靶向皮肤树突状细胞可能是有应用前景的疫苗策略

据Medscape．com6月13日报道（原载Immunity2006：24：643—656），慢病毒侵入表皮会直接转染皮肤源性树突状细胞，使编码的抗原出现有效且持久的提呈。     

外源性脆性组氨酸三联体基因对胃癌细胞株治疗敏感性的影响

脆性组氨酸三联体（FHIT）基因是近年发现的抑癌基因之一，有研究表明胃癌中存在较高频率的FHIT基因转录异常和（或）FHIT基因表达降低或缺失，提示FHIT基因异常表达可能与人类胃癌的发生、发展有关。本研究通过脂质体转染技术，将FHIT基因转染到有FHIT基因表达缺失的MGC-803胃癌细胞株，观察FHIT表达对肿瘤细胞生长和化学治疗敏感性。     

兔骨髓间充质干细胞Ⅱ型胶原表达的实验研究

目的探讨兔骨髓间充质干细胞表达Ⅱ型胶原的实验研究方法。方法利用β1转化生长因子腺病毒表达载体（Ad—TGFβ1）转染兔骨髓间充质干细胞（MSCs），观察转染后的Ⅱ型胶原表达。结果细胞转染后Ⅱ型胶原在免疫印记和免疫组化检测下均呈强阳性表达。结论Ad—TGFβI转染兔骨髓MSCs可使其细胞内Ⅱ型胶原表达阳性。     

复合干细胞生物陶瓷在裸鼠异位成骨中的评价

目的 研究h-BMP-2基因转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)在复合煅烧骨、β-TCP或直接植入裸鼠股部后的成骨能力。方法 通过影像学、组织学和形态计量学等方法,观察未经诱导、OS液诱导和h-BMP-2基因转染BMSCs在复合煅烧骨,或多孔β-TCP后植入裸鼠皮下,或直接制成细胞悬液注入,在4、8、12周诱导成骨和材料降解情况。结果 在裸鼠皮下,单纯生物陶瓷不能诱导成骨,而复合了未诱导、OS液诱导和h-BMP-2基因转染BMSCs的生物陶瓷均能成骨,成骨量为h-BMP-2基因转染组>OS液诱导组>未经诱导组(P<0.05),B-TCP可随骨长入而降解;注入裸鼠肌肉的OS液诱导的和h-BMP-2转染的BMSCs均能诱导成骨,而未经诱导MSCs则不能成骨。结论 复合人BMP基因转染BMSCs的β-TCP是一种理想的骨修复材料。     

SIRNA表达载体与阳离子脂质体复合物转染HEPG-2细胞的实验研究

目的 观察针对HIF1 岬腟IRNA表达载体Genesil-HIF1a与阳离子脂质体复合物对EPG-2细胞增值及其对HIFl a表达的影响.方法 以pGenesil表达载体分别设计阳性对照(pG-shRNA-Hif-1a),阴性对照(pG-shRNA-HK),未处理细胞为空白对照(KB).用3ug:15ul配比的pGenesil-SIRNAc与阳离子脂质体的复合物转染HEPG-2细胞,Q418 400mg/ml培养转染后的细胞10天,拍荧光照片.37℃,5%CO2,5%O2、90%N2培养36小时,用RT-PCR测定HIF-1a mRNA的表达,用cck-8测细胞增殖.结果 培养36小时的阳性对照组Hif-1a m RNA表达明显减低(P＜0.05),对Hepg-2细胞增殖抑制作用明显(P＜0.05);结论 3ug:15ul计量配比组pGenesil-hif-1a与阳离子脂质体复合物可有效转染 Hepg-2细胞,能有效抑制HEPG-2细胞Hif-1a的表达,并抑制其增殖.     

运用siRNA建立稳定低表达IGF1R基因的肝癌细胞株的实验研究

目的运用siRNA技术在肝癌细胞株中建立稳定低表达人胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)基因的细胞株。方法构建包含封闭IGF1R基因的真核表达载体pSUPER-IGF1R-siRNA,转染SMMC7721和Hep3B细胞,G418筛选表达稳定的细胞株。通过RT-PCR、Western-blot分析与鉴定IGF1R mRNA和蛋白及cyclin D1、cyclinB1蛋白的表达,并绘制细胞生长曲线。结果在SMMC7721和Hep3B细胞中成功建立低表达IGF1R基因的细胞株,其生长明显减慢(P<0.05),且其cyclinD1表达亦明显下降(P<0.05)。结论pSUPER-IGF1R-siRNA能抑制SMMC7721和Hep3B细胞的生长。     

稳定表达nucleostemin—siRNA的肿瘤细胞克隆的筛选和鉴定

目的：用脂质体法建立nucleostemin（NS）基因特异性siRNA阳性细胞克隆，为深入研究NS基因在胃癌细胞增殖调控中的作用和机制提供理想的生物学模型。方法：试剂盒法将真核表达载体PCDNA4／C—NS—silencer质粒大量扩增，然后以限制性切酶PVUI酶切线性化处理，用LipofectamineTM2000Reagent将PCDNA4／C—NS—silencer及其对照空载体转染胃癌SGC-7901细胞，经Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定细胞克隆外源基因整合阳性。结果：经Zeocin抗生素压力筛选后两组细胞均收获多个细胞克隆；PCR结果表明两组细胞克隆外源基因整合阳性。结论：成功建立表达NS～siRNA的胃癌SGC-7901细胞克隆。