姜黄素对NOD糖尿病小鼠Th1细胞和CD4^+Treg细胞的作用

目的研究姜黄素对Th1细胞和CD4^+Treg细胞的作用,探讨姜黄素对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠的治疗作用。方法将10周龄雌性NOD小鼠分为对照组和姜黄素组,分别用溶剂或姜黄素灌胃。第14周时测血糖。第20周时,流式细胞术分析外周血Th1细胞和CD4^+Treg细胞,分析胸腺CD4^+ CD8^-T细胞、CD8+CD4^-T细胞及CD4^+Treg细胞;分选脾CD4^+Treg细胞用于检测其抑制功能。结果姜黄素组血糖正常比例高于对照组。姜黄素组Th1细胞比例显著低于对照组(P<0.05),CD4^+Treg细胞比例与对照组差异无统计学意义(P>0.05),CD4^+Treg/Th1显著高于对照组(P<0.05)。姜黄素组胸腺CD4^+CD8^-T细胞、CD8^+CD4^-T细胞及CD4^+Treg细胞比例与对照组差异无统计学意义(P>0.05),胸腺总细胞数显著高于对照组(P<0.05)。姜黄素组CD4^+Treg细胞的抑制功能明显高于对照组(P<0.05)。结论姜黄素降低NOD小鼠外周Th1细胞、增加CD4^+Treg细胞抑制功能、缓解胸腺退化,延缓了NOD小鼠的高血糖症状。     

姜黄素诱导肿瘤细胞自噬后的自噬体浓缩疫苗抗肿瘤的机制研究

目的研究姜黄素诱导肿瘤细胞自噬后的自噬体浓缩疫苗抗肿瘤的机制。方法细胞自噬通过Western blotting和透射电子显微镜。小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)的成熟表型经常规扫描电子显微镜(SEM)、流式细胞仪(FCM)和透射电子显微镜(TEM)证实。自噬体介导的交叉呈递效率通过羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)的分布测定T细胞的增殖。分析自噬体的抗原交叉呈递的机理。结果姜黄素诱导的自噬通过自噬体的电子显微镜以及LC3-Ⅱ的表达所证实。自噬体浓缩疫苗上调表达CD40、CD86和MHCⅡ。经自噬体介导的T细胞激活后,T细胞有明显的扩增同时能杀伤靶细胞。HSP90、HSP70和HMGB1在这种新的疫苗中发挥重要作用。结论这些数据表明以自噬体为基础的疫苗有抗肿瘤疗效独特的特点。这种新的肿瘤疫苗的功效需临床试验的进一步验证。     

髓样分化因子88对姜黄素诱导肝星状细胞凋亡的影响

目的观察髓样分化因子88在姜黄素促进肝星状细胞(HSC)凋亡中的作用。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSCT6,并分为空白对照组、Control siRNA组、MyD88 siRNA干扰组、姜黄素组、姜黄素+Control siRNA组、姜黄素+MyD88 siRNA干扰组,siRNA处理组给予siRNA干扰48 h后,姜黄素组加入姜黄素作用24 h,各组均在收集细胞前12 h给予LPS诱导,收集各组细胞,Western blotting法检测MyD88蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 MyD88 siRNA干扰、姜黄素均可降低MyD88蛋白的表达(P0.05),同时给予MyD88 siRNA干扰和姜黄素作用时与单独给予姜黄素比较,MyD88蛋白下降更明显(P0.05)。MyD88siRNA干扰后HSCs凋亡率无明显增加(P0.05),给予姜黄素处理HSCs凋亡率增加(P0.05),且姜黄素+MyD88 siRNA干扰组的凋亡率升高更明显。结论降低MyD88表达可加强姜黄素促进HSCs凋亡的作用。     

姜黄素对直肠癌CD133+肿瘤干细胞样细胞群体放疗增敏作用的研究

目的 探讨姜黄素对体外、体内直肠癌CD133+肿瘤干细胞样细胞群放疗敏感性的影响.方法 采用免疫磁珠分选法对直肠癌HRT-18细胞进行干细胞分选后随机分成姜黄素组、放疗组、姜黄素联合放疗组,应用MTT法检测24、48和72 h各组细胞生长抑制情况;采用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况.将分选的CD133+直肠癌细胞移植于裸鼠右脚垫建立移植瘤模型,将模型鼠分为姜黄素组、放疗组、姜黄素联合放疗组,每组8只,观察瘤体动态生长情况并用原位末端标记技术检测瘤体内细胞凋亡情况.结果 低剂量姜黄素联合放疗对直肠癌CD133+肿瘤干细胞样细胞群(24 h生长抑制率:18.7％±1.7％)较放疗组(14.6％±1.0％)具有明显的生长抑制作用(P＜0.01);姜黄素联合放疗组细胞凋亡率(28.8％±3.7％)与放疗组(13.1％±1.4％)比较差异有统计学意义(P＜0.01);治疗6d时,姜黄素联合放疗组的瘤体体积为(521 ±79) mm3,与放疗组的(717 ±134) mm3比较差异有统计学意义(P＜0.01);姜黄素联合放疗组瘤体细胞凋亡指数(26.1％±3.3％)较放疗组(12.0％±2.1％)明显增高,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 姜黄素可显著提高CD133+肿瘤干细胞样细胞群的放疗敏感性.     

奥沙利铂-姜黄素脂质体复合物的制备及质量评价

目的：制备共载奥沙利铂-姜黄素脂质体复合物,并对其质控方法进行评价。方法：采用薄膜分散-被动载药技术制备脂质复合物,建立高效液相色谱法测定脂质体复合物含量及包封率,采用Malvern粒度仪测定Zeta电位、动态光散射技术测定粒度与粒度分布。结果：奥沙利铂-姜黄素脂质体复合物的包封率分别为99.02%、97.97%,Zeta电位为（-8.36±1.8） mV;平均粒径为（134.6±1.9） nm,D10（99.2±2.2） nm,D50（137±1.7） nm,D90（189±1.1） nm,D100（248±1.6） nm;脂质体复合物于5℃±3℃稳定性考察6个月,各项考察指标均在标准规定范围内。结论：该技术适合奥沙利铂-姜黄素脂质体复合体的制备,建立的质控方法简单、准确,适合对该脂质体复合物的性质进行评价。     

Iodinated curcumin bearing dermal cream augmented drug delivery,antimicrobial and antioxidant activities

Objectives: Curcumin (Cur) exhibits weak microbicidal activity owing to high lipophilicity and low cell permeability. Therefore, in the present investigation, Cur was iodinated using elemental iodine (I₂) to synthesise Cur–I₂ powder that was later formulated as Cur–I₂ dermal cream and characterised in vitro for antimicrobial and antioxidant activities.

Methods and results: Electrophilic addition of I₂ saturated the olefinic bonds of Cur, as confirmed by UV/visible spectroscopy, FT-IR, ¹H NMR and DSC techniques. In addition, in vitro skin permeation and retention analysis indicated that Cur–I₂ cream followed the first order and Higuchi model for drug release through the rat skin. The minimum inhibitory concentration (MIC) of Cur–I₂ powder was measured to be 60 and 90?µg/ml significantly (p?Staphylococcus aureus and Escherichia coli, respectively. Moreover, Cur–I₂ also exhibited strong antioxidant potential.

Conclusions: Cur–I₂ cream warrants further in vivo study to scale up the technology for clinical translation.     

姜黄素对缺氧再给氧大鼠心脏微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

目的：研究姜黄素对缺氧再给氧大鼠心脏微血管内皮细胞粘附分子ICAM－1表达的影响。方法：培养大鼠心脏微血管内皮细胞，建立细胞缺氧再给氧模型，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定内皮细胞粘附分子ICAM－1的蛋白表达，Northern blot分析测定ICAM－1mRNA的表达。结果：缺氧后内皮细胞ICAM－1的蛋白和mRNA表达明显升高，缺氧再给氧后增高更明显，姜黄素组ICAM－1的蛋白和mRNA的表达较缺氧再给氧组明显下降，呈剂量依赖效应。结论：姜黄素能明显下调缺氧再给氧大鼠心脏微血管内皮细胞ICAM－1的表达，抑制内皮细胞的激活。     

姜黄素对人SPC-A549细胞生长抑制的影响

目的　研究姜黄素对人肺腺癌细胞SPC -A5 4 9的生长抑制作用。方法　采用细胞培养 ,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化 ;MTT法检测姜黄素对肺腺癌细胞的抑制作用。结果　①姜黄素作用癌细胞后 ,光镜下可见细胞脱壁 ,胞体缩小 ,胞核固缩。② 5、10、2 0和 4 0mg/L姜黄素均能抑制人肺腺癌细胞SPC -A5 4 9的生长 ,4 0mg/L姜黄素作用 12h细胞存活率达2 8.5 %。结论　姜黄素能有效的抑制人肺腺癌细胞SPC -A5 4 9的生长 ,且对人SPC -A5 4 9细胞存活率具有浓度和时间依赖性     

HPLC法测定姜黄提取物中有效成分含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定姜黄提取物中姜黄素、一脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素的含量.方法：采用C18色谱柱（150 mm×6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水-冰乙酸（39∶57∶4）,流速为1.4 ml· min-1;检测波长：428 nm;柱温：35℃;进样量：20μl.结果：同时测定了姜黄素、一脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素的含量,三者的线性范围分别为81.31～650.50 μg ·ml-1,26.93 ～215.42μg· ml-1,16.32～130.54 μg ·ml-1.平均回收率分别为100.9％,100.9％,100.6％,RSD分别为1.7％,1.2％,1.5％（n=9）.结论：该方法简便、准确、重复性好,可用于姜黄提取物中有效成分的测定.     

姜黄素与丙酸酐不对称反应产物的合成

目的:合成姜黄素与丙酸酐的不对称反应产物——1-(4-丙酰氧基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,6-庚二烯-3,5-二酮(化合物1)。方法:以姜黄素和丙酸酐为原料,吡啶为催化剂,二氯甲烷/N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂,进行不对称反应,经柱层析分离纯化,得目标化合物1,并进行核磁共振结构表征,以收率为指标,确定最佳反应条件(投料比、温度、时间、吡啶用量)。结果:制备得到了化合物1(收率:81.2%,纯度:99.0%),并经结构表征证实。化合物1的最佳反应条件是姜黄素与丙酸酐比为1∶1.5(m/m),反应温度为30Ⅸ,时间为30 min,吡啶用量为0.5%。结论:以确定的反应条件可得到目标化合物1。该工艺操作简便,收率和纯度高,可为姜黄素结构修饰的进一步研究提供参考。