人晶体 γ-晶体蛋白的研究:Ⅳ.近紫外线对胚 γ_2-晶体蛋白的光氧化作用

对人胚胎晶体γ_2-晶体蛋白溶液用近紫外线(γmax 365nm)照射,不同时间取样分析。利用巯基(-SH)特异性试剂 DACM[N-(7-甲基氨基-4-甲基-3-邻羟苯烯基)-马来酰亚胺],经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳观察光照射后的γ_2-晶体蛋白及其聚合物的游离巯基,同时检测照射后的蛋白溶液的紫外吸收光谱、光散射强度、色氨酸荧光发射光谱,以及丙烯酰胺对色氨酸荧光的猝灭效应。结果显示:人胚胎γ_2-晶体蛋白经紫外线照射,使其游离-SH 减少,蛋白聚合和分解,蛋白溶液的光散射增强,其二聚体不含游离-SH,γ_2-晶体蛋白的色氨酸荧光减少,这些变化随照射时间的延长而更明显;而对丙烯酰胺对蛋白分子中的色氨酸荧光猝灭效应影响不大。说明人胚胎γ_2-晶体蛋白通过光氧化,损伤及含游离-SH 的氨基酸残基、色氨酸残基,光氧化促使蛋白聚合和分解.提出通过进一步定量分析,可能在较深层次揭示紫外光氧化损伤含-SH 氨基酸、色氨酸残基,进而影响整个蛋白质分子结构的差异。眼科学报 1993;9:85-89。     

DBH─PF分光光度法测定血清锌的研究

研究了在混合表面活性剂CTMAB和OP存在下，新试剂二溴羟基苯基荧光酮（DBH—PF）分光光度法测定血清中微量锌的最佳显色条件及应用。结果表明，在pH11．0～12．8的碱性介质中，CTMAB、OP及洒石酸钠的存在下，Zn2 与DBH－PF形成了1：3的紫色络合物，常温下可以稳定7h，λmax为602um，摩尔吸光团数k为5．851×104cm2／mol，血清锌在0～14μmol／L范围内服从Lambert－Beer定律，血清中大多数金属离子在一般情况下不干扰测定，可不加掩蔽剂直接测定血清锌。该法简便、特异、灵敏、准确、用血量少、无需沉淀蛋白、加热及特殊设备，是目前分光光度法测定血清锌的最灵敏方法之一，精密度为2．58％，平均回收率为102．7％，与AAS法比较结果无显著性差异，所以该法适于临床推广。     

荧光光谱法测定丁胺卡那霉素含量

 荧光光法測定丁胺卡那霉素含量，操作简便灵敏，试剂价廉易得，可同时測定大量样品，线性范围0~l0μg/ml (r=0. 9997)；批内，批间 RSD分別为3. 52%和2. 94% 。測定波长Ex415nm,Em475nm,适用于微量样品中丁胺卡那霉素含量測定。     

荧光染料在视神经脊髓鞘形成期从轴突至少突胶质细胞的扩散

将真蓝(true blue)混悬液注入出生后7、14、28d大鼠眼球内,经过一定时间后,视神经内的轴突和少突胶质细胞被荧光标记。荧光强度在视神经眼球端强于视神经交叉端;出生后14～28d的幼鼠荧光标记明显强于出生后7d的幼鼠;不同年龄组的动物荧光标记普遍在注射荧光染料后的第5d显著增强。本研究表明,荧光染料可被视网膜的节细胞吸收,经轴突输送,然后,横向扩散到少突胶质细胞,扩散的通路可能是朗氏结旁区的轴胶连接。     

生姜对超氧阴离子及羟自由基的清除作用

生姜对次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子及紫外线照射H₂O₂体系产生的羟自由基均有显著清除作用。提示生姜对活性氧的清除可能是其重要的药理机制之一。     

肝癌患者血清和腹水可溶性肿瘤坏死因子受体-p55的测定

目的 进一步了解肝癌患者的异常免疫状态,探讨血清、腹水中可溶性肿瘤坏死因子受体-p55（sTNFR-p55）检测的临床意义。方法　以双单抗夹心酶免疫吸附法检测了25例肝癌患者和25例肝硬化患者的血清、腹水中血清sTNFR-p55水平并以正常人为对照。结果肝癌病人血清sTNFR-p55浓度[（0.74±0.50）ng/ml]显著高于正常人[（0.37±0.03）ng/ml]和肝硬化患者和[（0.35±0.02）ng/ml],P<0.01。肝癌病人腹水sTNFR-p55浓度[（1.11±1.25）ng/ml]亦显著高于肝硬化患者[（0.33±0.03）ng/ml],P<0.01。肝癌、肝硬化患者血清与腹水的sTNFR-p55水平显著相关。肝癌患者血清sTNFR-p55水平与外周血TBil和AFP呈正相关（r=0.524,P=0.01和r=0.234,P=0.03）。结论　sTNFR-p55的检测对反映肝癌患者的异常免疫状态和肿瘤诊断具有实用价值。     

应用荧光免疫法检测生殖道沙眼衣原体及加德纳细菌

应用标记荧光素的抗沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)和抗阴道加德纳细菌(Gardnerella Vaginalis,GV)单克隆抗体,直接免疫荧光法(DFA)检测66例妇女生殖道标本。结果显示:Ct感染率为12.12％,GV感染率为19.70％。在妇科门诊患者Ct和GV感染率较高,应引起高度重视,18～40岁妇女是重点防治对象。     

抗人精浆蛋白McAb的制备及其特性研究

本文报道用杂交瘤技术建立了２株分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的细胞株Ｄ１和Ｃ１２。Ｄ１株分泌的抗体为ＩｇＭ，Ｃ１２株为ＩｇＧ３。这两株均能与正常人精浆和无精子症患者的精浆产生特异性免疫反应。Ｄ１株单抗具有补体依赖性制动人精子的作用，间接免疫荧光试验表明，它能结合到人精子颈部和顶体后区。这充分说明２株单抗是特异性抗人精浆的，Ｄ１是精子制动抗体，其相应的精子抗原属于精子外套抗原成分之一。     

荧光原位杂交技术分析人结肠菌群方法研究

建立荧光原位杂交技术分析人体内结肠菌群的方法。取受试者新鲜粪便 ,选用 5种特异性的 16SrRNA寡核苷酸探针 ,检测粪便样本收集后的保存时间、温度 ,离心条件及样本固定液存放时间对杂交计数结果的影响。结果建立最佳实验条件为 :粪便样本收集后应尽快在 4℃下保存 ,放置时间不要超过 12小时即作处理 ;样本的适宜离心条件为 70 0g 2分钟 ;样本用多聚甲醛固定后在 - 80℃下存放时间不要超过 5个月。该方法具有较好的稳定性 ,可以有效地检出个体之间结肠菌群的差异。     

免疫荧光技术在口腔扁平苔藓和慢性盘状红斑狼疮诊断中的价值

采用免疫荧光技术对口腔扁平苔藓（ＯＬＰ）和慢性盘状红斑狼疮（ＤＬＥ）的免疫病理学进行了研究，结果表明，ＩｇＧ和纤维蛋白原荧光抗体在上皮基底膜区沉积的阳性率两病之间有显著性差异；而胶样小体中出现的阳性率无显著性差异；两病患者的血清抗核抗体阳性率之间亦无显著性差异。