香港远志化学成分研究

香港远志(Polygala hongkongensis Hemsl.)系远志科(Polygalaceae)远志属植物，主要分布于江西、湖南、广东和四川等南方地区。民间用于活血、化痰，并具解毒作用。目前从远志属植物中分离得到的化学成分主要为皂苷、酮和糖酯类化合物。由于远志属植物化学成分的多样性和生物活性的显著性，作者首次对香港远志进行了化学成分的研究，以期寻找新化合物和活性成分。本文采用70%甲醇提取，减压回收溶剂得浓缩物，将浓缩物溶于水中，分别用醋酸乙酯和正丁醇萃取。取正丁醇萃取物，用大孔吸附树脂、硅胶、凝胶及半制备HPLC等色谱技术反复分离纯化化学成分，根据化合物的理化性质和UV， IR， HRESI-MS， ESI-MS， ¹H NMR， ¹³C NMR， HMQC， HMBC， H-H COSY， NOESY等光谱数据进行结构鉴定。从香港远志的正丁醇萃取部位分离得到6个化合物，分别鉴定为香港远志碱(polyhongkonggaline，1)，3,6′-二芥子酰基蔗糖酯(3,6′-di-O-sinapoyl-sucrose，2)，tenuifoliside A (3)，glomeratose D (4)，顺式丁香苷(cis-syringin，5)，丁香脂素-4′-O-β-D-单葡糖苷(syringaresinol-4′-O-β-D-monoglucoside，6)。其中化合物1为新化合物，2～6均为首次从该植物中分离得到。     

远志抗衰老作用的研究

目的探讨远志的抗衰老机制。方法采用D-半乳糖致小鼠衰老模型,观察不同剂量的远志提取物对小鼠血清中SOD和肝细胞中GSH-PX活力的影响。结果远志水提物可明显提高小鼠血清中SOD和肝细胞中GSH-PX的活力,降低MDA含量。结论远志提取物可通过清除机体生成的过多自由基、改善机体的抗氧化能力,发挥延缓衰老的作用。     

密花远志的化学成分研究(Ⅱ)

目的:研究密花远志Polygala tricornis的化学成分。方法:采用反复柱色谱方法进行分离,利用化合物的光谱数据结合理化性质鉴定化合物的结构。结果:分离、鉴定了6个化合物,分别为:对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid,Ⅰ),丁香酸葡萄糖苷(glucosyringic acid,Ⅱ),1-O-对香豆酰基葡萄糖(1-O-p-coumaroyl-D-glucopyranose,Ⅲ),顺式松柏苷(cis-coniferin,Ⅳ),顺式丁香苷(cis-syringin,Ⅴ)和vacciniin(Ⅵ)。结论:化合物Ⅰ~Ⅵ均为首次从本植物中分离得到。     

中草药远志对醋酸铅诱发的小鼠精子非程序DNA合成的抑制作用

目的:观察中草药远志对雄性小鼠生殖细胞遗传物质损伤的防护作用。方法:采用雄性小鼠生殖细胞非程序DNA合成实验。结果:远志各剂量组诱导的非程序DNA合成与正常对照组比较差异无显著性(P＞0.5);1.0~4.0 g·kg^-1剂量远志对醋酸铅所诱导的非程序DNA合成有明显抑制作用(P<0.01),并且随着远志浓度的增加,其抑制作用逐渐增强,超过一定剂量,其抑制作用不再增强。结论:远志对小鼠生殖细胞遗传物质具有保护作用。     

高糖诱导的星形胶质细胞凋亡的氧化应激通路及总三帖酸的干预作用

目的：研究总三帖酸对高糖诱导的星形胶质细胞凋亡的干预作用及机制。方法采用体外分离乳鼠星形胶质细胞培养并分为对照组、模型组、总三帖酸干预组。高糖温孵后提取细胞mRNA 和蛋白质分析细胞凋亡蛋白Bax／Bcl2及NADPH氧化酶亚基p22的表达。结果模型组细胞Bax表达上调而Bcl2表达下调,同时p22表达上调。总三萜酸干预后上述蛋白表达部分得到恢复。结论总三帖酸可通过抑制p22上调抑制高糖引起的星形胶质细胞凋亡,减轻细胞的损伤。     

远志种质资源遗传多样性随机扩增多态性DNA分析

目的 用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析远志Polygala tenuifolia Willd.及卵叶远志P.sibirica L.的遗传多样性.方法 反应总体积25 μl,内含10×PCR buffer 2.5 μl,dNTPs 2.0 μl,MgCl2 2.0 μl,引物1.0 μl,模板2 ng,Taq酶0.3 μl.扩增程序为:94℃预变性4 min,然后进行45循环:94℃变性15 s,36℃复性1 min,72℃延伸1.3 min,循环结束后72℃延伸4 min.结果 10个引物共检测到154个位点,平均每个引物扩增9.24条带,其中148条带表现为多态性,占总带数的94.3%;距离系数为24时,11个样品明显聚为远志居群和卵叶远志居群两类.结论 远志与卵叶远志具有丰富的遗传多样性,遗传聚类与其地理分布有一定的相关性.     

黄花远志根化学成分的分离和结构鉴定

从黄花远志(Polygala arilata Buch-Ham.)根中分离得到7个化合物,根据光谱(UV,IR,MS,¹HNMR,DIFNOE和¹³CNMR)解析和理化性质,分别鉴定为1-甲氧基-2,3-亚甲二氧基口山酮(I)、1,7-二羟基-2,3-亚甲二氧基口山酮(II)、1,6,7-三羟基-2,3-二甲氧基口山酮(II)、对羟基苯甲酸(IV)、远志醇(V)、豆甾醇(VI)、豆甾醇β-D-吡喃葡萄糖甙(VII)。其中,I和II为新化合物,VI和VI为首次从该植物中分得。化合物I～II有抑制醛糖酶的作用。     

从农艺性状及化学成分测定分析远志药材商品品规和良种选育的合理性

通过对18份具有不同农艺性状特征的远志样品进行农艺性状(株高、根直径、根长、第一侧根分叉高度、侧根数、根重)分析,并采用HPLC对18份远志样品的3个指标性化学成分(细叶远志皂苷、远志酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖)进行含量测定,最后通过散点图分析6个农艺性状与3个指标性化学成分的相关性。研究发现18份远志样品中的3个指标性化学成分含量与远志根直径均无明显相关性,且细叶远志皂苷含量与其余5个农艺性状也无明显相关性;远志酮Ⅲ在主根长较短、第一侧根分叉高度较短,侧根数较多的远志样品中含量较高;3,6'-二芥子酰基蔗糖在主根长较长的远志样品中含量较高。可见现行远志药材商品规格标准及等级划分与良种选育方法,并不符合优等药材其体内指标性化学成分含量较高的药典标准,所以急需制订出具有科学数据支撑的远志商品规格等级标准及良种选育方法。     

Anti-inflammatory action of hydroalcoholic extract,dichloromethane fraction and steroid α-spinasterol from Polygala sabulosa in LPS-induced peritonitis in mice

Ethnopharmacological relevance

Polygala sabulosa A. W. Bennett is a small herb popularly known as “timutu-pinheirinho” that is widely distributed in southern Brazil and that is used to treat disorders of the bowel and kidney and as a topical anesthetic and expectorant in folk medicine. This study was designed to investigate the anti-inflammatory properties of the hydroalcoholic extract (HEPs), CH₂Cl₂ fraction and the steroid α-spinasterol obtained from the aerial parts of Polygala sabulosa in a model of acute inflammation induced by intraperitoneal injection of bacterial lipopolysaccharide in mice.

Materials and methods

The anti-inflammatory effect of HEPs (3–300 mg/kg, i.g.), CH₂Cl₂ fraction (0.003–30 mg/kg, i.g.) and steroid α-spinasterol (0.001–1 mg/kg, i.p. or 1–10 mg/kg, i.g.), were evaluated in mice subjected to the acute inflammation caused by intraperitoneal (i.p.) injection of lipopolysaccharide (LPS, 0.02 µg/kg). The anti-inflammatory activity of the HEPs, CH₂Cl₂ fraction and steroid were assessed by determining the total numbers of leukocytes and differential cell counts (neutrophils and mononuclear cells) and levels of pro-inflammatory (IL-1β, TNF-α, IL-6) or anti-inflammatory (IL-10) cytokines in peritoneal fluid.

Results

The administration of HEPs (3–300 mg/kg, i.g.) completely inhibited inflammatory cell infiltration (300 mg/kg, i.g.) and it reduced TNF-α (100–300 mg/kg) and IL-1β (100 mg/kg) levels in LPS-injected mice. Furthermore, the administration of CH₂Cl₂ fraction (0.003–30 mg/kg, i.g.) or α-spinasterol (0.001–10 mg/kg, by i.p. or i.g.) significantly reduces inflammatory cell infiltration in LPS-injected mice. Moreover, dexamethasone (0.5 mg/kg, i.p., used as a positive control) inhibited inflammatory cell infiltration and reduced the levels of TNF-α, IL-1β and IL-6 in LPS-injected mice.

Conclusions

Taken together, these results provide the first experimental evidence demonstrating that HEPs have significant anti-inflammatory effects on LPS-induced inflammation. These effects appear to be, at least in part, due to the presence of α-spinasterol. These findings support the widespread use of Polygala sabulosa in popular medicine and demonstrate that this plant has therapeutic potential for the development of phytomedicines with anti-inflammatory properties.     

不同产地和部位远志脂溶性成分的GC-MS分析

目的 比较分析不同产地、不同部位和不同炮制规格远志的脂溶性成分,为远志资源开发提供依据。方法 远志不同样品分别用石油醚提取,GC-MS分析其脂溶性成分,并进行欧氏距离聚类。结果 12个产地野生远志药材中共检测出脂溶性成分30个,其中甲苯质量分数为5.215%～38.456%;栽培远志6个部位共检测出脂溶性成分26个,茎叶脂溶性成分中甲苯质量分数高达70.396%,而远志筒中仅为11.352%;甘草炮制对远志脂溶性成分影响较大。聚类分析显示,12个产地分成北纬35°和北纬40°两类;6个部位聚为市场用远志药材类和非药用部位两类。结论 甲苯量高可能与远志药材的黏膜刺激作用及远志植物体强抗病虫害能力有关;脂溶性组分可能是远志有效组分之一。