硫辛酸对MPTP诱导的小鼠帕金森病模型的神经保护作用

目的:探讨α-硫辛酸(alpha-lipoic acid,ALA)在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的小鼠帕金森病(Parkinson disease,PD)模型中的神经保护作用。方法:建立MPTP诱导的PD小鼠模型后,通过旷场实验、悬绳实验和转棒实验评估ALA对PD小鼠运动缺陷的影响;通过免疫组化检测ALA对PD小鼠黑质和纹状体多巴胺能神经元的影响;通过高效液相色谱检测ALA对PD小鼠纹状体多巴胺(dopamine,DA)及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(3,4-dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)释放的影响;通过免疫荧光检测ALA对PD小鼠黑质中小胶质细胞活化以及小胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响;通过Western blot检测ALA对PD小鼠纹状体中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和促炎分子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。结果:行为学实验结果显示,ALA治疗显著增加PD小鼠总移动距离、平均运动速度和悬线实验评分(P<0.05),显著降低转棒实验的下落潜伏期(P<0.01)。免疫组化结果显示,ALA治疗显著增加黑质和纹状体中TH的表达水平(P<0.01)。高效液相色谱结果显示,ALA治疗显著增加纹状体DA和DOPAC的释放水平(P<0.01)。免疫荧光结果显示,ALA治疗显著降低黑质中小胶质细胞的活化和小胶质细胞的iNOS阳性细胞数(P<0.01)。Western blot结果显示,ALA治疗显著增加纹状体中TH的表达,显著降低IL-1β、TNF-α和COX-2表达(P<0.01)。结论:ALA在MPTP诱导的PD小鼠中发挥神经保护作用,能降低小胶质细胞活化,减轻多巴胺能神经元损伤、神经炎症和运动缺陷。     

硫辛酸对急性肺损伤保护作用

目的：探讨代谢性抗氧化剂硫辛酸(LA)对内毒素(LPS)诱发大鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)模型的保护机制,为急性肺损伤的治疗提供新的思路和方法。方法将ALI/ARDS大鼠分为正常对照组(生理盐水(NS)组)、ALI/ARDS模型组(脂多糖(LPS组)、LA干预组(LA组)和谷胱甘肽干预组(GSH组),每组各10只。注射后1、2、4和6h观察血清肿瘤坏死因子(TNF-A)水平,6 h后处死大鼠,测定动脉血氧分压(PaO2)、血清脂过氧化物水平(LPO)、肺湿干比(W/D)、肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度和TNF-水平。结果LA组和GSH组PaO2水平较LPS组明显增高(<0.05);血清LPO水平、W/D、BALF中蛋白浓度明显下降(<0.05);LA组TNF-水平呈进行性下降,在注射后各时点与LPS组比较均明显降低(<0.05)。结论 LA对LPS诱发的大鼠ALI/ARDS模型的损伤有一定保护作用。     

α-硫辛酸对2型糖尿病肾病高同型半胱氨酸血症及血管内皮功能的影响

目的观察抗氧化剂α-硫辛酸(ALA)对2型糖尿病肾病患者高同型半胱氨酸(Hcy)血症及血管内皮功能的影响。方法选择2型糖尿病并发糖尿病肾病(DN)患者67例,随机分为两组:治疗组(n=34)用ALA 300 mg加入生理盐水250 mL中静脉滴注,每日1次连续14 d;对照组(n=33)仅给予一般常规治疗。评估两组治疗前、治疗第15d的Hcy、血糖、血脂和血浆内皮素(ET-1)和血清一氧化氮(NO),记录各种不良事件,判断其与药物的相关性。结果 ALA治疗后第15d患者的Hcy、ET-1降低,NO明显升高(P<0.05)。两组治疗期间均未发生明显的不良反应。结论 ALA能够降低糖尿病肾病患者血浆Hcy水平,改善血管内皮功能,且具有良好的安全性。     

口服硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变

目的 评价国产硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的临床疗效和安全性.方法 采用随机、双盲、平行对照的方法 .试验组服用硫辛酸和维生素B1,对照组服用安慰剂和维生素B1,用药观察12周.结果 在4、8、12周时,试验组改善神经病变主觉症状的有效性优于对照组(P＜0.05);两组治疗前后神经传导速度无显著性差异.两组不良事件发生率亦无显著性差异.结论 硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变是安全有效的.     

HPLC法测定硫辛酸缓释片中主药的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定硫辛酸缓释片中主药含量的方法。方法:色谱柱为HypersilODS,流动相为乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液(45∶55,用磷酸调pH为2.0),流速为1.0mL·min-1,进样量为10μL,检测波长为219nm,柱温为25℃。结果:硫辛酸检测浓度的线性范围为9.99～399.70μg·mL-1(r=0.999);平均回收率为99.17%(RSD=0.40%);日内、日间RSD均小于2.6%。结论:本方法简便、准确,可用于硫辛酸的含量测定。     

LC-MS联用法测定人血浆中硫辛酸的浓度

目的:建立以液-质联用法测定人血浆中硫辛酸浓度的方法。方法:色谱柱为ZorbaxSBC18,流动相为甲醇∶乙腈∶0.1%冰醋酸(用氨水调节pH至4.0)=55∶10∶35,流速为0.3mL·min-1,内标为萘普生,柱温为40℃。采用选择性负离子(SIM)检测m/z205.0(硫辛酸)、m/z229.3(内标)。结果:硫辛酸检测浓度在0.01～10μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999);方法回收率在97.61%～106.31%之间,高、中、低3种浓度的日内和日间RSD均≤4%。结论:本方法灵敏、准确、重现性好,可用于硫辛酸的药动学和生物利用度研究。     

毛细管顶空进样法测定硫辛酸中有机溶剂残留量

目的:建立以外标法测定硫辛酸中残留量的顶空气相色谱法。方法:用Agilent HP 5毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm);载气为N2,柱流量为1.0 mL.min-1,分流比为2∶1,柱温为50℃;检测器为FID,检测器温度250℃;Agilent6890NGC仪和7694E顶空进样器,顶空瓶加热温度为85℃,加热40 min;进样口温度为200℃。结果:乙醇、丙酮、正己烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯的线性范围分别为21.2～190.6,22.1～198.9,2.1～19.1,20.5～184.3,2.2～19.4和2.3～20.6μg.mL-1,相关系数分别为0.994 9,0.998 4,0.993 1,0.999 8,0.992 1和0.999 4;最低检出浓度分别为2.1,2.2,0.2,2.0,0.2和0.2μg.mL-1;平均回收率分别为100.2%(RSD=2.5%),101.3%(RSD=1.4%),102.5%(RSD=1.9%),98.6%(RSD=1.4%),99.7%(RSD=1.8%)和102.8%(RSD=2.1%)。结论:本法简便、灵敏、准确,适用于硫辛酸中有机残留量的测定。     

α-硫辛酸对视网膜缺血再灌注损伤中Caspase-3表达的影响

目的观察大鼠视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RI-RI)过程中α-硫辛酸对Caspase-3表达的影响。方法采用升高眼压的方法制作实验性RIRI的大鼠模型。将60只SD大鼠随机分为正常组、单纯α-硫辛酸组、单纯缺血再灌注组及α-硫辛酸干预组,同时后3组根据再灌注时间的不同分成1d、3d、7d组,HE染色光镜观察视网膜组织变化,应用SABC免疫组织化学法检测大鼠RIRI后视网膜组织Caspase-3表达的变化。结果正常组及单纯α-硫辛酸组视网膜组织Caspase-3不表达。单纯缺血再灌注组视网膜在再灌注后1d时Caspase-3表达显著,3d表达已明显下降,7d进一步降低。α-硫辛酸干预组各观察指标变化趋势基本与单纯缺血再灌注组相似,但表达明显减弱,2组相比较,于再灌注1d和3d时差异有统计学意义(P<0.05)。结论Caspase-3参与了RIRI的形成,α-硫辛酸可以抑制Caspase-3蛋白的表达;α-硫辛酸在RI-RI中可能通过抑制细胞凋亡而达到其保护作用。