生长素释放肽的发现、发展及展望

生长素释放肽（Growth hormone-releasing peptides,GHRP)于70年代末、80年代初依据蛋氨酸－亮氨酸脑啡肽（met-enkephalin）的结构首次合成。以后又合成了数种类型的GHRP，其结构已远不同于met-enkephalin的结构。但均可强烈刺激生长素（growth hormone,GH）分泌。由于1982年下丘脑生长素释放激素的发现，GHRP研究在80年代进展不大。在90年代，由于制药界的努力和驱动，GHRP研究进展较快，非肽类生长素释放刺激剂（non-peptide GH secretagogues）于1994年首次合成，第一个GHRP受体也于1996年首次克隆成功。1999年从胃内分泌细胞首次发现可能的内源性GHRP,命名为ghrelin。Glrelin可激动GHRP受体并刺激GH分泌。最近几年，GHRP对生长素轴以外的外周组织的作用有诸多报道。GHRP的这些外周作用包括对心血管功能、摄食、脂肪细胞分化、胃酸分泌和胃肠运动的调节等。     

MPTP在恒河猴帕金森病动物模型上的应用及其作用机理的研究

本文对1－甲基－4苯基－1，2，3，6－四氢吡啶（MPTP）在恒河猴帕金森病（PD）动物模型上的应用进行了研究，并对B型单胺氧化酶（MAO－B）抑制剂Depreny1和神经肽L－脯氨酸－L－亮氨酸－甘氨酰胺（PLG0拮抗MPTP的神经毒性作用进行了探讨。研究表明：（1）应用MPTP可建立较为理想的恒河猴PD动物模型；（2）预先应用Depreyl能有效地阻止MPTP的神经毒性作用；（3）PLG对MPTP的拮抗作用尚需进一步研究。     

L—亮氨酸对人类胎盘碱性磷酸酶的抑制

目的确定Ｌ－亮氨酸对人类胎盘碱性磷酸酶的抑制类型，并探讨其抑制机理。方法应用分光光度法分别测定有Ｌ－Ｌｅｕ和无Ｌ－Ｌｅｕ存在下的酶活力，根据其活力变化求出酶酶的相对活力；用双倒数作图法，确定Ｌ－Ｌｅｕ对ＰＬＡＰ的抑制类型并求出其抑制常数；同时也观察了ＰＨＣ对抑制作用的影响。     

Active site of trichosanthin acting as a ribosome-inactivating protein

天花粉蛋白核糖体灭活活性部位的定位方法：羟胺特异裂解天花粉蛋白唯一ＡｓｎＧｌｙ肽键．制备性凝胶电泳获ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２二片段．免疫印迹确定天花粉蛋白上不同表位并筛选抗体．兔网织红无细胞系统测定天花粉蛋白及片段对蛋白合成的抑制活性．结果：ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２纯度各达９６６％和８０５％．ＨＡＴｆ１保留完整天花粉蛋白的抑制活性．第１４号和第１６号抗天花粉蛋白单抗与二片段显示不同免疫反应性，并用于封闭试验．第１４号单抗能封闭天花粉蛋白及ＨＡＴｆ１活性，而第１６号单抗则否．结论：天花粉蛋白抑制蛋白质生物合成的活性部位位于ＨＡＴｆ１侧，近二部分交界．     

LGI1:一个与癫痫症和神经胶质瘤分级相关的基因

在2002年,人们首次证明了定位在10p24染色体中的富亮氨酸胶质瘤失活基因1(leucine-rich glioma inactivated gene 1,LGII)的基因突变会造成少见的特发性癫痫合症,即常染色体显性颞癫症(autosomal dominant lateral temporal epilepsy, ADLTE)[1-3].     

硒对~3H—亮氨酸参入大白鼠胰腺组织蛋白和分泌蛋白的影响

本文用低硒的克山病病区粮和病区加硒粮分别饲喂大白鼠12～14周,以[~3H]-亮氨酸参入胰腺组织蛋白和分泌蛋白的速率等为指标,对比观察硒对蛋白质合成的影响。结果发现硒可防止病区粮引起的组织蛋白和分泌蛋白合成障碍及胰淀粉酶活性降低。并结合低硒对胰腺谷胱甘肽氧化酶(GSH—Px)活性下降、脂质过氧化物(LPO)升高,简要分析了硒在维持胰腺蛋白质合成和消化酶活力中的生化作用。     

利用原生质体诱变筛选L-亮氨酸高产菌株的研究

本实验以L-亮氨酸产生菌黄色短杆菌CF-435为出发菌株,制备原生质体,在原生质体形成率和再生率最佳的条件下,利用紫外线、利福平、氯化锂对原生质体进行复合处理,获得再生突变株,从中挑取单独菌落进行摇瓶发酵,筛选出高产菌株UV_3-29,在含有葡萄糖10%的培养基中发酵72h可积累L-亮氨酸26.73mg/ml,比原始菌种产酸量提高26%.     

以13C-亮氨酸作为示踪剂测定兔烧伤后整体蛋白代谢水平的改变

目的:以13C-亮氨酸作为示踪剂,测定兔烫伤后整体蛋白代谢水平的改变。方法:新西兰兔20只,随机分为烧伤组和对照组。适应性喂养3d后,烧伤组建立15%体表面积的Ⅲ度烧伤模型,对照组仅给予麻醉药和抗生素。烫伤后继续喂养7d后行颈动静脉插管及气管切开插管,然后经颈静脉给予NaH13CO3首剂量10μmol/kg加维持量10μmol/(kg·h)2h,再改为13C-亮氨酸首剂量4.2μmol/kg加维持量4.2μmol/(kg·h)3h。收集不同时间点的颈动脉血样和呼气样本,分别测定其中a-酮异己酸和二氧化碳的13C丰度,最后根据公式计算出整体蛋白质的分解速率、合成速率及氮平衡情况。结果:与对照组相比,烧伤组的亮氨酸总更新速率和氧化速率明显升高,分别增加92.3%和175.0%,说明机体整体蛋白分解速率增加、负氮平衡加重(P<0.01);烧伤组整体蛋白合成速率较对照组虽有增加趋势[(4.1±1.5)g/(kg·d)比(2.7±0.9)g/(kg·d)],但无统计学意义(P=0.15)。结论:①成功建立兔高分解代谢模型,烧伤后整体蛋白分解加剧、负氮平衡显著;②13C-亮氨酸示踪法是一种可行的测定整体蛋白质代谢水平的方法。