基于HPLC-QAMS法同时测定清肺散结丸中阿克苷、苦玄参苷ⅠB、苦玄参苷ⅠA、三七皂苷R1、绞股蓝皂苷XLⅨ、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ的含量

摘要：目的:建立高效液相一测多评法同时测定清肺散结丸中阿克苷、苦玄参苷ⅠB、苦玄参苷ⅠA、三七皂苷R1、绞股蓝皂苷ⅩLⅨ、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ的含量。方法:采用高效液相一测多评法,以Welch Material C18（250 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,柱温:25℃;流动相为乙腈-0.2%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.9 ml·min-1;检测波长分别为264 nm（检测阿克苷、苦玄参苷ⅠB和苦玄参苷ⅠA）和203 nm（检测三七皂苷R1、绞股蓝皂苷XLⅨ、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ）。以苦玄参苷ⅠA为内参物,建立其与阿克苷、苦玄参苷ⅠB、三七皂苷R1、绞股蓝皂苷XLⅨ、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ的相对校正因子,计算各成分含量。结果:阿克苷、苦玄参苷ⅠB、苦玄参苷ⅠA、三七皂苷R1、绞股蓝皂苷XLⅨ、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ分别在1.87～46.75μg·ml-1（r=0.999 1）、2.03～50.75μg·ml-1（r=0.999 7）、1.06～26.50μg·ml-1（r=0.999 3）、0.97～24.25μg·ml-1（r=0.999 6）、0.81～20.25μg·ml-1（r=0.999 1）、1.39～34.75μg·ml-1（r=0.999 7）、2.26～56.50μg·ml-1（r=0.999 5）范围内线性关系良好;平均加样回收率（RSD）分别为98.83%（0.97%）,100.11%（0.62%）,97.92%（1.38%）,96.96%（1.40%）,97.74%（1.18%）,99.15%（0.89%）和99.36%（1.01%）（n=9）;一测多评法的计算值与外标法（ESM）测定值间无明显差异。结论:所建立的HPLC-QAMS法结果准确,可用于清肺散结丸的质量控制。     

绞股蓝总皂甙对实验性动脉粥样硬化家兔血清一氧化氮及过氧化脂质的影响

本实验在新西兰兔食饵性动脉粥样硬化模型上,观察了绞股蓝总皂甙预防性给药和治疗性给药对血清一氧化氮、胆固醇及过氧化脂质的影响。发现绞股蓝总皂甙(60mg·d-1)与1%胆固醇同时喂养或喂胆固醇4周后以绞股蓝总皂甙(120mg·d-1)治疗4周均能有效抑制高脂所致的血清一氧化氮降低和过氧化脂质升高,并能保护超氧化物歧化酶活性和降低血清总胆固醇及甘油三酯的水平。     

绞股蓝中1个新的葫芦烷型皂苷类化合物

目的对绞股蓝Gynostemma pentaphyllum的总皂苷提取物进行化学成分研究。方法综合应用多种色谱技术进行分离纯化,通过各种现代谱学技术对化合物进行结构鉴定。结果从绞股蓝的总皂苷提取物中分离得到2个葫芦烷型三萜皂苷类化合物,分别鉴定为葫芦素L-2-O-{[a-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)][α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基}-25-O-β-D-吡喃木糖苷(1)、葫芦素L-2-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)][a-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)。结论化合物1为1个新化合物,命名为绞股蓝葫芦皂苷A。     

人参属植物高温蒸制前后人参皂苷含量的变化和细胞毒活性研究

目的研究人参属植物人参Panax ginseng、三七P. notoginseng和西洋参P. quinquefolium高温蒸制前后主要人参皂苷的含量变化,并测定高温蒸制前后样品对4株肿瘤癌细胞的细胞毒活性。方法采用HPLC建立了测定22种皂苷含量的分析方法,测定这些皂苷在人参属植物及其高温蒸制品中的含量。用MTT法测定人参属植物及其高温蒸制品对4株人类癌细胞(人类骨髓癌HL-60细胞、肝癌SMMC-7721细胞、肺癌A-549细胞、乳腺癌SK-BR-3细胞)的细胞毒活性。结果从人参、三七和西洋参及高温蒸制后的样品中鉴定出22个皂苷,包括人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rk3、Rh4、Rk1、Rg5、Rb3、Rh3、Rk2,20(S)-人参皂苷Rh1、20(R)-人参皂苷Rh1、三七皂苷Fc、三七皂苷R1、绞股蓝皂苷IX、20(S/R)-三七皂苷Ft1、20(S/R)-人参皂苷Rg3、人参皂苷Rs3、人参皂苷Rh2。人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2和Rd为人参的主要成分;人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd为西洋参的主要成分;人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和三七皂苷R1为三七的主要成分,高温蒸制后这3种植物的主要成分全部转化为人参皂苷Rk3、Rh4、Rk1、Rg5和20(S/R)-人参皂苷Rg3,在高温蒸制后的三七中还检测到20(S)-人参皂苷Rh1和20(R)-人参皂苷Rh1。三七皂苷Fc、人参皂苷Rb3和绞股蓝皂苷IX为三七茎叶的主要成分,高温蒸制后转化为另外8个主要成分20(S/R)-三七皂苷Ft1,20(S/R)-人参皂苷Rg3、Rs3、Rk1、Rg5,20(S/R)-人参皂苷Rh2、Rh3和Rk2。细胞毒活性结果显示,高温蒸制三七的细胞毒活性比高温蒸制人参和高温蒸制西洋参强,高温蒸制三七的细胞毒活性比三七的活性强,说明高温蒸制后三七的细胞毒活性增强。结论人参、西洋参和三七经过高温蒸制后原来的主要成分基本消失,随之转化为其他主要成分,高温蒸制三七的细胞毒活性最强。     

绞股蓝皂苷对鼠应激能力影响的效果评估

目的：观察在不同类型应激状态下，绞股蓝皂苷对鼠应激能力的影响，并与人参皂甙作用效果进行比较。 方法：（1）实验于2004—07／08在宜春学院生物工程研究所完成。选用昆明种小鼠90只，SD大鼠30只。②常压下缺氧应激模型：将30只小鼠随机分为3组：生理盐水组（给予相同容积的生理盐水）、绞股蓝皂苷和人参皂苷（100mg／kg分别灌胃绞股蓝皂苷和人参皂苷），各组均连续干预3d。均在末次给药50min后将小鼠置于250mL的盛有碱石灰10g的磨口广口瓶内，每瓶放小鼠1只，然后密塞涂以凡士林，造成瓶内氧气逐渐减少，形成缺氧环境，以呼吸停止为判断死亡指标。观察记录在缺氧应激状态下，小鼠存活的时间。③异丙肾上腺素作用下的缺氧应激模型：分组、给药同“常压下缺氧应激模型实验”。于在末次给药35min后，腹腔注射异丙肾上腺素15mg／kg，25min后，按“常压下缺氧应激模型实验”法观察记录小鼠在缺氧应激状态下存活的时间。强迫游泳应激模型：分组、给药同“常压下缺氧应激模型实验”。在末次给药50min后将小鼠置于25℃，水深35cm的恒温水箱中强制游泳，小鼠游泳至力竭时开始下沉，以小鼠下沉至水底为指标，观察记录小鼠自游泳开始至下沉水底的时间。④急性心肌缺血性应激模型：随机将SD大鼠30只分成为3组：生理盐水组（给予0．1mL/只）、绞股蓝皂苷组（给予绞股蓝皂苷30mg／kg）和人参皂苷组（给予人参皂苷30mg／kg），每组10只。15min后记录一次心电图。然后，舌下静脉注射垂体后叶素0．5μg/kg（药物浓度100μg／L），造成大鼠急性心肌缺血。并立即记录心电图的变化．若ST段较实验前抬高0．1mV或T波低平、双向、倒置或出现心律失常者，则为缺血阳性指标，否则为阴性，缺血指标阴性率高则对心肌缺血的保护作用强。⑤计量资料差异性比较采用方差分析，进行F检验和q检验；计数资料以百分数表示，进行r检验。 结果：昆明种小鼠90只和SD大鼠30只均进入结果分析。①常压缺氧应激实验结果：人参皂苷组和绞股蓝皂苷组小鼠应激存活时间均明显长于生理盐水组（P〈0．05）。②异丙肾上腺素作用下的缺氧应激实验结果：绞股蓝皂苷和人参皂苷对异丙肾上腺素作用下的缺氧应激小鼠无明显影响（P〉0．05）。各组小鼠应激存活时间差异不明显（P〉0．05）。③强迫游泳应激实验结果：各组动物平均游泳时间无差异（P〉0．05）。但人参皂苷和绞股蓝皂苷均能延长小鼠强迫游泳的泳时，泳时延长率分别59％和57％，显示其具有一定的抗疲劳作用趋势。④大鼠急性心肌缺血应激实验结果：绞股蓝皂苷和人参皂苷都可使缺血性心电图变化发生率减少（P〈0．01，0．05），表明两药均能部分对抗垂体后叶素所致的心肌缺血反应，对大鼠急性心肌缺血有保护作用。人参皂苷组和绞股蓝皂苷组缺血指标阴性率明显高于生理盐水组（P〈0．05，0．01）。 结论：绞股蓝皂苷能明显提高小鼠常压缺氧、异丙肾上腺素作用下的缺氧、强迫游泳应激能力及大鼠急性心肌缺血应激能力，且该种作用与人参皂苷类似。     

绞股蓝的药理作用及临床治疗高脂血症研究概况

绞股蓝的主要药效成分是绞股蓝皂苷,具有非常广泛的药理作用,其在治疗高脂血症上也具有很好的疗效。本文概述了绞股蓝的药理作用及临床治疗高脂血症方面的研究概况,为绞股蓝的进一步研究开发和临床用药提供思路和参考。     

绞股蓝泡水可以抗疲劳

早在明代本草书中,就有关于绞股蓝的记载,但当时并未广泛应用。后来有人发现它补虚作用好,又因其生长在南方,绞股蓝也有"南方人参"之称。"北有长白参,南有绞股蓝"的说法就将其与人参并列。绞股蓝的根茎或全草都可入药,能益气健脾、化痰止咳,用于气虚、体倦乏力、食欲不好、口渴咽干、咳嗽痰黏等。此外,它还略有清热解毒作用和辅助抗癌的效果。绞股蓝可直接泡水喝,汤色淡黄清澈,芬芳清香,滋味清淡微苦,回味甘醇,正确服用时较为安全。初次饮用绞股蓝茶水时,应从少量开始,循序渐进。因为其药性寒,建议不要喝隔夜泡的绞股蓝茶,也最好不要空腹喝,否则可能引起腹泻。绞股蓝中     

绞股蓝多糖对小鼠四氯化碳肝损伤的保护作用

目的从绞股蓝中分离纯化绞股蓝多糖,并研究绞股蓝多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用。方法经去蛋白、除果胶、脱色、超滤之后得绞股蓝多糖,以绞股蓝多糖对小鼠连续灌胃7 d之后,腹腔注射0.5%的CCl4花生油溶液,建立肝损伤模型,继续给药2次,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;测定肝组织中丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽(GSH)活性;采用光学显微镜观察肝组织病理组织学变化。结果绞股蓝多糖各剂量组能明显抑制肝损伤小鼠ALT、AST活性的升高;抑制肝组织中MDA含量的升高,提高肝组织中GSH活性;减轻CCl4对肝脏细胞的病理损伤。结论绞股蓝多糖对CCl4造成的小鼠急性肝损伤具有明显保护作用。     

ISSR-PCR鉴别绞股蓝属7种植物

目的 采用ISSR-PCR技术对绞股蓝属(Gynostemma BI.)绞股蓝G.pentaphyllum、五柱绞股蓝G.pentagynum、心籽绞股蓝G.cardiospermum、长梗绞股蓝G.longipes、喙果绞股蓝G.yixingense、疏花绞股蓝G.laxiflorum、广西绞股蓝G.guangxiense 7种药用植物进行DNA分子水平鉴定.方法 CTAB法提取绞股蓝属植物总DNA,以57条ISSR引物进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析.结果 筛选出产物清晰稳定的14条引物,其中引物UBC-873与UBC-895具有较高的多态性条带比率,均可独立区分7种绞股蓝属植物.结论 ISSR-PCR分析可有效区分鉴别常见绞股蓝属植物.     

绞股蓝属植物及其混淆品乌蔹莓的PCR-RFLP鉴别研究

目的：寻找简便、可重复的分子标记方法对绞股蓝属Gynostemma植物及其混淆品乌蔹莓Cayratia japonica进行鉴别。方法：对7种常见药用绞股蓝属植物及其混淆品乌蔹莓的6个cpDNA片段进行PCR 扩增，再利用TaqⅠ，HpaⅡ，EcoRⅠ，RsaⅠ，HhaⅠ，HindⅢ等6种限制性内切酶分别对扩增片段进行消化。结果：36种DNA片段/内切酶组合中，trnK1f -trnK2r片段与RsaⅠ组合可将乌蔹莓从绞股蓝属植物中区分出来，产物清晰、结果稳定。结论：PCR-RFLP分析方法可有效区分常见绞股蓝属植物与其混淆品乌蔹莓。