胰弹力蛋白酶I和核糖核酸酶检测的临床价值

目的　探讨人胰弹力蛋白酶Ⅰ (Humanpancreaticelastase 1 ,HPE1 )放射免疫测定 (Radioimmunoassay ,RIA)和核糖核酸酶(Ribonuclease ,RNase)活性检测的临床价值。方法　参照Satake等建立的改良HPE1RIA和Thomas等的改良酸溶性产物法检测 82例正常成年人和 2 2 2例各类患者血清并分析结果。结果　 82例健康成人HPE1值为 2 3.8( 3.4ng L) ,RNase活性为 5 7.0 3( 1 2 .1 6 μ ml) ;急性胰腺炎和胰腺癌HPE1 值明显高于其他疾病 (P <0 .0 1 )。联合检测HPE1 、RNase活性可提高胰腺癌的检出率 ( 92 .47% )。结论　HPE1 RIA对急性胰腺炎有诊断价值 ,联合检测HPE1 、RNase活性检测对胰腺癌诊断有一定的临床价值     

卵巢恶性肿瘤VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达及其意义

应用原位分子杂交技术研究卵巢恶性肿瘤组织中VEGFmRNA和bFGFmRNA的表达及其意义。结果发现 :浆液性腺癌和内胚窦癌两者表达阳性率高于粘液性腺癌和颗粒细胞瘤 ;临床分期Ⅰ期和未转移病例两者表达阳性率低于临床分期Ⅲ～Ⅳ期和转移病例。结果提示VEGFmRNA和bFGFmRNA表达与卵巢恶性肿瘤病理类型、临床分期和转移发生关系密切 ,阳性表达者可能预后较差。     

乙型肝炎病毒核糖核酸酶H基因表达及鉴定

目的　乙型肝炎病毒核糖核酸酶 H (HBV- RNase H)为该病毒生活周期中负链 DNA合成所必需 ,获取该基因片段及其表达蛋白 ,为进一步的基础研究及应用研究创造条件 .方法　以 HBV全基因片段为模板 ,PCR方法定位扩增 HBV-RNase H特异性片段 ,连接于 p T7Blue克隆载体 ,酶切鉴定并测序后克隆于 p GSTag载体进行原核表达 .PAGE电泳及Western杂交鉴定表达产物 .结果　DNA测序结果显示 PCR扩增产物及载体中插入片段与已知序列相同 ;Western杂交结果表明 ,所表达产物为 GST与 RNase H的融合蛋白 .结论　 HBV- RNase H基因的成功克隆及表达为进一步研究 HBV感染的早期诊断及乙肝患者的治疗奠定了基础     

EFFECT OF VL AND VH CONSENSUS SEQUENCE-SPECIFIC PRIMERS ON THE BINDING AND EXPRESSION OF A MINI- MOLECULE ANTIBODY DIRECTED TOWARDS HUMAN GASTRIC CANCER

Objective. To construct ScFv and Fab from murine anti-gastric cancer monoclonal antibody(mAb) 3H11.Methods. At first,3H11 ScFv and Fab were constructed with Ⅴ genes PCR amplified by degenerate primers for FR1 .The bacterial expressed 3H11 Ab fragments showed no antigen binding activity.Then,phage antibody library and random mutated library were constructed from 3H11 hybfidoma cells and panning selection was performed. Again the i-dentification of positive clone was failed. Finally the N-terminal sequences of Ⅴ regions were resumed to 3H11 original sequences by site-directed mutagenesis via PCR.Restdts. Binding activity to gastric cancer cells was detected only from N-terminal sequence corrected 3H11 ScFv and Fab, though the expression of the Ab fragments was not affected. Correction of either VL or VH N-terminal se-quences could partially resume the antigen binding activity. Conclusion. Sequence changes of Ⅴ region N terminal introduced by PCR may seriously affect antigen binding without affecting the expression of antibody.     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的表达

目的：探讨增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１基因表达改变的相互关系及临床意义。方法：总ＲＮＡ抽提试剂盒抽提总ＲＮＡ,斑点杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平的改变。结果：Ｈ和Ｋ组织中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ（１．１９７±０．２３７,１．２０４±０．２４３）表达均高于正常瘢痕和正常皮肤（０．３２７±０．０８１,０．３３１±０．０７８）,Ｐ＜０．０１;Ｋ选择性地Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,导致ＫⅠ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ比值明显高于Ｈ（８．１６４±０．３００,１．６６６±０．２０１,Ｐ＜０．０１）。结论：Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达类型及强度不同,提示在Ｋ和Ｈ发生发展中具有不同的分子机理：ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕疙瘩的发病机理中具有不同的分子机理;ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理中具有一定作用。     

聚合酶链反应检测细菌16S rRNA基因

根据细菌１６ＳｒＲＮＡ基因的高度保守性,设计合成所有细菌、革兰氏阳性细菌及革兰氏阴性细菌的共同引物,采用聚合酶链反应检测已知细菌１３株,三对引物分别扩增的阳性率为１００％,倍比稀释法能检出细菌的最低浓度为４ＣＦＵ·ｍｌ－１,同时检测临床样本４０份,阳性率为６７５％（２７／４０）,同期细菌培养阳性率为４５％（１８／４０）,二者比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结果提示聚合酶链反应检测细菌１６ＳｒＲＮＡ基因具有高度的特异性和敏感性。     

神经生长因子高亲和力受体互补核糖核酸探针的研究

目的 制备用地高辛标记的神经生长因子高亲和力受体(Trk A)正、反义互补核糖核酸(cRNA)探针的研究。方法 设计Trk A引物，构建pGEM-T Easy-Trk A重组质粒，分别用ApaI和SacI进行酶切得到线性DNA片段，以SP6和T7RNA聚合酶转录合成带有地高辛标记的高比活度的正、反义单链cRNA探针。结果 经斑点杂交证实，该探针敏感性高、特异性强。Trk A-ApaⅠ探针稀释12500倍后的浓度为40ng／μl；Trk A-SacⅠ稀释1：2500倍后的浓度为8ng/μl。结论 成功制备了地高辛标记的Trk A cRNA探针，为毒理学中有关Trk A mRNA在组织、细胞的表达和分布的研究提供了有效工具。     

苦瓜蛋白的药用价值

苦瓜为葫芦科苦瓜属植物，从中提取的蛋白质成分包括：蛋白酶抑制剂、核糖核酸酶、核糖体失活蛋白等，具有比较广泛的药理学作用。MAP30等可以通过使核糖体失活，抑制肿瘤细胞蛋白质的合成，抑制肿瘤细胞的生长；通过抑制T细胞的增长，抑制HIV病毒的复制，达到治疗艾滋病的目的。笔者着重对其抗肿瘤作用及抗艾滋病作用进行了综述，认为苦瓜蛋白成分的开发和应用给恶性肿瘤和艾滋病的治疗提供了新的思路，具有潜在的开发应用前景。     

喝小分子水消除糖尿病

饮用优良的小分子水熏降脂降压效果好熏对治疗心脑动脉粥样硬化、高血脂、高血压症有良好的医疗保健作用,并可降低血黏度、血尿酸和血糖熏这些已通过医院临床应用观察而得到医学专家的肯定和证实,并经千万家用户实际使用而广受赞赏。某些用户反映,意外地祛除了老年性糖尿病。糖尿病是一种“古老”的疾病。2800年前我国医书《黄帝内经》记载的“消渴症”就是指糖尿病。近几十年我国糖尿病发病率大幅上升。糖尿病是一种内分泌与代谢疾病,病因可能与遗传、病毒感染、自身免疫反应等因素有关,目前尚未完全了解。但从现代医学观点看,人体内胰岛素…