鲍曼不动杆菌ATCC19606多重耐性分析及耐药基因的克隆

鲍曼不动杆菌已成为重要的院内感染病菌。我们测定了鲍曼不动杆菌ATCC19606的药物最小抑制浓度（MIC），结果显示该菌株对多种抗菌药物都有很高的耐性，如链霉素、诺氟沙星、氯霉素、红霉素、四环索、氨苄西林及一些其他的抗菌染剂。利用大肠埃希菌超敏菌株KAM32作为宿主，从鲍曼不动杆菌ATCC19606染色体DNA中克隆耐药基因，共获得9个使宿主细胞产生耐药性的杂合质粒，其中1个为单一耐药，其余全部为多重耐药。根据药物特异性分析可知，具有不同耐药图谱的杂合质粒携带不同类型的耐药基因。由此揭示鲍曼不动杆菌ATCC19606的多重耐药有多种机制参与。     

乙酸钙-鲍氏不动杆菌临床分离与耐药性的7年监测

目的了解1998~2004年乙酸钙-鲍氏不动杆菌在临床标本中的分离情况及其耐药趋势,为临床感染的预防和治疗提供参考资料。方法回顾分析1998~2004年间所有标本中乙酸钙-鲍氏不动杆菌的分离率,菌株在标本和病区的分布以及对14种抗菌药物的耐药率。结果乙酸钙-鲍氏不动杆菌的分离率有逐年升高的趋势,从1998年的0.18%增至2004年的1.48%;其在呼吸道标本的分离率最高(70.58%),其次是尿液(9.42%)、血液(4.63%);病区分布以重症监护室最高(47.28%),乙酸钙-鲍氏不动杆菌对14种抗菌药物的耐药率,1998年仅有氨曲南>50%,而到2004年仅头孢哌酮/舒巴坦的耐药率<50%,其他13种均>50%;其耐药率均呈递增的趋势,耐药性增幅列前3位分别为:头孢他啶11.1%~88.9%、亚胺培南0~64.8%、复方新诺明0~64.0%。结论乙酸钙-鲍氏不动杆菌的临床分离率在增加,其对多数抗菌药物有较高的耐药性,且耐药率呈逐年上升趋势,尤其是对亚胺培南耐药率的快速增长,应引起临床抗感染治疗的高度重视。     

23例次烧伤病房创面感染鲍氏不动杆菌的临床分析

目的通过对23例次烧伤创面鲍氏不动杆菌培养阳性结果,分析感染原因,指导药物治疗和采取预防措施. 方法对23例次不同面积烧伤患者的创面培养鲍氏不动杆菌的药敏试验结果,与临床资料进行回顾分析. 结果鲍氏不动杆菌的耐药性情况十分严重,仅对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦敏感率稍高,分别为52.2%和30.4%;于6～9月间监护病房危重患者检出次数最多,为15次. 结论合理应用抗生素、加强被褥消毒、强化洗手等是减少烧伤病区内交叉感染的必要措施.     

鲍氏不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因、Ⅰ类整合酶基因及氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解鲍氏不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sulI)、Ⅰ类整合酶基因(intI1)及氨基糖苷类修饰酶(aminoglycoside-modifying enzymes,AMEs)基因存在情况.方法自临床分离20株鲍氏不动杆菌,采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析qacE△1-sulⅠ、intI1及9种AMEs基因.结果 qacE△l-sulⅠ、intⅠ1、aac(3)Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ和aac(6')-Ⅱ基因的阳性率分别为90.0%、20.0%、55.0%、15.0%、35.0%、60.0%和5.0%,而aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、ant(2")-Ⅰ和aph(3')-Ⅵ基因均阴性.结论浙江省立同德医院临床分离的鲍氏不动杆菌多重耐药严重,耐消毒剂-磺胺基因及AMEs基因携带率较高.     

4a间鲍曼不动杆菌临床分析特点及耐药变迁

目的:了解本地区鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药变迁及临床分布情况,为有效的临床治疗和医院感染控制提供实验室依据。方法:采用回顾性调查方法,对2001至2004年间,临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药率及临床分布情况进行统计分析。结果:283株鲍曼不动杆菌78.1%分离自呼吸道标本,77.7%来源于内科病区,感染患者60岁以上的占59.4%。对14种常用抗生素的耐药率总体呈上升趋势,上升幅度最大的为头孢噻肟。到2004年,庆大霉素、哌拉西林、头孢噻肟、头孢他啶、头孢三嗪、环丙沙星和复方新诺明的耐药率均大于50%;介于30%~40%的有阿米卡星、妥布霉素、氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、头孢吡肟;亚胺培南的耐药率最低,为1.1%,其次为哌拉西林/他唑巴坦,为27.5%。此外,多重耐药菌株检出率由23.5%递增至59.3%。结论:动态监测鲍曼不动杆菌的临床分布特点和耐药谱变化,有助于指导临床制定最佳的感染控制措施和经验治疗方案,对减缓细菌耐药性的发展具有积极的意义。     

鲍曼不动杆菌耐药相关基因国内近5年来研究进展

本文介绍鲍曼不动杆菌耐药相关基因国内5a研究进展。     

78株鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度及耐药性分析

目的了解川北地区鲍曼不动杆菌的耐药性。方法细菌耐药性的检测采用琼脂稀释法。收集我院附属医院2005年1月-2007年3月临床分离的鲍曼不动杆菌78株,用琼脂稀释法检测鲍曼不动杆菌对16种抗菌药的最低抑菌浓度(MIC),敏感、中介、耐药的判定采用美国临床实验室标准化协会(CSLI)2006年公布的标准。结果与结论78株鲍曼不动杆菌对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮/舒巴坦和美罗培南耐药率低,分别为37.2%和1.3%,对环丙沙星、庆大霉素、头孢孟多、哌拉西林、头孢他啶、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢吡肟、阿米卡星、头孢西丁、氯霉素、四环素、哌拉西林/他唑巴坦等13种抗菌药的耐药率达62.8%-96.2%。     

IRS-PCR在分析不动杆菌DNA异质性中的应用

目的采用低频限制性位点聚合酶链反应技术（IRS-PCR）,对20株临床分离的不动杆菌DNA进行异质性分析。方法通过PCR扩增稀有限制区附近DNA序列,对20株临床分离的不动杆菌进行基因分型,并与RAPD方法的分型及生化表型结果进行比较分析。结果20株不动杆菌因生化性状不同分为溶血不动杆菌（10株）,洛菲不动杆菌（7株）及其他（3株）;IRS-PCR将该溶血不动杆菌分为5个基因型,洛菲不动杆菌分为4个基因型,其他不动杆菌分为2个基因型;RAPD方法,引物1扩增结果将溶血不动杆菌分为6个基因型,洛菲不动杆菌分为4个基因型,其他不动杆菌分为2个基因型;引物2扩增结果将溶血不动杆菌分为9个基因型,洛菲不动杆菌分为5个基因型,其他不动杆菌分为2个基因型。结论IRS-PCR可用于不动杆菌DNA异质性的分析,且较生化表型精细、准确,与RAPD技术比较两者分辨率相当,但IRS-PCR具有较好的稳定性和重复性,值得临床推广。     

头孢哌酮/舒巴坦与2种抗菌药物联用对多药耐药鲍氏不动杆菌药敏试验研究

目的评价头孢哌酮/舒巴坦与米诺环素、头孢哌酮/舒巴坦与左氧氟沙星联合用药,对110株临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌的体外抗菌效应。方法采用棋盘法设计,琼脂稀释法测定不同浓度组合的抗菌药物对110株临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌最低抑菌浓度,并计算部分抑菌浓度（FIC）指数判定联合效应。结果头孢哌酮/舒巴坦与米诺环素联用后,其MIC50显著降低,FIC指数分布：FIC≤0.5占53%,0.52为0;头孢哌酮/舒巴坦与左氧氟沙星联用后,其MIC50显著降低,FIC指数分布：FIC≤0.5占59%,0.52为0。结论头孢哌酮/舒巴坦无论是与米诺环素还是与左氧氟沙星联用,对多药耐药的鲍氏不动杆菌表现为协同作用和相加作用,并以协同作用为主,无关作用较少,无拮抗作用。     

Relationship between antimicrobial resistance and aminoglycoside- modifying enzyme gene expressions in Acinetobacter baumannii

Background Acinetobacter baumannii is one of the main gram-negative bacilli in clinical practice. Nosocomial infections caused by multi-drug resistance Acinetobacter baumannii is very difficult to treat. This study was designed to investigate the antimicrobial resistance characteristics and four resistant gene expressions of aminoglycoside-modifying enzymes including N-acetyltransferases and O-phosphotransferases in Acinetobacter baumannii. Methods Bacterial identification and antimicrobial susceptibility test were performed by Phoenix^TM system in 247 strains of Acinetobacter baumannii. Minimal inhibitory concentrations (MICs) of seven aminoglycosides including gentamicin, amikacin, kanamycin, tobramycin, netilmicin, neomycin and streptomycin in 15 strains of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii were detected by agar dilution. Four aminoglycoside-modifying enzyme genes were amplified by polymerase chain reaction (PCR) and verified by DNA sequencer. Results The resistance rates of 247 strains of Acinetobacter baumannii against cefotaxime, levofloxacin, piperacillin, aztreonam, tetracycline, ciprofloxacin and chloramphenicol were more than 50%. Imipenem and meropenem showed high antibacterial activities with resistance rates of 3.2% and 4. 1%. MIC50 and MIC90 of gentamicin, amikacin, streptomycin and kanamycin in 15 strains of multi-drug resistant Acinetobacter baumanii were all more than 1024 mg/L, and the resistance rates were 100%, 100%, 100% and 93.3%, respectively. But their resistance rates to tobramycin, netilmicin and neomycin were 86.7%, 93.3% and 46.7%, respectively. Three modifying enzyme genes, including aacC1, aacC2 and aacA4 genes, were found in 15 strains, but aphA6 had not been detected. Their positive rates were 93.3%, 20. 0% and 20. 0%, respectively. These three genes existed simultaneously in No. 19 strain. Nucleotide sequences of aacC1, aacC2 and aacA4 genes shared 100%, 97.9% and 99.7% identities with GenBank genes (AY307113, S68058 and AY307114). Conclusion Multi-drug resistant Acinetobacter baumannii strains are rapidly spreading in our hospital, and their resistance to aminoglycosides may be associated with aminoglycoside-modifying enzyme gene expressions.