治疗耐药鲍曼不动杆菌的抗菌新药

耐药鲍曼不动杆菌导致的院内感染暴发给临床治疗带来极大挑战,因此迫切需要开发新型抗菌药物。本文就近年来 研究开发或批准上市治疗耐药鲍曼不动杆菌的抗菌新药,包括β-内酰胺酶抑制剂、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类及新型 抗菌药物进行综述。     

川北医学院的办学定位依据及解析

本文从学院办学指导思想和办学定位出发,阐述了办学定位的依据:科学发展观的必然要求,地方经济社会发展对人才需要的准确把握,对自身现状的深刻认识。并从理论与实际情况两个层面入手详细解析了定位的依据。     

10-23 脱氧核酶的生物催化功能研究进展

10-23脱氧核酶是利用体外筛选技术得到的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性及特异的序列识别能力,能催化RNA特定部位的切割反应,从mRNA水平上抑制基因表达,具有潜在的治疗应用价值。     

蟾蜍心肌电周期与机械周期的时间关系

本文同步记录了蟾蜍在体心脏的心肌电周期与心肌机械周期活动,初步研究了二者之间的时间关系。结果表明,心房兴奋0.05秒后出现心室机械收缩,心室兴奋0.06秒后出现心室机械收缩。此外,应用肾上腺素的正性变力、变时和变传导作用,对该法进行验证,获得了一定的阳性结果支持。     

外排泵抑制剂对泛耐药鲍曼不动杆菌生物被膜的影响

目的 了解泛耐药鲍曼不动杆菌(XDR AB)生物被膜形成与外排泵基因表达的关系,比较4种外排泵抑制剂对泛耐药鲍曼不动杆菌生物被膜的作用.方法 1)微量肉汤稀释法测定4种外排泵抑制剂(EPIs)PAβN、奥美拉唑、维拉帕米、CCCP对9株泛耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC);并分别测定9株XDR AB生物被膜形成前后对17种抗菌药物的耐药性变化情况.2)结晶紫染色法测定4种外排泵抑制剂对9株XDR AB生物被膜形成的影响.3)实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定9株XDR AB浮游状态与生物被膜状态下外排泵基因adeB、adeG、ade J的表达情况.结果 9株XDR AB除对替加环素、多黏菌素B敏感外,对其余抗菌药物均不同程度耐药.生物被膜状态比浮游状态的XDR AB对于抗菌药物的耐药性进一步增加(1～32倍).4种EPIs均能够抑制XDR AB生物被膜的形成,以PAβN的抑制作用最强(P<0.05).在生物被膜态下,9株XDR AB的外排泵基因adeB和ade J的表达量与浮游状态adeB和ade J的表达量比较明显增加(P<0.05).结论 XDR AB生物被膜状态比浮游状态耐药性进一步增强与部分外排泵基因的高表达相关;4种EPIs对XDR AB生物被膜的形成具有抑制作用.     

硫酸铵反抽提法在纯化β内酰胺酶中的应用

硫酸铵价廉，不易导致蛋白质变性，常用于蛋白的分离和纯化。但硫酸铵抽提的分离纯化作用较弱，主要用于蛋白的浓缩。硫酸铵反抽提是根据在硫酸铵溶液中析出的蛋白质再次溶解有较高的选择性原理而建立的纯化方法。本研究采用配对设计对硫酸铵反抽提和抽提两法在纯化超广谱β内酰胺酶（ESBL）中的作用进行了比较，旨在为临床检验科室纯化ESBL提供简便易行的方法。     

12种β—内酰胺类抗生素对β—内酰胺酶的稳定性研究

实验采用紫外分光光度法测定了(1)11株国际标准产酶菌的β—内酰胺酶活性;(2)11种β—内酰胺酶对12种β—内酰胺类抗生素的相对水解率;(3)CP—45899对11种酶的抑酶率。结果表明:酶K—1和TEM—2活性分别为699和319单位外,其余酶活性在22—72单位之间。12种抗生素中,第三代头孢菌素(除CPZ外)的酶稳定性最好;第二代头孢菌素中CXM的酶稳定性明显优于CMD和CPZ(P<0.01)。第一代头孢菌素和青霉素类易被酶水解。CP—458991ug/ml对多种β—内酰胺酶显示抑制作用,对CRD、CMD具有保护作用。     

CEFTAZIDIME耐药细菌的β-内酰胺酶研究

应用药物梯度琼脂筛选法获得绿脓杆菌和阴沟杆菌的Ceftazidime耐药菌株(MIC≥64μg/ml)。采用紫外分光光度法检测了耐药菌的β-内酰胺酶活性,酶对12种β-内酰胺抗生素水解的“底物轮廓”以及抑酶活性;应用超薄层分析等电聚焦电泳技术检测了β-内酰胺酶的等电点(pI),并与标准产酶菌株的β-内酰胺酶进行了比较。结果提示:细菌对Ceftazidime耐药后,β-内酰胺酶活性增加13～107倍;这类β-内酰胺酶具有如下特点:(1)水解头孢菌素类强于水解青霉素类;(2)舒巴克坦(5μg/ml)对这类酶无抑制作用,而同等剂量的邻氯青霉素却能明显抑制,(3)pI均≥8.0,与标准质粒介导的β-内酰胺酶的性质不同,符合染色体介导的头孢菌素酶的性质。此外,作者发现pI为8.2或8.4的4株耐药菌的β-内酰胺酶尚未见文献报道。     

细菌对头孢菌素“牵制”耐药机制的实验研究

应用分光光度计,检测了体外培养基中细菌在头孢噻吩、Ceftazidime、β-内酰胺酶及酶抑制剂邻氯青霉素单独和相互作用下的浊度变化。分别单用头孢噻吩(10MIC)和Ceftazidime(15MIC)均可溶解细菌;当加入微量酶液则可明显拮抗。上述实验系统中同时加用邻氯青霉素(1/16MIC)则可翻转酶对头孢噻吩和Ceftazidime溶菌作用的拮抗而出现溶菌作用。但当头孢噻吩、Ceftazidime分别与酶在菌液中培养10分钟或30分钟后,再加等量邻氯青霉素时,仅能翻转酶对Ceftazidime的拮抗,重新再现溶菌作用,而此时头孢噻吩的溶菌作用则不能再现。结果表明,细菌β—内酰胺酶对第一代和第三代头孢菌素导致耐药的机制不同。该实验为第三代头孢菌素的非水解耐药机制提供了重要依据。     

耐药质粒消除的研究概况与展望

质粒是细菌内染色体外具有独立复制能力的对细菌生存非必需的小型共价闭合环状双链DNA分子。耐药质粒上携带着耐药基因 ,赋予了细菌对某些抗生素耐药。耐药质粒可自宿主细胞内自发消除 ,但很缓慢 ,其消除频率为 10 - 2 - 10 - 8。含质粒的细菌用正常的培养基培养同时经某些物理、化学方法处理 ,由于质粒的复制受到抑制而染色体的复制仍继续进行 ,故可使子代细菌中的质粒消除 ,其消除频率比自发消除增加 10 0 - 10 0 0 0 0倍[1] 。质粒消除后细菌的耐药性也随之丧失 ,质粒与染色体突变不同 ,质粒消除后其耐药性不再回复 ,除非外源质粒再次…