基于UPLC指纹图谱结合化学计量学评价不同产地盾叶薯蓣药材质量

目的建立盾叶薯蓣Dioscorea zingiberensis的UPLC指纹图谱,分析不同产地盾叶薯蓣质量特征的共有性和差异性,为盾叶薯蓣药材的质量评价提供科学依据。方法采用色谱柱Infinity Lab Poroshell 120 EC-C_(18)(150mm×2.1mm,2.7μm),以乙腈(B)-水(A)为流动相梯度洗脱,体积流量0.3mL/min,检测波长203nm,柱温30℃,建立65批不同产地盾叶薯蓣药材的UPLC指纹图谱;利用SPSS19.0和SIMCA14.1软件对不同产地的盾叶薯蓣药材进行质量评价及差异性分析。结果盾叶薯蓣药材UPLC指纹图谱共标定31个共有峰,指认出的5种皂苷类成分和其他未知成分均作为主要信息参与了盾叶薯蓣的质量表达,主成分载荷值的综合得分表明不同产地盾叶薯蓣药材的综合质量差异较大,主成分分析(PCA)结果显示不同产地盾叶薯蓣的化学质量特征存在差异,且各自聚为一类,其中湖北丹江口地区盾叶薯蓣与其他产地样品均存在较大差异;偏最小二乘法分析(PLS-DA)模型筛选出的5、28、11、12、29、18、16、31、13号色谱峰所代表的成分是造成盾叶薯蓣样品间差异的主要标志性物质,其中28、29号峰分别为盾叶新苷和三角叶薯蓣皂苷。结论本研究建立的盾叶薯蓣UPLC指纹图谱可以较为全面地表征其化学质量特征,指纹图谱的化学计量学分析结果为盾叶薯蓣质量标志物的筛选及质量标准的制定提供科学依据。     

基于UPLC特征图谱和Q-Marker量值传递评价经典名方半夏白术天麻汤颗粒剂的关键生产工艺

目的 基于特征图谱相关性和质量标志物（quality markers,Q-Marker）转移率评价半夏白术天麻汤（Banxia Baizhu Tianma Decoction,BBTD）颗粒剂的生产环节,明确关键控制点。方法 采用Acclaim^TM RSLC Lot Validation-120 C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,2.2 μm）进行分离,流动相为乙腈-水溶液,梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,检测波长235 nm,柱温30℃。以BBTD基准样品为参比,建立3批中试样品的UPLC指纹图谱,并进行相似度评价,分析Q-Marker在各生产环节的损失,评价生产工艺的合理性。结果 与BBTD基准样品相比,提取液、浓缩液、干膏粉、颗粒剂中均存在对应特征峰,以10种指标性成分及其总量表征的3批BBTD中试样品关键质量属性与其基准样品基本保持一致。结论 基于特征图谱和Q-Marker在各环节之间的量值传递,为经典名方BBTD制备工艺评价和质量控制提供了的理论依据。     

UPLC同时测定复方守宫散中核苷类含量

目的 建立UPLC法同时测定复方守宫散中腺嘌呤、腺苷含量的方法。方法 用Acquity BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速0.25ml/min,柱温26℃,检测波长254nm。结果 腺嘌呤、腺苷的进样量分别在0.0409~0.5115μg(r=0.9999)、0.0578~0.7220μg(r=0.9996)范围内与其峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为92.83%、94.90%,RSD分别为1.11%、1.70%。结论 该方法快速、可靠、准确,可作为复方守宫散的质量控制方法。     

UPLC法测定氨苄西林有关物质

目的建立超高效液相色谱检测氨苄西林有关物质的方法。方法采用Acquity UPLC HSS C18色谱柱,以含有冰醋酸、磷酸二氢钾水溶液和乙腈的不同比例的混合液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为35℃,进样量为5μL。结果氨苄西林在0.272 1³2.652μg·mL-1范围内r≥0.9999;该方法专属性,重复性,耐用性,溶液稳定性良好。各组分间相互无干扰,与HPLC具有同等的检测能力。结论该方法专属性强,灵敏度高,效率较高,可作为氨苄西林有关物质的检测有效方法。     

UPLC法同时测定盐酸阿糖胞苷原料药的含量和有关物质

目的:建立同时测定盐酸阿糖胞苷原料药的含量和有关物质的方法。方法:采用超高效液相色谱法。色谱柱为Inertsil ODS-3 C18,流动相为磷酸盐缓冲液-甲醇(梯度洗脱),流速为0.8 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为40Ⅴ,进样量为10μl。结果:尿嘧啶、尿苷、阿糖尿苷、盐酸阿糖胞苷检测质量浓度分别在0.100 8²0.16、0.120.16、0.1²0.12、0.095 620.12、0.095 6¹9.12、0.119.12、0.1²0.004μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9、0.999 8、0.999 9、0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤0.79%;尿嘧啶、尿苷、阿糖尿苷平均加样回收率为103.8%、102.2%、99.7%,RSD分别为2.44%、2.69%、3.16%(n=9)。结论:该方法准确、灵敏度高、专属性强、重复性好,可用于盐酸阿糖胞苷原料药的质量控制。     

芪归糖痛宁颗粒的UPLC指纹图谱研究

目的:建立芪归糖痛宁颗粒的UPLC指纹图谱。方法:色谱柱为Acquity BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液(梯度洗脱),柱温为26Ⅰ,流速为0.25 ml/min,检测波长为254 nm。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004A版)对10批样品的相似度进行评价。结果:芪归糖痛宁颗粒的UPLC指纹图谱共有13个共有峰,方法测定的重复性、精密度和稳定性良好;10批样品的相似度均>0.99。结论:所建指纹图谱可用于芪归糖痛宁颗粒的质量控制。     

UPLC法测定养血清脑颗粒中咖啡酸和阿魏酸的含量

目的建立同时测定养血清脑颗粒中咖啡酸和阿魏酸含量的方法。方法采用ACQUITY UPLC系统,使用ACQUITY BEH C18（2.1mm×100mm,1.7μm）色谱柱,流动相为0.1%乙酸水溶液-甲醇,梯度洗脱,流速0.4m L·min^-1,检测波长325nm,柱温为40℃。结果咖啡酸质量浓度在0.484~24.20ng·m L^-1内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9996）,平均回收率为101.7%（RSD=1.64%,n=6）;阿魏酸质量浓度在1.102~55.10ng·m L^-1内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9997）,平均回收率为100.1%（RSD=1.83%,n=6）。结论建立的方法简便、准确、重复性好,可用于养血清脑颗粒的质量控制,且不同批次养血清脑颗粒中2种酚酸含量基本一致。     

超高效液相色谱法测定热炎宁颗粒中大黄素、咖啡酸、绿原酸、野黄芩苷、木犀草素和虎杖苷

目的：建立超高效液相色谱（UPLC）同时测定热炎宁颗粒中大黄素、咖啡酸、绿原酸、野黄芩苷、木犀草素、虎杖苷6种成分的方法。方法采用UPLC法,Acquity UPLC HSS C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）;流动相为[甲醇–乙腈（35∶65）]–0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.5 mL/min,分段变波长测定,柱温35℃;进样量1.0μL。结果6种成分在选定的范围内线性关系良好（r≥0.9993）;平均加样回收率在99.08%～102.31%,RSD值均小于2.53%（n=6）。结论采用UPLC法对热炎宁颗粒中大黄素、咖啡酸、绿原酸、野黄芩苷、木犀草素、虎杖苷6种成分进行测定,方法操作快速,高效,准确,可用于热炎宁颗粒的质量控制。     

淫羊藿中化学成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的建立淫羊藿Epimedium brevicornu中化学成分的超高压液相色谱–飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF-MS)的分析方法。方法 Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液–乙腈,梯度洗脱;体积流量为0.4 mL/min;柱温为45℃;进样量为2μL。质谱检测采用正、负离子模式,电压分别为3.0、2.5 kV;离子源温度110℃;雾化温度400℃;雾化气体积流量800 L/h。结果在10 min内完成淫羊藿中40个化学成分的鉴定。结论建立了一种简单、快速、高效的UPLC/Q-TOF-MS方法对淫羊藿中化学成分进行了鉴定,为全面控制淫羊藿的质量和机理研究提供了基础。     

Metabolic profiling of isomeric aglycones central‐icaritin (c‐IT) and icaritin (IT) in osteoporotic rats by UPLC‐QTOF‐MS

The isomers, although of similarly chemical structures, have different pharmacological activities due to their metabolic processes in vivo. Central‐icaritin (c‐IT) and icaritin (IT) are isomers and major bioactive aglycones of the Herba Epimedii. In this study, we found that the anti‐osteoporotic effect of c‐IT was stronger than IT on bone structural changes in osteoporotic rats evaluated by Micro‐μCT with the parameters of bone mineral density (BMD), bone mineral content (BMC), tissue mineral content (TMC), and tissue mineral density (TMD). c‐IT treatment significantly increased the bone microarchitecture, compared with IT (p < 0.05). In order to explain their differences in anti‐osteoporosis, the metabolic profiling and pathways of c‐IT and IT in the plasma, bile, urine, and faeces of ovariectomized (OVX) rats were investigated by ultra‐performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrometry (UPLC‐QTOF‐MS) after oral administration of c‐IT or IT (80 mg/kg). Finally, 59 metabolites of c‐IT and 43 metabolites of IT were identified by elucidating their corresponding quasimolecular ions and fragment ions. IT could be quickly absorbed into blood and reached a maximum plasma concentration, and then be rapidly conversed to its glucuronidation metabolites, most of which were excreted out by urine. Interestingly, the absorbed and conjugated speeds of c‐IT were slower than IT. The metabolic processes of c‐IT existed enterohepatic circulation, which decreased the metabolism and excretion rate of c‐IT, and prolonged the anti‐osteoporosis effect. Our findings provided evidence on the difference on metabolic profiles of c‐IT and IT in osteoporotic rats, which might shed new lights on improving anti‐osteoporotic effects of IT and c‐IT. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.