灯盏花中单体成分对体外培养大鼠视网膜神经细胞的影响

目的:考察咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷对体外培养视网膜神经细胞存活的影响,探讨灯盏花中具视神经保护作用的有效成分。方法:采用胰酶消化法将18只出生2-3d的乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)和层粘连蛋白(LN)包被的96孔板中。于培养3d后,分别加入PBS液及不同含量的咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷溶液继续培养2d,采用MTT比色法测量其存活细胞的吸收值,同时对部分细胞行Nissel体染色检查。结果:Nissel体染色检查结果表明,培养5d的存活细胞大部分均为神经细胞。与空白对照组比较,咖啡酸含量在3.9-1000μg·mL^-1、东莨菪内酯、野黄芩苷含量在250-1000μg·mL^-1时,其吸收值均明显增加(P<0.05,P<0.01),且有一定的量效关系。结论:咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷三者均能促进体外培养的视网膜神经细胞存活,且咖啡酸活性最强。     

返魂草提取物及其有效成分抗病毒作用的研究

目的:研究返魂草提取物及其有效成分的抗病毒作用.方法:利用鸡胚培养技术、离体和整体实验观察返魂草提取物及其有效成分对流感病毒、呼吸道合胞病毒及腺病毒的影响.结果:返魂草提取物及其有效成分(咖啡酸和绿原酸)对接种鸡胚、MDCK细胞中的流感病毒的复制具有抑制作用,可降低呼吸道合胞病毒、腺病毒感染的Hela细胞的死亡率,可降低流感病毒感染小鼠的死亡率及肺指数.结论:返魂草提取物、绿原酸咖啡酸对流感病毒、呼吸道合胞病毒及腺病毒均有抑制作用.     

陆英化学成分的研究(Ⅰ)

从忍冬科植物陆英Sambucus chinese Lindl.分离鉴定了3β-香树酯醇乙酸酯(Ⅰ)和咖啡酸乙酯(Ⅱ),均为首次从该植物中获得.     

HPLC法同时测定不同来源溪黄草药材中8个水溶性成分的含量

目的:建立同时测定不同品种溪黄草中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素-6,8-二-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和芦丁含量的高效液相色谱法,并比较评价溪黄草各品种药材质量。方法:采用Phenomenex luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.8 m L·min-1,检测波长334 nm;柱温为室温(25℃)。结果:咖啡酸、新西兰牡荆苷2、新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素-6,8-二-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和芦丁线性范围分别为0.09~2.28、0.13~3.11、0.06~1.38、0.18~4.54、0.08~1.97、0.07~1.71、0.06~1.49、0.05~1.31μg;平均回收率(n=6)分别为99.7%、99.5%、100.1%、99.0%、98.4%、98.4%、101.8%、99.4%,RSD分别为0.86%、1.8%、1.8%、1.7%、2.0%、1.2%、1.2%、1.4%。狭基线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素-6,8-二-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和芦丁8个水溶性成分含量分别为0.63~0.33、0.88~6.20、0.44~2.41、2.37~11.19、0.75~5.53、0.76~1.83、0.45~1.78、0.00~2.45 mg·g-1,纤花线纹香茶菜中上述8个水溶性成分含量分别为0.86~3.12、0.76~6.35、0.53~1.47、2.44~11.1、1.96~5.29、0.00~1.82、0.90~5.82、0.00~2.34 mg·g-1,线纹香茶菜中上述8个水溶性成分含量分别为0.61~2.17、0.77~1.56、0.47~1.82、1.97~6.48、1.69~6.72、0.00~0.56、0.00~3.30、0.00~0.84 mg·g-1,溪黄草中上述8个水溶性成分含量分别为0.62~1.33、0.00~0.94、0.44~1.33、0.00~2.13、0.18~1.81、0.00~0.50、0.00~1.11、0.00~0.22 mg·g-1。结论:本研究所建立的方法能鉴别不同来源的溪黄草药材,可用于溪黄草药材的质量控制。     

线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷的含量动态变化研究

目的:建立同时测定线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷含量的方法,以确定线纹香茶菜的最佳采摘期。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.8 ml/min,检测波长为334 nm,柱温为25℃,进样量为15μl。结果:咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷检测的质量浓度线性范围分别为0.23~5.68、0.31~7.76、0.45~11.30μg/ml(r=0.999 9、0.999 8、0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为95.1%~98.9%、97.4%~101.3%、95.5%~98.8%,RSD分别为1.8%、1.7%、1.4%(n=6)。采收于每年4-5月、7-8月的线纹香茶菜中上述3种成分含量最高。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于同时测定线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷的含量;线纹香茶菜的最佳采摘期为每年4-5月、7-8月。     

建立同时测定大鼠血浆中丹参素钠与原儿茶醛和咖啡酸、迷迭香酸和丹酚酸A含量的液质联用方法

目的建立HPLC-MS/MS法测定丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸和丹酚酸A在大鼠血浆中浓度的方法。方法用乙腈蛋白沉淀法处理血浆样本,色谱柱为Synergi Hydro-RP 80 A(150 mm×2 mm,4μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,0~2 min,10%~60%乙腈;2~3 min,60%~95%乙腈;3~6.5 min,95%乙腈;6.5~7 min,95%~10%乙腈;7~12 min,10%乙腈,流速为0.4 m L·min-1;电喷雾电离(ESI)离子源离子化,采用多重反应监测(MRM)方式进行负离子检测。结果丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸和丹酚酸A的线性范围分别为10~1000,5~500,2~200,5~500,10~1000ng·m L-1;定量下限分别为10,5,2,5,10 ng·m L-1。日内精密度(RSD)均小于8.31%,日间RSD均小于12.73%,提取回收率均大于50%。结论本检测方法专属性高,操作简便,稳定性好,可以同时准确地检测丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸和丹酚酸A的血药浓度。     

HPCE法测定小蓟中咖啡酸含量

目的建立高效毛细管电泳法测定小蓟中咖啡酸的含量。方法采用石英毛细管柱,以硼砂溶液为缓冲液,运用电泳法测定小蓟中咖啡酸的含量。结果咖啡酸进样量在0.121~0.968μg范围内(r=0.999 0)线性关系良好,平均回收率为96.33%。结论本方法专属性强,灵敏度高,重复性好,可用于小蓟中咖啡酸的含量测定。     

不同产地溪黄草中酚酸类成分测定和主成分分析

目的建立同时测定不同产地溪黄草中绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸的高效液相色谱法,比较评价不同产地溪黄草质量的差异性。方法采用Cosmosil色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相甲醇–0.1%冰醋酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长330 nm;进样量10μL。采集溪黄草中4个成分定量数据,运用SIMCA13.0软件进行主成分分析(PCA),辅助结合正交偏最小二乘(OPLS)、聚类分析(HCA)进行判别。结果绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸分别在0.014～0.280、0.026～0.520、0.012～0.240、0.240～4.800μg线性关系良好;平均回收率分别为100.63%、99.08%、99.30%、101.23%,RSD值分别为0.92%、1.34%、2.05%、0.86%。经主成分分析得出,咖啡酸和迷迭香酸是两个不同产地溪黄草构成差异的主要原因。结论 HPLC法同时测定溪黄草中4种酚酸类成分绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸较为稳定,其中咖啡酸、迷迭香酸可作为区分不同产地溪黄草的质量标准之一。