRNA expressions. Furthermore, GAL also decreased the protein expression of Nrf2, NADPH:quinine oxidoreductase-1, heme oxygenase-1 and GSTα. However, mangiferin administration in GAL intoxicated rats or coincubation of hepatocytes with mangiferin significantly altered all these GAL-induced adverse effects. In conclusion, the hepatoprotective role of mangiferin was due to induction of antioxidant defense via the Nrf2 pathway and reduction of inflammation via NFκB inhibition.     

Mangiferin,a dietary xanthone protects against mercury‐induced toxicity in HepG2 cells

Mercury is one of the noxious heavy metal environmental toxicants and is a cause of concern for human exposure. Mangiferin (MGN), a glucosylxanthone found in Mangifera indica, reported to have a wide range of pharmacological properties. The objective of this study was to evaluate the cytoprotective potential of MGN, against mercury chloride (HgCl₂) induced toxicity in HepG2 cell line. The cytoprotective effect of MGN on HgCl₂ induced toxicity was assessed by colony formation assay, while antiapoptotic effect by fluorescence microscopy, flow cytometric DNA analysis, and DNA fragmentation pattern assays. Further, the cytoprotective effect of MGN against HgCl₂ toxicity was assessed by using biochemical parameters like reduced glutathione (GSH), glutathione‐S‐transferase (GST), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) by spectrophotometrically, mitochondrial membrane potential by flowcytometry and the changes in reactive oxygen species levels by DCFH‐DA spectrofluoremetric analysis. A significant increase in the surviving fraction was observed with 50 μM of MGN administered two hours prior to various concentrations of HgCl₂. Further, pretreatment of MGN significantly decreased the percentage of HgCl₂ induced apoptotic cells. Similarly, the levels of ROS generated by the HgCl₂ treatment were inhibited significantly (P < 0.01) by MGN. MGN also significantly (P < 0.01) inhibited the HgCl₂ induced decrease in GSH, GST, SOD, and CAT levels at all the post incubation intervals. Our study demonstrated the cytoprotective potential of MGN, which may be attributed to quenching of the ROS generated in the cells due to oxidative stress induced by HgCl₂, restoration of mitochondrial membrane potential and normalization of cellular antioxidant levels. © 2010 Wiley Periodicals, Inc. Environ Toxicol, 2012.     

3个芒果苷酰化衍生物的化学合成及抗炎作用研究

目的:将芒果苷分子上的一部分羟基进行酰化衍生,以提高化合物的脂溶性;然后比较芒果苷及其酰化衍生物的抗炎活性。方法:将芒果苷分别与乙酸酐、丙酸酐和丁酸酐反应,反应产物用硅胶柱层析分离出化合物单体,用波谱解析化合物的化学结构。雄性小鼠随机分为空白对照组,地塞米松阳性药组(0.115 mmol.kg-1),芒果苷高、中、低剂量组(1.0,0.5,0.25 mmol.kg-1)和酰化衍生物[乙酰化反应产物(PAM),丙酰化反应产物(HPM),丁酰化反应产物(HBM)]各高、中、低剂量组(0.25,0.125,0.063 mmol.kg-1),每组10只。各组连续经口给药5 d。末次给药45 min后,尾静脉注射伊文思蓝,右耳滴二甲苯致炎,腹腔注射冰醋酸。15 min后处死小鼠,用打孔器沿左、右耳廓相同部位打下两侧耳片,分别称重,计算耳廓肿胀度;另用生理盐水腹腔注射进行清洗,收集腹腔液测定吸光度(A),用以评价腹腔毛细血管通透性。结果:得到3个新结构化合物:(a)7,2’,3’,4’,6’-五乙酰化芒果苷衍生物(PAM),(b)3,6,7,2’,3’,4’,6’-七丙酰化芒果苷衍生物(HPM)和(c)3,6,7,2’,3’,4’-六丁酰化芒果苷衍生物(HBM)。与空白对照组比较,芒果苷高、中剂量组、PAM高、中剂量组、HPM高、中、低剂量组和HBM高、中、低剂量组均能显著抑制小鼠耳廓肿胀(P<0.05),并能显著抑制毛细血管的通透性,减少腹腔液渗出(P<0.01或P<0.05),显示出显著的抗炎作用,并呈现一定的结构-效应关系。结论:PAM,HPM和HBM为首次报道的新结构化合物;芒果苷酰化衍生物只需相当于芒果苷1/4的摩尔剂量,即可显示出与芒果苷相似的抗炎作用,说明其抗炎作用的效价强度高于芒果苷,提示其抗炎活性比芒果苷强。     

芒果苷对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响

目的研究芒果苷对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响,为深入研究芒果苷抗肿瘤机制提供试验基础。方法 0、50、100、150、200、250μmol.L-1芒果苷处理肺癌A549细胞24或48 h后,采用四甲基偶氮噻蓝法检测芒果苷对A549细胞增殖的影响;采用流式细胞仪AnnexinV-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测芒果苷作用后细胞凋亡情况;荧光显微镜观察芒果苷作用后细胞形态变化。结果随着芒果苷浓度的增加和作用时间的延长,对A549细胞的增殖抑制作用增加,呈现明显的时间-剂量效应关系;流式细胞检测细胞凋亡分析表明,随着芒果苷浓度的增高,A549细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均逐渐增加,与0μmol.L-1组比较差异有统计学意义(P<0.05);荧光电子显微镜观察芒果苷作用后的细胞中可见核固缩、核碎裂等典型的凋亡改变。结论芒果苷在体外能有效抑制肺癌细胞生长,其机制与其诱导肺癌细胞凋亡有关。     

壮药扁桃叶的质量标准研究

目的: 制定扁桃叶药材的质量标准,为该药用植物资源的开发利用提供科学依据。 方法: 根据2010年版《中国药典》方法,鉴别扁桃叶药材的性状、显微特征;检查水分、总灰分、酸不溶灰分;采用薄层色谱(TLC)法进行定性鉴别;采用高效液相法测定芒果苷的含量。 结果: 对扁桃叶药材的性状、显微特征进行了描述;根据10个不同产地扁桃叶测定结果,确定水分不得过12%,总灰分不得过16%,酸不溶灰分不得超过5%。浸出物以稀乙醇为溶剂,热浸法测定,浸出物不得少于23%。TLC斑点清晰,分离度好;芒果苷的进样量在0.4~1.4 μg(r=0.999 9)与峰面积积分值呈良好线性关系,平均回收率为100.45%,RSD 1.59(n=10),芒果苷含量不得少于2%。 结论: 所建标准可用于扁桃叶药材的质量控制。     

川西獐芽菜化学成分研究

目的 研究川西獐牙菜Swertia mussotii的化学成分.方法 采用柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱解析鉴定化合物结构.结果 从川西獐牙菜75％乙醇提取物中分离得到19个化合物,分别鉴定为1-羟基-3,4,7,8-四甲氧基呫吨酮(1)、1,7-二羟基-3-甲氧基呫吨酮(2)、1,3,7-三羟基呫吨酮(3)、1,3,7,8-四羟基呫吨酮(4)、1,3,8-三羟基-7-甲氧基呫吨酮(5)、1,3-二羟基-7,8-二甲氧基呫吨酮(6)、1,5,8-三羟基-3,4-二甲氧基呫吨酮(7)、1-羟基-3,4,5,8-四甲氧基呫吨酮(8)、1-羟基-3,5,8-三甲氧基呫吨酮(9)、(S)-(+)-龙胆内酯(10a)、(R)-(-)-龙胆内酯(10b)、1,8-二羟基-3,7-二甲氧基呫吨酮(11)、1-羟基-3,7,8-三甲氧基呫吨酮(12)、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基呫吨酮(13)、1,7,8-三羟基-3-甲氧基呫吨酮(14)、1,3,5,8-四羟基呫吨酮(15)、1,7-二羟基-3,4,8-三甲氧基呫吨酮(16),芒果苷(17)、齐墩果酸(18).结论 化合物1～9均为首次从该种植物中分离得到,化合物10a和10b为首次从獐牙菜属植物中分离得到.     

藏药川西獐牙菜的质量标准研究

目的:建立川西獐牙莱药材的质量标准.方法:采用薄层色谱法对川西獐牙菜药材进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定主要活性成分獐牙莱苦苷、芒果苷、当药醇苷和齐墩果酸的含量.色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm,5μm),检测獐芽菜苦苷、芒果苷和当药醇苷的流动相甲醇-0.02％磷酸水(45:55),检测波长254 nm,检测齐墩果酸的流动相乙腈-甲醇-0.2％冰醋酸水(65:15:20),检测波长210 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果:川西獐牙菜药材的薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;獐牙菜苦苷、芒果苷、当药醇苷和齐墩果酸的HPLC含量测定线性范围分别为0.075～0.75μg(r=0.999 9),0.05 ～0.5 μg(r=0.999 7),0.032～0.32 μg(r=0.999 3),0.116～11.6 μg(r=0.999 4),平均回收率分别为98.91％ (RSD 0.77％),99.61％ (RSD1.38％),100.35％ (RSD 0.69％),99.26％(RSD 0.40％),并根据10批药材中相应成分的含量初步制定了其含量限度.结论:川西獐牙菜定性定量测定方法简单准确,能够为川西獐牙菜药材的质量控制提供有效依据.     

HPLC测定天山花楸叶提取物中6种黄酮成分

目的：建立抱茎獐牙菜质量标准中合适的含量测定方法。方法：采用HPLC同时测定抱茎獐牙菜中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、獐牙菜苷、齐墩果酸的含量。以甲醇-0.02%磷酸为流动相,梯度洗脱,资生堂 UG120 C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,柱温25 ℃,流速1.0 mL·min^-1,检测波长243 nm。结果：獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷分别在1.50~18.04,0.37~4.49,0.06~0.70 μg线性关系良好,r均为1.000 0。平均加样回收率分别为96.3%,99.0%,101.0%。结论：獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷3种成分在抱茎獐牙菜中的分离度良好,检出量合适。选定的方法重复好,结果准确,可作为抱茎獐牙菜质量标准中含量测定的方法,并为区别其他獐牙菜,合理利用开发抱茎獐牙菜资源提供重要参考。     

高效液相色谱法同时测定白虎加桂枝汤中5个有效指标性成分的含量

摘 要：目的：建立白虎加桂枝汤中芒果苷、新芒果苷、甘草酸、甘草苷、肉桂酸5个有效指标性成分的含量测定方法,为白虎加桂枝汤的颗粒研发奠定基础。方法：采用HPLC-PDA双波长同时测定,Waters xBridge BEH C18（4.6 mm×250 μm,5 μm）色谱柱,流动相乙腈-0.01%甲酸水,梯度洗脱,流速1 mL?min-1,柱温30℃,检测波长255 nm、280 nm。结果：70 min内芒果苷、新芒果苷、甘草酸、甘草苷、肉桂酸线性范围分别为66-1976 μg（r=0.999 3）,70-3487 μg（r=0.999 7）,30-913 μg（r=0.999 5）,35-1734 μg（r=0.999 5）,0.6-187 μg（r=0.999 8）,加样回收率平均范围95.29%-100.17%。结论：建立了白虎加桂枝汤中5个有效指标性成分的含量测定方法,该方法简捷、稳定、准确,可为白虎加桂枝汤及其复方颗粒研制的质量控制提供评价方法。     

芒果叶水煎液、去芒果苷芒果叶水煎液及芒果苷祛痰镇咳药效比较的实验研究

目的:比较芒果叶水煎液、去芒果苷芒果叶水煎液和芒果苷镇咳祛痰的药理作用.方法:分别采用浓氨水诱咳法、二氧化硫诱咳法、酚红排泌法观察三种药物的镇咳以及祛痰作用.结果:三种药物的高、中剂量均能极显著地抑制浓氨水及二氧化硫所致小鼠咳嗽次数,延长小鼠咳嗽的潜伏期:三种药物均具有祛痰作用,以芒果苷高剂量组尤为显著.结论:三种药物均具有镇咳祛痰作用,芒果苷高剂量组效果最好.