虫媒病毒及其媒介蚊虫microRNA的研究现状和展望

目前,虫媒病毒引起的严重传染病在世界范围内流行.有关虫媒病毒与媒介蚊虫间相互作用关系成为研究的热点.随着microRNA在动物、植物,甚至是病毒中的发现,使得虫媒病毒与蚊媒之间复杂的分子作用关系有了新的研究视野.本文主要综述虫媒病毒与其媒介蚊虫在microRNA水平上的相关研究进展.     

基于MR图像三维纹理特征的阿尔茨海默病和轻度认知障碍的分类

目的 利用三维纹理特征对阿尔茨海默病(AD)患者和轻度认知障碍(MCI)患者进行分类识别,以探索AD早期诊断新途径。方法 对12例早期AD患者(AD组)、12例MCI患者(MCI组)及12名健康对照者(NC组)的MR图像进行三维纹理分析,采用灰度共生矩阵和游程长矩阵提取每位受试者左、右侧海马结构及胼胝体的三维纹理特征,选取三组间存在显著性差异的纹理参数作为特征变量,采用支持向量机(SVM)方法对各组进行分类,利用留一法估算分类准确率。结果 对NC组与MCI组、MCI组与AD组、NC组与AD组进行分类识别的最高准确率分别为79.17%、83.33%、91.67%。结论 利用三维纹理分析可分类识别早期AD患者及MCI患者,有助于AD的早期诊断。     

超声速度向量成像技术评价胎儿左心发育不良综合征右心室功能

目的 运用超声速度向量成像技术(VVI)评估胎儿左心发育不良综合征(HLHS)右心室功能,探讨其临床意义。 方法 Ⅰ组为56胎HLHS胎儿:分为Ⅰa组(心室腔狭小,30胎)和Ⅰb组(心室腔不可见,26胎),Ⅱ组为147胎正常胎儿(正常对照组)。通过Syngo US Workplace VVI工作站处理胎儿标准四腔心二维动态图,获得右心室心肌的运动参数,包括应变(S)、收缩期应变率(SRs)、舒张期应变率(SRd)、收缩期达峰速度(Vs)、舒张期达峰速度(Vd)。 结果 Ⅰ组与对照组比较,右心室心肌各参数差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰa和Ⅰb组比较,右心室心肌各参数差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ组Vs与孕周呈正相关(r=0.835,P<0.05),Vd与孕周无显著相关性(r=0.013,P>0.05)。 结论 HLHS胎儿右心室收缩功能增强,舒张功能受损,孕中晚期Vs随孕周增加的程度高于正常胎儿。VVI为探讨胎儿心肌发育的生理及病理学机制提供了一种新的方法。     

速度向量成像技术评价病毒性心肌炎患者左心室扭转运动

目的 探讨采用速度向量成像(VVI)技术定量评价病毒性心肌炎(VMC)患者左心室扭转运动的临床价值。 方法 对27例VMC患者(VMC组)及27名正常人(正常对照组)进行常规超声心动图检查并采集左心室短轴切面图像后,使用VVI技术分析左心室扭转运动参数,并检测所有受试者血浆氮末端脑钠素前体(NT-proBNP)的含量,分析VMC患者左心室扭转参数的变化与血浆NT-proBNP浓度变化的相关性。 结果 VMC患者左心室扭转参数均小于正常对照组(P均<0.05),且扭转角度和速度下降程度与射血分数的改变具有较好的相关性;VMC患者左心室扭转参数的变化与其血浆NT-proBNP浓度测值呈负相关。 结论 VMC患者左心室扭转运动变化与心功能及血浆NT-proBNP的变化明显相关。测量扭转运动参数可为临床评定VMC患者心功能、指导治疗及判断预后提供重要信息。     

基于可见反射光谱法的中医舌诊定量与归类分析研究

目的：应用可见反射光谱方法对舌尖舌质的舌象进行数据采集,探讨中医舌诊对舌质淡白色、淡红色、红色、绛色的定量与归类方法。方法：由舌尖的可见光反射光谱数据计算反演出98位测试对象的舌尖色品坐标及色分布,依据舌尖舌色主要受红光波段能量分布影响的特征,对590～780nm红光范围舌象光谱进行舌尖舌色的计量与分类研究。结果：舌尖舌色数据计算反演于CIE1931色度图,有利于形象地比较不同样本之间的差异性;舌质的可见光反射光谱归一化后,有利于样本间数据的比较与分析;通过670nm光谱能量强度与590～780nm红色色域光谱能量比实现了舌质舌色的量化,并与临床的舌质淡白色、淡红色、红色、绛色有很好的对应准确率。结论：采用可见反射光谱法采集舌象建立的两种舌质舌色中针对红色的量化方法可以根据量化值的差异进行不同舌象变化的区域划分,为中医舌诊的客观化提供有益的参考     

一种新型慢病毒载体制备体系的改进

目的完善已初步建立的以痘病毒为辅助病毒的慢病毒载体(LV)瞬时制备体系。方法通过同源重组质粒pZIPPY-NEO/GUS,将vTF7-3痘病毒D13L基因的ORF通过同源重组被新霉素基因(neo)以及可视性筛选基因(GUS)替代,制备D13L缺陷性痘病毒(vTF7-3-ΔD13L)。结果经RT-PCR鉴定,D13L基因被完全敲除。制备体系中将vTF7-3-ΔD13L代替vTF7-3后,制备体系培养上清经RT-PCR、Western blotting分别检测到慢病毒载体特异性RNA序列以及特征性p24蛋白的存在,提示系统可以正常制备出慢病毒载体颗粒,并进一步评价了慢病毒载体的感染性。此外,对此系统的动力学特征也进行了初步分析。结论 vTF7-3-ΔD13L制备成功,通过此系统可制备出没有复制性痘病毒污染的慢病毒载体,本研究为该系统的大规模应用奠定了客观基础。     

人酸性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及鉴定

目的构建人酸性成纤维细胞生长因子真核表达载体pEGFP-N1-haFGF。方法 PCR扩增人酸性成纤维细胞生长因子（haFGF）基因,BglⅡ和HindⅢ双酶切后克隆入真核表达载体pEGFP-N1,构建haFGF真核表达载体pEGFP-N1-haFGF,并经限制性酶谱分析和DNA测序对重组表达载体的正确性进行鉴定。结果重组真核基因表达载体pEGFP-N1-haFGF经限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ酶切,DNA电泳显示465 bp的haFGF目的片段和4 700 bp的pEGFP-N1载体片段,重组载体经DNA测序显示所克隆的haFGF基因核苷酸顺序与Genbank中记载的haFGF序列一致。结论本实验成功构建人酸性成纤维细胞生长因子真核表达载体,为进一步研究haFGF的功能奠定基础。     

辐射敏感性新基因UHRF1真核表达载体的构建及鉴定

目的构建UHRF1的真核表达载体,并验证其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达。方法采用RT-PCR方法,从乳腺癌细胞MCF-7的总cDNA中扩增出2.3kb的UHRF1基因的cDNA片段,经限制性内切酶KpnⅠ与XhoⅠ双酶切,定向克隆到真核表达载体pcDNA3中,构建重组质粒pcDNA3（＋）-UHRF1,利用限制性内切酶双酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;构建成功的重组质粒,经脂质体Lipofactamin2000介导转染MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆,以RT-PCR和Western blot检测UHRF1的mRNA和蛋白的表达。结果获得全长约为2.3kb的UHRF1基因片段;重组质粒经限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ酶切、电泳后显示2.3kb的UHRF1目的片段和5.4kb的pcDNA3载体片段,即UHRF1基因的cDNA已正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中;UHRF1转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后的RT-PCR和Western blot的结果显示：UHRF1的mRNA和蛋白水平均呈现高表达。结论成功构建UHRF1基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定基础。     

速度向量成像技术评价正常人左室舒张功能及其参考值范围

目的探讨应用速度向量成像技术(VVI)评价正常人的左室舒张功能并确定其正常参考值范围。方法结合超声、NT-BNP、临床症状等指标筛选健康人97名,使用西门子公司的Acuson Sequoia C512超声心动仪,采用VVI测量静息状态下左室二尖瓣环水平6个壁:室间隔、侧壁、前壁、下壁、前间隔、后壁的心肌舒张早期速度(E),脱机后进入VVI工作站操作界面采用盲法对图像进行VVI分析并计算平均值Em,测出E/Em,对正常人群的参考值范围给出参考界定。结果 97例正常人E/Em的参考值范围(单侧界限取95%界限)为(1,22.935);男性、女性E/Em参考值范围分别为(1,22.300)和(1,24.766);50岁以下男性、女性E/Em参考值范围分别为(1,22.413)和(1,24.314);50岁以上男性、女性E/Em参考值范围分别为(1,15.410)和(1,24.870)。结论 VVI作为一种新的超声技术,是无创性评价左室舒张功能的好方法,为临床准确评价左室舒张功能提供了一种可靠手段。     

Sendai virus vector-mediated brain-derived neurotrophic factor expression ameliorates memory deficits and synaptic degeneration in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease

Growing evidence suggests that decreased brain-derived neurotrophic factor (BDNF) levels are associated with Alzheimer's disease (AD) pathogenesis. Therefore, BDNF gene therapy is considered to be a promising therapeutic strategy for treating AD. Sendai virus (SeV) is a type I parainfluenza virus that does not interact with host chromosomes because of its strict cytoplasmic life cycle. Although SeV is nonpathogenic in primates, including humans, its infectivity for neurons is strong. Here we demonstrate that SeV vectors effectively infected neurons, even though they were injected into subcortical white matter. Moreover, SeV vectors significantly induced BDNF expression, ameliorating synaptic degeneration and memory deficits in a transgenic mouse model of AD (Tg2576). This is the first study to demonstrate that viral vector administration in white matter is sufficient to restore cognitive function in vivo. These results also support the feasibility of using SeV vectors for gene therapy targeting the brain.