寒冷气候对正常妊娠和子痫前期胎盘ACE mRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨寒冷气候对正常妊娠和子痫前期孕妇胎盘血管紧张素转换酶(ACE) mRNA及蛋白表达的影响;方法:选取2009年9月～2010年5月在该院住院的正常孕妇40例和子痫前期孕妇80例,按照传统节气分为冬季型气候组和过渡季型气候组,各组又分别分为正常妊娠组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组.采用半定量RT-PCR及蛋白免疫印迹(Westem-blot)法检测两组孕妇胎盘ACE mRNA及蛋白表达.结果:同季节型中各组胎盘ACE mRNA及蛋白表达量随病情加重呈上升趋势,正常妊娠组＜轻度子痫前期组＜重度子痫前期组,差异均有统计学意义(P＜0.05);冬季型正常妊娠组胎盘ACEmRNA及蛋白表达水平与过渡季型气候正常妊娠组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);冬季型轻度子痫前期组胎盘ACE mRNA表达高于过渡季型轻度子痫前期组,差异有统计学意义(P＜0.01);冬季型轻度子痫前期组胎盘ACE蛋白表达高于过渡季型轻度子痫前期组,但差异无统计学意义(P＞0.05);冬季型重度子痫前期组胎盘ACE mRNA及蛋白表达高于过渡季型重度子痫前期组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:寒冷刺激会影响胎盘ACE mRNA及蛋白的表达,使胎盘肾素-血管紧张素系统(RAS)调节异常,从而进一步加重子痫前期的病情,这提示外界不良的气候条件是引发以及加重子痫前期病情的一个重要影响因素,其具体的影响机制还有待于进一步研究.     

子痫前期产妇血清MMP2、MMP9含量检测及胎盘床血流动力学异常情况评估

目的:研究子痫前期产妇血清基质金属蛋白酶2、9(MMP2、MMP9)含量及胎盘床血流动力学异常情况.方法:将2011年3月～2013年8月期间在我院确诊的子痫前期产妇50例纳入研究的观察组,同期在我院进行产前检查和分娩的正常妊娠产妇50例纳入研究的对照组,采用酶联免疫吸附法检测血清中MMPs的蛋白含量,采用Western-blot的方法检测胎盘组织中MMPs的蛋白含量;采用彩色多普勒超声检测胎盘床的血流动力学.结果:两组产妇血清中和胎盘组织中MMP1、MMP3的蛋白含量无差异;观察组产妇血清中和胎盘组织中MMP2、MMP9的蛋白含量均低于对照组(P＜0.05);观察组产妇胎盘床血管的搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩期最大速度与舒张末期速度比值(S/D)高于对照组,时间平均流速(TAV)低于对照组(P＜0.05).结论:子痫前期产妇胎盘组织和血清中MMP2、MMP9含量异常降低,胎盘床血流阻力增大、灌注量减少.     

妊娠期高血压疾病对胎龄28~34周早产儿外周静脉血细胞计数的影响

目的 探讨母亲妊娠期高血压疾病（hypertensive disorders of pregnancy,HDP）对胎龄28~34周早产儿外周静脉血细胞计数的影响。 方法 选取2020年1~12月昆明医科大学第一附属医院儿科收治的母亲合并HDP的胎龄28~34周早产儿227例为研究组,另选取同期收治的母亲无HDP的胎龄28~34周早产儿227例为对照组。研究组根据母亲妊娠期血压分为妊娠期高血压亚组（75例）、轻度子痫前期亚组（81例）、重度子痫前期亚组（71例）;根据早产儿出生体重分为小于胎龄儿（small for gestational age,SGA）亚组（113例）及适于胎龄儿（appropriate for gestational age,AGA）亚组（114例）。比较研究组和对照组、研究组各亚组间早产儿生后第1天外周血细胞计数的差异。 结果 研究组患儿生后第1天外周静脉血白细胞（white blood cell,WBC）计数、中性粒细胞绝对计数（absolute neutrophil count,ANC）及血小板（platelet,PLT）计数均低于对照组（P<0.05）,白细胞减少症、中性粒细胞减少症发生率高于对照组（P<0.05）。亚组分析中,轻度子痫前期亚组、重度子痫前期亚组WBC计数、ANC、PLT计数均低于妊娠期高血压亚组（P<0.05）;SGA亚组WBC计数、ANC、PLT计数低于AGA亚组（P<0.05）。 结论 HDP可对早产儿外周静脉血细胞计数产生影响,这一影响在母亲子痫前期及SGA早产儿中更为显著。     

联合检测胎儿血红蛋白、α1微球蛋白、sFlt-1及PIGF对子痫前期的诊断价值

目的探查孕妇外周血清胎儿血红蛋白（HBF）、α1-微球蛋白（A1M）、可溶性血管内皮生长因子受体-1（snt-1）、胎盘生长因子（P1GF）以及尿液中α1-微球蛋白（u—A1M）在正常妊娠组和子痫前期（PE）组的表达差异,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测23例正常妊娠孕妇、50例子痫前期孕妇（N轻度=20例、N重度=30例）外周血清中HBF、A1M、sFlt-1、P1GF以及尿液A1M水平,计算sFlt—1／P1GF比值,应用logistic回归和接受者工作特征曲线（ROC曲线）评价指标单独及联合应用对子痫前期的诊断价值。结果子痫前期组血清HBF、AIM、sFlt-1、sFlt-1／P1GF比值以及尿液A1M水平均高于正常妊娠组（P〈0．05）,子痫前期组PlGF水平低于正常妊娠组（P〈0．05）。血清HBF、A1M、sFlt-1、P1GF、sFlt-1／P1GF比值以及尿液A1M的ROC曲线下面积（AUC）依次为：0．794,0．805,0．690,0．754,0．801,0．648。指标联合后AUC增大,敏感度和特异度更佳。结论HBF、A1M、sFlt—1、P1GF可能参与了子痈前期的发病机制,联合检测可以提高子痫前期的诊断价值。     

雷公藤红素通过抑制MMP-9/sFlt-1/TNF-α减轻子痫前期模型大鼠症状的作用研究

目的:探讨雷公藤红素通过抑制金属基质酶-9/可溶性FMS样酪氨酸激酶-1/肿瘤坏死因子α(MMP-9/sFlt-1/TNF-α)减轻子痫前期模型大鼠症状的作用机制。方法:72只怀孕未经产的雌性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、硫酸镁组(30mg·kg^-1)、雷公藤红素低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1),每组12只。除正常对照组外,其余各组采用N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐诱导子痫前期模型,建模成功后各给药组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型组给予等体积生理盐水。于妊娠期(第9天)测定大鼠24 h尿蛋白、血压、尿素氮(BUN),实时荧光逆转录法(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹法(West blot)测定胎盘组织MMP-9 mRNA和蛋白水平,酶联免疫吸附法(ELISA)法测定sFlt-1、白细胞介素-4(IL-4)、TNF-α蛋白表达水平。结果:与模型组比较,硫酸镁组、雷公藤红素各剂量组收缩压、舒张压、24 h尿蛋白、BUN水平、MMP-9 mRNA和蛋白、sFlt-1、IL-4、TNF-α蛋白表达水平明显降低(P<0.05),且雷公藤红素各组呈剂量相关性(P<0.05);与硫酸镁组相比,雷公藤红素低、中剂量组以上各指标均明显升高(P<0.05)。结论:雷公藤红素能明显降低子痫前期模型大鼠血压、尿蛋白、BUN水平,缓解子痫前期症状,其机制可能与雷公藤红素通过抑制胎盘组织中MMP-9 mRNA和蛋白表达水平进而降低sFlt-1、IL-4、TNF-α蛋白表达有关。     

Differences in Liver Injury and Trophoblastic Mitochondrial Damage in Different Preeclampsia-like Mouse Models

Background:

Preeclampsia is a multifactorial disease during pregnancy. Dysregulated lipid metabolism may be related to some preeclampsia. We investigated the relationship between triglycerides (TGs) and liver injury in different preeclampsia-like mouse models and their potential common pathways.

Methods:

Preeclampsia-like models (Nw-nitro-L-arginine-methyl ester [L-NAME], lipopolysaccharide [LPS], apolipoprotein C-III [Apo] transgnic mice + L-NAME, β2 glycoprotein I [βGPI]) were used in four experimental groups: L-NAME (LN), LPS, Apo-LN and βGPI, respectively, and controls received saline (LN-C, LPS-C, Apo-C, βGPI-C). The first three models were established in preimplantation (PI), early-, mid- and late-gestation (EG, MG and LG). βGPI and controls were injected before implantation. Mean arterial pressure (MAP), 24-hour urine protein, placental and fetal weight, serum TGs, total cholesterol (TC) and pathologic liver and trophocyte changes were assessed.

Results:

MAP and proteinuria were significantly increased in the experimental groups. Placenta and fetal weight in PI, EP and MP subgroups were significantly lower than LP. Serum TGs significantly increased in most groups but controls. TC was not different between experimental and control groups. Spotty hepatic cell necrosis was observed in PI, EG, MG in LN, Apo-LN and βGPI, but no morphologic changes were observed in the LPS group. Similar trophoblastic mitochondrial damage was observed in every experimental group.

Conclusions:

Earlier preeclampsia onset causes a higher MAP and urine protein level, and more severe placental and fetal damage. Preeclampsia-like models generated by varied means lead to different changes in lipid metabolism and associated with liver injury. Trophoblastic mitochondrial damage may be the common terminal pathway in different preeclampsia-like models.     

长链脂肪酸氧化酶在妊娠中期子痫前期样母鼠和胎鼠组织中的表达

目的 探讨长链脂肪酸氧化酶LCHAD在妊娠中期子痫前期样改变母鼠和胎鼠组织中的蛋白表达及分布.方法 将C57BL/6J孕鼠于孕1id皮下注射一氧化氮合酶抑制剂建立子痫前期样模型,同时设立注射生理盐水的正常妊娠对照组,模型鉴定成功后,于孕14 d进行标本取材.采用免疫组化方法检测母鼠及胎鼠组织中LCHAD蛋白的分布和表达状况.结果 孕14 d实验组平均动脉压(115.6±3.3)mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)和尿蛋白(97.0±4.3)μg·g体质量-1·24h-1较对照组平均动脉压(96.2±4.9)mmHg和尿蛋白(60.8 ±4.9) μg·g体质量-1·24 h-1显著升高(P＜0.05).在两组动物中均可见到母鼠肝、肾、心、胎盘组织中LCHAD蛋白呈阳性表达,实验组母体肝、胎盘LCHAD的IA值强度较对照组明显降低(P＜0.05).胎鼠的肝、肾、心、肺和神经视网膜组织中,两组均有LCHAD表达,但IA值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠中期LCHAD蛋白在母鼠和胎鼠重要器官均广泛表达分布,在妊娠期LCHAD与母体能量代谢、胎盘的发育及胎儿生长发育有关;子痫前期样改变时母体肝脏和胎盘的LCHAD表达存在异常.     

AKR1C3对子痫前期大鼠肾损伤的影响

目的 探讨AKR1C3对子痫前期大鼠肾脏损伤的影响及其可能的作用机制.方法 通过腹腔注射亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)建立大鼠子痫前期的模型,治疗组同时采用灌胃的方法口服格列苯脲.40只Wistar雌鼠随机分为子痫前期组(孕鼠+L-NAME)、治疗组(孕鼠+L-NAME+格列苯脲)、未孕组(L-NAME)、对照组(孕鼠+生理盐水),每组10只.通过测血压、24 h尿蛋白和透射电镜观察肾脏结构确认子痫前期大鼠造模成功,采用RT-PCR、免疫印迹检测大鼠肾脏AKR1C3蛋白及mRNA含量,Elisa方法检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的浓度.结果 造模前各组大鼠的血压值差异无统计学意义;造模后子痫前期组血压明显高于对照组与治疗组[(143.83±9.62)比(120.83±4.31)及(129.43±14.41) mmHg,均P＜0.05].造模前各组大鼠的24 h尿蛋白含量无差异;造模后子痫前期组的24h尿蛋白含量明显高于对照组与治疗组.子痫前期组大鼠肾脏中AKR1 C3蛋白及mRNA表达水平明显低于对照组[(0.48±0.09)比(0.98 ±0.27)、(0.05 ±0.02)比(0.87±0.45),均P＜0.05].与子痫前期组相比,治疗组AKR1 C3蛋白及mRNA表达水平升高[(0.48±0.09)比(1.05±0.20)、(0.05±0.02)比(0.22 ±0.06),均P＜0.05].与对照组相比子痫前期组SOD、CAT、GSH-Px的浓度明显降低,MDA的浓度升高;与子痫前期组相比,治疗组SOD、CAT、GSH-Px的浓度升高,MDA的浓度降低.结论 AKR1C3在子痫前期大鼠肾脏中表达降低,其作用途径可能与氧化应激有关.格列苯脲对子痫前期的治疗有一定的疗效.     

子痫前期患者血清中 sEng，LXRα的表达及意义

目的：通过研究子痫前期患者血清中可溶性Endoglin（ sEng）、肝X受体α（ LXRα）的表达,探讨这两个因子与子痫前期发生、发展的关系。方法从收住院的子痫前期患者中选出满足研究条件的患者65例,其中轻度子痫前期35例,重度子痫前期30例,同期正常孕妇30例（对照组）。采用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测血清中sEng和LXRα的表达水平,并对其进行相关性分析。结果轻度子痫前期组、重度子痫前期组血清中sEng水平分别为（9．49±1．50）μg／L,（20．44±6．44）μg／L,高于对照组sEng水平（2．41±0．46）μg／L,两组比较,P＜0．05;重度子痫前期组sEng水平高于轻度子痫前期组（P＜0．05）;轻度子痫前期组、重度子痫前期组血清中LXRα水平分别为（4．48±0．92）mg／L,（6．05±3．12）mg／L,高于对照组LXRα水平（2．79±0．87）mg／L,两组比较,P＜0．05;重度子痫前期组高于轻度子痫前期组（P＜0．05）;轻度、重度子痫前期患者血清中sEng水平与LXRα水平呈正相关（P＜0．05）。结论子痫前期患者血清中sEng含量、LXRα含量较正常妊娠孕妇增高,sEng,LXRα可能与子痫前期的发生有关;血清中sEng,LXRα可能参与了子痫前期的发展;子痫前期组血清中sEng,LXRα表达水平呈正相关,两者共同作用可能参与了子痫前期的发生、发展过程;血清中sEng,LXRα水平有望成为预测子痫前期和判断子痫前期病情严重程度的指标之一。     

子痫前期发病机制的研究进展

子痫前期是妊娠特有的疾病,由于该病对母儿的危害极大,其发病机制一直是产科研究的焦点。随着研究的不断深入,目前认为该病主要与遗传、血管内皮受损、免疫失衡及炎症反应等因素相关,其中遗传因素是内因,血管内皮损伤因子水平异常升高、血管内皮保护因子水平降低是该病发生、发展的关键环节,而免疫失衡及炎症反应进一步加重血管内皮的损伤,多种机制相互作用导致子痫前期的发生。