蝎毒素对小鼠多种免疫细胞活化的影响

目的:探讨东亚钳蝎毒素(BMK IA)对小鼠体内多种免疫细胞活化的影响.方法:C57BL/6小鼠48只,随机数字表法分为空白对照组和实验组,每组分为4批,每批6只,各检测一种免疫细胞.实验组小鼠一次性静脉注射0.004 mg/kg的BMK IA,对照组给予等体积的生理盐水.流式细胞术分别检测2组小鼠给药0、2、8、12...     

中药全蝎抗肿瘤作用初探——Ⅲ.530号粗提物的抗肿瘤作用

全蝎530号粗提物,在10μg/ml和1μg/ml剂量下,用药后48小时和72小时,可使体外培养的Hela细胞全部死亡脱壁。对LA-795肺腺癌带瘤小鼠,每天皮下注射0.2mg/只,连用10天,在停药第1天和停药第10天时,肿瘤生长的抑制率为38.3％(P<0.05)和52.4％(P<0.01);同样用药后作生存率观察,生存时间延长29.2％(P<0.01)。     

东亚钳蝎毒对家兔血液流变学的影响

本文研究了家兔iv东亚钳蝎毒0.21mg/kg和蝮蛇抗栓酶0.018u/kg后1hr,4h,的出、凝血时间和血液流变学8项指标的变化。结果表明蝎毒可延长凝血时间(p<0.05),蝮蛇抗栓酶能降低血浆粘度比(p<0.05),但两药均不影响家兔的出血时间和其他血液流变学指标(p>0.05)。     

Effect of scorpion venom analgesic active peptide extracted from Buthus martensii Karsch on evoked potential in the thalamic posterior nucleus group in rats

BACKGROUND： Buthus martensii Karsch is a rare medicinal animal, and dried integral Buthus rnartensii Karsch is an important drug in traditional Chinese medicine. OBJECTIVE： To investigate the effects of scorpion venom analgesic active peptide （SAP） extracted from Buthus martensii Karsch on evoked unit discharge of the common peroneal nerve in the posterior nucleus group of the thalamus using a stereotaxic electrophysiological extracellular microelectrode recording. DESIGN, TIME AND SETTING： One-way designed study, performed in the Physiological Laboratory of Shenyang Medical College on September 15, 2006. MATERIALS： Fifty 3-4 months old Wistar rats （25 males and 25 females） were used. SAP was provided by Shenyang Pharmaceutical University. Morphine solution was made by the First Drug Manufactory, Northeastern Drug Manufacture Group （batch number： H20013351）. Naloxone solution was made by Hunan Pharmaceutical Co., Ltd. （batch number： H43021669）. Type ATAC-350 medical data processing equipment was made by the Photoelectricity Company, Japan. METHODS： Fifty rats were randomly divided into the SAP group （n=20）, saline group （n=10）, morphine group （n=10）, or naloxone group （n=10）. In the SAP group, the common peroneal nerve was separated and stimulated with a single square wave （17-19 V intensity; 0.2 ms width; 20 ms retardation time）. Subsequently, SAP （0.01%, 2 μL） was injected into the posterior nucleus group of the thalamus. Rats in the naloxone group were injected with naloxone （1.0 mg/kg i.v.） before SAP injection. Rats in the saline group and the morphine group were injected with saline （2 μL） or morphine （0.01%, 2μL）, respectively, before SAP injection. Other procedures were the same as those in the SAP group. MAIN OUTCOME MEASURES： Evoked discharge in the posterior nucleus group of the thalamus and effects of SAP alone and SAP in combination with saline, morphine, or naloxone on discharges in the posterior nucleus group of the thalamus as     

中药全蝎抗肿瘤作用初探——Ⅰ.对带瘤小鼠的作用观察

为探索中药全蝎抗肿瘤作用,我们用全蝎提取液和粗提物,观察其对网状细胞肉瘤(SRS)和MA—737乳腺癌带瘤小鼠肿瘤生长过程的作用。结果:当以全蝎提取液0.2ml,相当生药0.04g/只,隔天皮下给药连用5次后,在用药第11天和停药第8天时,对SRS实体瘤的抑制率为38.8％(P<0.05)和55.5％(P<0.01);对MA—737乳腺癌,每天用药,计12次后抑制率为51.8％(P<0.01),停药8天时为30.4％(P<0.05)。全蝎提取液对SRS腹水型带瘤小鼠的生存率较对照组延长12.5％～20.7％(P<0.01)。全蝎提取液对肿瘤细胞化学的影响,可使上述两种瘤组织的DNA明显减少;并使乳腺癌逐渐增多的AKP趋向减少。表明全蝎对带瘤小鼠的肿瘤生长有明显抑制作用。     

东亚钳蝎毒及其成分抗癫痫肽的抗癫痫作用

本文报告了河北产东业钳蝎毒及从蝎毒分离出的抗癫痫肽,对用头孢菌素和马桑内脂诱发大鼠癫痫的对抗作用。同时检测并记录了大鼠的全部ECoG和行为。以癫痫发作的潜伏期、发作程度、死亡率和平均总持续时间为指标,比较生理盐水对照组与安定、蝎每、抗癫痫肽作用的强度。结果,安定、蝎毒、抗癫痫肽均使头孢菌素引起癫痫的潜伏期比对照组延长,发作程度减轻,平均总持续时间缩短。安定组与抗癫痫肽组与对照组差异显著(P<0.05)。安定、蝎毒、抗癫痫肽均使马桑内脂诱发癫痫的潜伏期明显延长,发作程度明显减轻,死亡率由80%下降到零,发作平均总持续时间亦显著缩短。各组与对照组差异非常显著(P<0.01)。     

中药全蝎抗肿瘤作用初探 Ⅱ 对癌细胞作用观察和有效成分提取

用全蝎提取物水溶液,对体外传代培养的人体肝癌细胞(BEL—7402细胞)和人体子宫颈癌细胞(HeLa细胞)作观察。结果:全蝎提取物的水溶液在相当生药10mg/ml时,用药48～72小时内使上述细胞全部脱壁死亡。进而在Hela细胞上证明,相当生药0.1mg/ml时也同样作用;並以此为有效标志,查明530号粗提物为全蝎直接抑杀癌细胞的有效部位。     

蝎毒抗癌多肽对卵巢癌细胞HO-8910生长的抑制作用

目的观察蝎毒抗癌多肽对卵巢癌细胞HO-8910生长的抑制作用。方法卵巢癌细胞HO-8910分为空白对照组和蝎毒抗癌多肽处理组(终浓度分别为1、100、200、400、800 mg/L),采用细胞毒试验(MTT)法检测蝎毒抗癌多肽对卵巢癌细胞HO-8910生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果1、100、200、400和800 mg/L组HO-8910细胞生长抑制率分别为2.56%、12.47%、28.53%、47.93%和66.92%,200、400和800 mg/L组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01);在400和800 mg/L组,与空白对照组比较,400 mg/L组HO-8910细胞S期细胞数明显减少(P<0.01),G2 M期细胞明显增多(P<0.01),800 mg/L组HO-8910细胞G2 M期细胞数明显减少(P<0.01),G1期细胞数有增多趋势;与空白对照组比较,400和800mg/L组HO-8910凋亡细胞数明显增加(P<0.01)。结论在一定范围内蝎毒抗癌多肽可明显抑制卵巢癌细胞HO-8910的生长,其机制与蝎毒抗癌多肽抑制HO-8910细胞DNA合成、诱导HO-8910细胞发生G2 和G1期阻滞及诱导HO-8910细胞凋亡有关。     

重组CD_(13)单链抗体和蝎毒素多肽AGAP融合蛋白真核表达及对NB4细胞的靶向杀伤作用

目的:本研究应用基因工程技术方法,构建含重组编码CD13单链抗体和蝎毒素镇痛抗肿瘤缬精甘肽(analgesic antitumoral peptide,AGAP)融合蛋白基因的表达载体,并研究CD13-AGAP融合蛋白对CD13阳性白血病细胞NB4影响。方法:克隆东亚钳蝎活性肽AGAP的基因,插入真核表达载体pSecTag2/CD13/RFP,得到pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体。酶切及测序鉴定后,脂质体介导重组质粒转染293T细胞,通过RT-PCR和免疫印迹方法检测融合基因和蛋白的表达。纯化融合蛋白,作用NB4细胞,CCK8检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期。结果:酶切及测序结果证实pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体构建成功,转染293T细胞后,RT-PCR和免疫印迹方法结果证实重组质粒得到有效表达,并纯化真核表达融合蛋白CD13-AGAP对血液肿瘤CD13阳性白血病细胞NB4有一定的生长抑制作用,并且使细胞周期G1期阻滞,S期减少。结论:成功构建了融合蛋白真核表达载体pSecTag2/CD13/AGAP,并在293T细胞中成功表达,进一步证实融合蛋白对CD13阳性白...     

东亚钳蝎神经毒素基因的序列相似性分析

目的对东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch)神经毒素基因进行多序列比对,找到基因的结构特征,在此基础上对序列进行聚类分析,进而推测基因结构与功能的关系。方法搜集目前已知的东亚钳蝎神经毒素基因序列,利用Clustal X1.83软件进行多序列联配,然后用MEGA软件对基因组基因进行聚类分析。结果与结论东亚钳蝎神经毒素基因结构与功能密切相关,而且结构符合断裂基因的基本规律,如果这些基因结构基本一致,是由2个外显子和1个内含子组成,内含子的位置保守,位于信号肽中,基因长度的变化由内含子长度决定。