RP-HPLC法同时测定虎杖提取物中4种组分含量

目的 建立RP-HPLC法测定虎杖提取物中白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚的含量.方法 采用Kromasil C8色谱柱,以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱.流速为1 mL/min;检测波长为290nm;进样量为20μL;柱温为30℃.结果 虎杖提取物中白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚分别在10.54...     

虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤小鼠的保护作用

目的 观察虎杖苷对盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）所致脓毒症诱导的急性肾损伤小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法 建立小鼠CLP诱导的脓毒症致急性肾损伤模型,随后用不同剂量的虎杖苷（50、100、300 mg/kg）干预,观察小鼠一般情况,并于手术24 h后,用试剂盒方法测定血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平,ELISA法测定血清白细胞介素-6（IL-6）表达量,Western blotting法检测肾脏诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白水平,并取肾脏组织进行病理分析。结果 与模型组相比,虎杖苷明显改善小鼠一般情况,同时降低血清BUN、Cr、IL-6及肾脏中iNOS蛋白水平,缓解肾脏组织损伤,并呈一定的剂量依赖关系。结论 虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抑制血清IL-6及肾脏中iNOS蛋白表达有关。     

虎杖苷对脂多糖介导的肺泡上皮细胞线粒体损伤的影响

目的探讨虎杖苷对脂多糖(LPS)介导的肺泡上皮线粒体损伤的影响及可能机制。方法 A549细胞分为4组:对照组为细胞仅接受0.1%DMSO处理7 h;模型组为细胞给予DMSO预处理,1 h后与LPS(5 mg/L)共孵育6 h;治疗组为细胞接受虎杖苷(50μmol/L)预处理,1 h后与LPS(5 mg/L)共孵育6 h;抑制剂组为细胞接受沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)抑制剂(50μmol/L 3-TYP)及虎杖苷50μmol/L预处理,1 h后与LPS(5 mg/L)共孵育6 h。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活性;荧光素-荧光素酶法检测细胞ATP水平;钙黄绿素-氯化钴探针检测线粒体通透性转变孔(mPTP)状态;DCFH-DA荧光探针检测细胞活性氧(ROS)水平;荧光探针JC-1检测线粒体膜电位(MMP);Western blotting检测细胞SIRT3表达。应用SPSS 20.0软件进行统计分析。组间比较采用单因素方差分析、LSD两两比较或Tamhane′s T2检验。结果与对照组比较,模型组中SIRT3表达、JC-1红色/绿色荧光、钙黄绿素荧光、ATP水平及细胞活力分别显著下降至(73.3±4.5)%、(54.0±6.5)%、(2 035±217)U、(72.2±4.8)%及(73.7±3.7)%,ROS水平显著增加为(218.0±21.7)%;与模型组比较,治疗组中SIRT3表达、JC-1红色/绿色荧光、钙黄绿素荧光、ATP水平及细胞活力分别显著上升为(86.7±7.6)%、(75.8±7.6)%、(2 571±199)U、(86.7±6.3)%及(83.0±3.6)%,ROS水平显著下降为(180.0±18.1)%;与治疗组比较,抑制剂组中SIRT3表达、JC-1红色/绿色荧光、钙黄绿素荧光、ATP水平及细胞活力分别显著下降为(69.0±7.8)%、(62.8±6.2)%、(2 116±254)U、(72.8±5.8)%及(73.3±4.1)%,ROS水平显著增加为(212.0±18.2)%。结论虎杖苷可以显著改善LPS介导的肺泡上皮线粒体损伤,其机制可能与激活SIRT3有关。     

痛风消片提取工艺优选

目的:优选痛风消片的提取工艺.方法:以虎杖苷含量为指标,选择加水量、提取时间、提取次数为考察因素,采用L9(34)正交试验优选痛风消片的水提取工艺.结果:最佳提取工艺为加10倍量水提取3次,每次2h.结论:优选的提取工艺方法简单、稳定可行.     

虎杖苷对非酒精性脂肪性肝病胰岛素抵抗及氧化应激影响的实验研究

[目的]研究虎杖苷治疗对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）胰岛素抵抗（IR）及氧化应激的影响。[方法]健康雄性SD大鼠47只,随机分为5组：正常组（10只）、模型组（10只）、虎杖苷大剂量组（9只）、虎杖苷小剂量组（9只）和双环醇组（9只）。正常组予标准饲料,其他4组给予高脂饲料造模;5组共喂养10周后,从正常组与模型组中各随机挑选1只大鼠,取肝脏做病理切片,证实大鼠NAFLD模型的形成。正常组与模型组予以0．9％氯化钠灌胃,5ml／次;虎杖苷大、小剂量组分别以200mg／（kg·d）、100mg／（kg·d）的虎杖苷混悬液灌胃;双环醇组以100mg／（kg·d）的双环醇混悬液灌胃。给药4周,期间各组大鼠统一用标准饲料饲养。次日大鼠禁食12h后,腹腔麻醉,抽取腹主动脉血5ml,分离血清,检测大鼠血清中氧化应激因子丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、羟自由基（-OH）、谷胱甘肽一孓转移酶（GST）水平及血清总抗氧化能力（T-AOC）水平;试剂盒检测空腹血糖、胰岛素水平,计算IR指数（IRI）和胰岛素敏感指数;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。[结果]高脂饮食饲养10周后,模型组大鼠血清-OH、MDA、TNF-α较正常组均显著增高（P〈0．05～〈0．01）,GST、T-SOD、T-AOC活性降低（P〈0．01）,与模型组相比,虎杖苷治疗后,-OH、MDA、TNF-α浓度降低（P〈0．05〈0．01）,而T-SOD及T-AOC的活性恢复（P〈0．05～〈0．01）,IR明显改善（P〈0．05～〈0．01）。[结论]IR和氧化应激关系密切,氧化应激是发生IR的重要原因之一,虎杖苷的抗氧化应激效应是改善IR的部分机制。     

虎梅颗粒中薄荷脑薄层色谱鉴别与虎杖苷含量测定

摘要：目的建立虎梅颗粒中薄荷脑薄层色谱鉴别与虎杖苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,以菲罗门C18柱（250mm×4．6mm,5μm）为色谱柱,乙腈-水（23：77）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长为306nm,以外标法检测。结果虎杖苷进样量在0．00392—0．392μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为A=3630174．86174C＋8616．61377（r=0．9999）,平均回收率为99．44％,RSD：0．60％（n=6）。结论该方法专属性强、重现性好,可有效控制虎梅颗粒的质量。     

多指标正交试验法优化肝友胶囊的提取工艺

目的:优化肝友胶囊中火炭母等14味饮片的提取工艺。方法:以虎杖苷和白藜芦醇提取量的综合评分为指标,通过正交试验考察加水量、提取时间、提取次数和浸泡时间对肝友胶囊提取工艺的影响。采用HPLC测定虎杖苷和白藜芦醇含量,流动相甲醇-0.5%磷酸水溶液(35∶65),检测波长306 nm,流速0.9 mL·min-1。结果:最佳提取工艺条件为加8倍量水浸泡0.5 h,提取2次,每次2.0 h;虎杖苷、白藜芦醇平均提取量分别为0.676,0.198 mg·g-1,RSD依次为0.56%,0.91%。结论:该工艺稳定可行,为提高肝友胶囊的质量稳定性和临床用药安全提供实验依据。     

正交试验法优选泰痹颗粒的提取工艺

目的:优选泰痹颗粒的提取工艺。方法:以虎杖苷、大黄素含量及干膏得率的综合评分为指标,采用L9(34)正交试验法考察加水量、提取次数及提取时间对泰痹颗粒水提工艺的影响。采用RP-HPLC测定虎杖苷、大黄素含量,流动相分别为乙腈-水(21∶79)和甲醇-0.1%磷酸溶液(77∶23),检测波长依次为306,254 nm。结果:最佳提取工艺为加10倍量水提取3次,每次1 h;虎杖苷、大黄素质量分数及干膏得率的平均值分别为0.076%,0.510%,25.720%。结论:优选的提取工艺稳定可行,适用于该制剂的工业生产。     

反相高效液相色谱法测定肝力保胶囊中虎杖苷的含量

目的 建立反相高效液相色谱法测定肝力保胶囊中虎杖苷含量,并应用于该制剂质量控制指标。方法 使用：Eclipse Plus C18柱 (4.6 mm×250 mm, 5µm),乙腈:水=15:85为流动相,流速1.0 ml/min,柱温25℃,检测波长306nm,测定8批肝力保胶囊中虎杖苷含量。结果 虎杖苷在6.77-135.4µg/ml （r=0.9999）范围内呈良好线性关系,低、中,高浓度加样回收率分别为97.5% (RSD=1.98 %)、101.8%(RSD = 2.27%)、102.5%( RSD= 0.45%)。 8批肝力保胶囊中虎杖苷含量在2.07-3.50 mg/g之间。结论 该方法简便、准确,重复性好,可用于肝力保胶囊的质量控制。     

和胃降逆胶囊的质量控制研究

目的 建立和胃降逆胶囊的质量标准,为全面提升和胃降逆胶囊的质量控制提供参考。方法 采用薄层色谱（TLC）法定性鉴别和胃降逆胶囊中朱砂七、楤木和蒲公英,采用滴定法测定煅赭石中铁（Fe）,采用高效液相色谱法（HPLC）测定虎杖苷、大黄素、白藜芦醇、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚。结果 朱砂七、楤木和蒲公英的TLC特征斑点清晰,专属性强,分离度好,阴性对照无干扰;样品中Fe的范围为130.665～140.823 mg/g;虎杖苷、大黄素、白藜芦醇、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚在0.071 4～1.714 3、0.035 7～0.857 2、0.071 4～1.714 3、0.035 7～0.857 2、0.014 3～0.342 8 μg与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.26%、96.28%、100.36%、102.71%、101.36%,RSD值分别为0.81%、2.25%、1.71%、2.85%、2.38%。结论 建立的方法可作为和胃降逆胶囊的质量标准。