原位肝移植术后缺血型胆道病变20例

目的探讨原位肝移植术后缺血型胆道病变（ITBL）的病因及预防、诊断和治疗的措施。方法回顾性分析1999年2月至2005年4月间291例次原位肝移植后发生ITBL患者的临床资料。结果291例次原位肝移植术后共发生ITBL 20例（6．9％）。术后发生ITBL的高危因素为：原发病为重型乙型肝炎、供受者ABO血型不符、供肝冷保存时间超过12h和术后肝动脉病变。其发生率分别为12．5％（9／71）、20．0％（2／10）、11．1％（9／81）和60％（3／5）。采用药物、经内镜逆行胰胆管造影（ERCP）介入、胆道外科手术及再次肝移植等方法治疗，有效率为80．0％（16／20）、治愈率为50．0％（10／20），与ITBL相关的病死率为10．0％（2／20），与ITBL相关的移植物功能丧失发生率为20．0％（4／20）。结论针对ITBL的高危因素进行相应处理是预防ITBL的有效措施。胆道造影和核磁共振胆胰管成像对诊断ITBL有很高的敏感性和特异性。根据不同的病因和病变程度采用适当的方法治疗ITBL，可获得良好的疗效。     

腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌 细胞HepG2的研究

目的 ：观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用，为肝癌的基因治疗提供理论基础。 方法 ：将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法（MTT）及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期。 结果 ：复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达; MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期，能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用。结论 ：复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达，促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡，选择性地杀伤肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L02无任何毒性作用。     

肝移植术后糖尿病危险因素分析

目的 探讨肝移植术后糖尿病（PTDM）的发生及发展的危险因素。方法 回顾性分析98例肝移植受者的临床资料。根据其肝移植术后是否发生糖尿病，分为糖尿病组（36例）和非糖尿病组（62例）。以术前和术后可能的9个危险因素作为分析指标，进行这些指标的单因素分析和χ^2检验。结果 在对两组患者的年龄、乙型肝炎病毒（HBV）感染情况、有无肝硬化及肝硬化的程度、术前糖耐量情况、免疫抑制剂的选择及其血药浓度、激素的使用时间的比较分析中发现：术前肝硬化患者PTDM的发生率明显高于无肝硬化者；肝硬化失代偿期患者PTDM的发生率高于代偿期。术前糖耐量异常的患者PTDM的发生率明显高于糖耐量正常者。激素半年内撤离的患者PTDM的发生率明显低于半年内未撤离者。而两组患者的年龄、HBV的感染情况、免疫抑制剂的选择及其血药浓度相比较，差异均无统计学差异。结论 肝硬化、尤其是肝硬化失代偿期，糖耐量异常，长期使用激素是PTDM发生的危险因素。     

移植肝缺血-再灌注损伤程度的评估及其与肝移植患者预后的关系

目的探讨移植肝缺血-再灌注损伤程度的评估方法及其与肝移植患者预后的关系。方法218例良性终末期肝病患者，在移植肝恢复血液灌注后1h采取外周静脉血，测定丙氨酸转氨酶浓度（定义为基础肝功能），同时采用组织气体分析仪测定肝组织的氧分压，并取肝组织活检，计算水变性及坏死细胞百分比，分别对上述3项指标进行评分，再根据各指标得分之和将缺血-再灌注损伤程度划分为5级（0～Ⅳ级），统计围手术期（术后2周内）、术后近期（术后2周至1个月）、术后中远期（1个月以上）的患者死亡率。结果移植肝缺血再灌注损伤程度评为0级者157例（A组），死亡7例（4．5％），71．4％（5／7）死于术后3-6个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅰ级者25例（B组），死亡5例（20．0％），80．0％（4／5）死于术后2周至3个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅱ级者23例（C组），死亡5例（21．7％），80．0％（4／5）死于术后2周至3个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅲ级者8例（D组），死亡7例（87．5％），85．7％（6／7）死于术后1个月内；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅳ级者5例（E组），全部死亡，80．0％（4／5）死于术后1个月内。A组各期死亡率明显低于B组、C组（P〈0．05）和D组、E组（P〈0．01）；B组、C组间各期死亡率的差异无统计学意义（P〉0．05）；B组、C组各期死亡率均低于D组、E组（P〈0．05）。结论基础肝功能、组织氧分压以及水变性和坏死细胞百分比三项指标可基本反映移植肝缺血-再灌注损伤程度；缺血-再灌注损伤评级达Ⅲ～Ⅳ级者术后死亡率较高。     

血管生成抑制剂YH-16联合氟尿嘧啶抑制结直肠癌肝转移的研究

目的探讨血管生成抑制剂YH-16和氟尿嘧啶（5-FU）联合应用对结直肠癌肝转移的抑制作用。方法用MTT方法测定血管生成抑制剂YH-16和5-FU对血管内皮细胞和结肠癌细胞的IC50；建立小鼠肝转移模型。随机分为对照组、YH-16组（又分为低、中、高剂量3组）和5-Fu组及联合治疗组（YH-16加5-FU），术后2周观察各组小鼠肝转移瘤数目、原发灶大小和毒性反应。并检测肝转移瘤血管内皮生长因子（VEGF）的表达和肿瘤微血管密度（MVD）。结果YH-16对结肠癌细胞的IC50是血管内皮细胞的3．38倍，而5-Fu对两种细胞的IC50差别不大。高剂量YH-16组、5-FU组和联合治疗组肝转移瘤数目明显低于对照组。而联合治疗组又低于高剂量YH-16组和5-FU组（均P〈0．05）。YH-16各剂量组的脾原发瘤体积与对照组比较均P〉0．05。差异无统计学意义；而5-FU组和联合治疗组则小于对照组（均P〈0．05）。YH-16的毒性明显低于5-FU（P〈0．05），且两者联合使用其毒性与单用5-FU比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。5-FU组和联合治疗组肝转移瘤组织中VEGF的表达明显降低，中、高剂量YH-16组和5-FU组及联合治疗组肝转移瘤组织中的MVD计数明显降低（均P〈0．05）。结论血管生成抑制剂YH-16明显抑制结直肠癌肝转移，YH-16与5-FU联合应用对结直肠癌肝转移的抑制具有协同作用。     

磁共振成像在肝移植术后并发症诊断中的应用

目的探讨磁共振成像在肝移植并发症诊断中的价值。方法回顾分析11例肝移植术后发生并发症者的磁共振检查影像资料。结果11例患者术后出现皮肤和巩膜黄染、发热以及尿黄等症状，丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转移酶和胆红素升高．经B型超声波检查不能明确原因，采用磁共振（MRI、MRA和MRCP）检查，明确肝动脉吻合口狭窄1例；肝动脉闭塞2例；下腔静脉吻合口狭窄及血栓形成各1例；胆管吻合口狭窄4例，其中1例伴胆汁瘤形成；肝门水平非吻合口狭窄6例；肝坏死2例；肝包膜下血肿及右肾上腺出血各1例；均显示不等量的右侧胸腔积液、腹腔积液及肝门部水肿。结论磁共振一次检查可显示肝内外的多种结构，能为肝移植术后并发症的诊断提供丰富的肝脏、血管、胆道以及肝外结构的图像信息。     

用Lyman NTCP模型分析原发性肝癌三维适形放疗引起的放射性肝病

目的建立原发性肝癌三维大分割适形放疗Lyman NTCP模型的参数和探讨放射性肝病的影响因素。方法109例患者进行大分割三维适形放疗,其中93例患者肝硬化Child-Pugh分级A级,16例为B级。患者每星期治疗3次,每次间隔48h,(4．8±0．5)Gy/次,平均剂量(53．5±5．5)Gy。用最大拟然比方法分别得到Child-A和Child-B患者Lyman模型中的NTCP参数。结果共有17例发生放射性肝病,发生在Child-A组8例,Child-B组9例。多因数分析表明,肝硬化分级程度是与放射性肝病相关的独立因素(P=0．000)。所有患者的NTCP参数为n=1．1,m=0．35,TD_(50) (1)=38．5Gy；Child-A级为n=1．1,m=0．28,TD_(50)(1)=40．5Gy；Child-B级为n=0．7,m=0．43,TD_(50)(1)=23Gy。结论肝硬化分级是预测放射性肝病发生的危险因子。Child-B患者进行适形放疗易引起放射性肝病。     

胰岛素样生长因子结合蛋白、内毒素与肝纤维化

目前胰岛素样生长因子结合蛋白（insulin—like growth—factor—binding protein，IGFBPs）及其超家族功能的研究是国际上的热点。有研究表明IGFBPs与肝纤维化的发生有关，而临床检测和动物实验表明肠源性内毒素血症与肝纤维化的发生发展有着密切关系，同时有研究显示内毒素可诱导循环中某些IGFBPs和其肝脏基因的表达发生变化。     

晚期肝硬化肝脏MR灌注成像的灌注量化分析

目的:使用动态增强MR成像技术获得的肝灌注系数(HPI),评价其在反映肝移植前晚期肝硬化患者肝脏血供特点中的价值。方法:使用1.5T MR扫描仪对100例正常肝脏组和57例晚期肝硬化患者移植前的受体肝脏进行快速团注对比剂(Gd-DTPA)后的斜冠状断面单层2D SPGR序列的MR灌注成像检查,比较对照组和肝硬化组门静脉和肝实质的时间-信号强度变化曲线(TIC)特点及峰值时间。根据腹腔干水平腹主动脉和门静脉主干的TIC为参照设置时间参数,计算受检者肝脏实质动脉期和静脉期的正增强系数(PEI)。设定肝灌注系数(HPI)=动脉期PEI/(动脉期PEI 门脉期PEI)×100%。对两组受检者HPI进行统计分析,根据HPI的受试者工作特性曲线(receiver operator characteristiccurve,ROCcurve)选择诊断肝硬化的HPI参考标准。结果:对照组及肝硬化组门静脉曲线峰值时间分别为(38.66±4.14)s和(55.51±5.31)s,P<0.01;肝实质TIC峰值时间分别为(56.24±4.47)s和(81.39±7.02)s,P<0.01;对照组及肝硬化组肝实质的HPI分别为(18.9±3.5)%和(26.4±5.5)%,P<0.01;应用HPI>21.6%为诊断肝硬化的标准,敏感度为86%,特异度为85%,阳性预测值为77%,阴性预测值为91%,诊断符合率为85%。结论:MR灌注成像技术可以在活体状态下无创分析肝内血供,此技术可用于评估晚期肝硬化患者肝移植前肝脏内的血流灌注。     

热缺血再灌注损伤影响肝脏细胞周期检查点调控的基因表达分析

目的动态观察肝脏热缺血再灌注损伤（WIRI）对细胞周期检查点基因的表达影响，研究其分子机制帮助了解那些与热缺血再灌注相关的疾病。方法采用成组对照的实验设计，利用微阵列芯片和逆转录-聚合酶链反应（PCR）联合分析技术，分析SD大鼠热缺血再灌注损伤处理后的基因表达变化（其中芯片分析8只、RT-PCR定量分析16只）；运用系统生物学分析方法对功能基因进行聚类。结果分别得到了热缺血再灌注损伤处理后肝脏的细胞周期各检查点基因及早期即刻基因表达数据，将其中与细胞周期密切相关的的功能基因（上调的223条、下调的62条变化幅度均大于3倍）做进一步分析。结论肝脏热缺血再灌注损伤通过细胞周期／检查点控制基因影响细胞周期G1／S、G2／M的运行，抑制DNA的合成和染色体的分裂。推测可能影响受损的DNA双链自我修复和后期的组织细胞再生、凋亡。