去甲斑蝥素白蛋白微球在小鼠体内肝靶向作用

目的:研究去甲斑蝥素(NCTD)白蛋白微球在小鼠体内的组织分布、体外细胞毒性及肝靶向性。方法:采用体外细胞毒性和体内全身急性毒性试验方法,评价NCTD白蛋白微球的抗肿瘤活性及其生物安全性;通过小鼠尾静脉给药得到各主要药动学参数,并与NCTD注射液组比较得其靶向效率。结果:NCTD白蛋白微球在肝脏和肾脏的靶向效率分别为2.389 1和0.375 4。NCTD白蛋白微球体内外的生物安全性与其注射液比较无显著差异。体外细胞毒性显示其对肿瘤细胞具有特殊亲和力和靶向释药作用。结论:NCTD白蛋白微球具有肝脏靶向性,能降低肾脏分布,提高药物疗效,降低全身不良反应。     

去甲斑蝥素对高糖刺激的HK-2 细胞FN,Col IV 和TGF-β1 mRNA 及蛋白表达的影响

目的:观察去甲斑蝥素(NCTD) 对高糖刺激的HK-2 细胞外基质和TGF-β1 表达的影响。方法:常规培养HK-2 细胞,无血清DMEM 培养基同步培养24 h,细胞分为正常葡萄糖组(C,D-glucose 5.5 mmol/L)、甘露醇对照组(M,5.5 mmol/L D-glucose+24.5 mmol/L mannitol)、高糖组(HG,30 mmol/L D-glucose)、高糖+NCTD 干预组(30 mmol/L D-glucose+0.5~40 mg/L NCTD)。台盼蓝排斥实验检测NCTD 对高糖刺激的细胞毒性。MTT 法检测NCTD 对高糖刺激的细胞增殖的影响。收集培养6,24,48 h 后细胞总RNA 及蛋白,用RT-PCR 检测细胞FN,Col Ⅳ和TGF-β1 mRNA 的表达,采用Western 印迹检测FN,Col Ⅳ和TGF-β1 蛋白的表达。结果:不同浓度NCTD 作用72 h 后,浓度超过5 mg/L 的NCTD 对高糖环境下的HK-2 细胞有明显的毒性。RT-PCR 和Western 印迹结果显示: 30 mmol/L D- 葡萄糖可引起HK-2 细胞FN,Col Ⅳ和TGF-β1 mRNA 及蛋白水平的升高(P<0.05),而5 mg/L NCTD 可抑制高糖刺激的FN,Col Ⅳ和TGF-β1 的表达(P<0.05)。相同渗透浓度的D- 甘露醇组对上述指标均无影响(P>0.05)。结论:NCTD 能下调HK-2 细胞FN,Col Ⅳ及TGF-β1 的表达。     

壳聚糖抗肿瘤缓释药物的特征

背景：肿瘤严重危害人类的健康,应用有效的化学药物治疗具有重要的意义。目的：分析壳聚糖载药缓释系统抗肿瘤的作用机制及治疗效果。方法：分析壳聚糖抗肿瘤药物缓释材料释放药物机制以及抗肿瘤的作用机制,并分析壳聚糖及其衍生物负载多种抗肿瘤药物如阿霉素、表阿霉素、表柔比星、5一氟尿嘧啶、紫杉醇等的特征及抗肿瘤作用效果。结果与结论：壳聚糖抗肿瘤缓释药物材料具有良好的药物缓释性能以及抗肿瘤性能,能够负载各种常用的抗肿瘤药物,可以控制药物释放速率,延长药物作用时间,维持有效的药物浓度,降低药物的毒副作用,并且对肿瘤及组织器官具有靶向性作用,明显提高了化疗药物对肿瘤的治疗作用。     

去甲斑蝥素抑制大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的研究

目的： 探讨去甲斑蝥素(NCTD)抗大鼠心肌缺血再灌注损伤(IRI)的作用及其机制。方法：以大鼠乳鼠原代心肌细胞和大鼠心肌细胞系H9c2为研究对象,采用MTT法检测不同浓度(0.01、0.05、0.1、0.5、1和5 μg/mL)NCTD预处理对IRI的心肌细胞活力的影响;流式细胞术检测NCTD预处理对IRI的心肌细胞凋亡的影响;Giemsa染色及台盼蓝染色观察NCTD预处理对IRI的心肌细胞形态的影响;Western blot检测NCTD预处理对IRI心肌细胞中程序性细胞死亡因子4(Pdcd4)表达情况;RT-qPCR检测NCTD预处理对IRI心肌细胞microRNA-21(miR-21)的表达情况。结果：NCTD对原代心肌细胞和H9c2心肌细胞IRI具有抑制作用(P<0.01);通过NCTD预处理可以抑制IRI造成的细胞死亡并抑制IRI导致的Pdcd4蛋白表达上调及miR-21下调。结论：NCTD在0.1~0.5 μg/mL浓度下可以抑制心肌细胞IRI,miR-21-Pdcd4信号通路参与心肌细胞IRI及NCTD抑制IRI的作用。     

RP-HPLC测定去甲斑蝥素含量及有关物质

 目的建立去甲斑蝥素原料药含量及有关物质的反相高效液相色谱测定方法。方法色谱柱为YWG-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.016 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(30∶70)(用磷酸调节pH值至3.1),检测波长为213 nm,流速为0.9 mL·min^-1。结果去甲斑蝥素与马来酸酐、去氢去甲斑蝥素及其降解产物均能较好的分离,且线性良好(r分别为0.999 8,0.999 9,0.999 7);检测下限分别为10.0,0.08,0.63 ng(S/N=3),平均回收率(n=9)分别为99.94%,100.43%,100.03%;含量测定方法的线性范围为0.126～4.044 g·L^-1。结论方法简便,结果准确,重复性好,适用于该产品含量及有关物质测定。     

去甲斑蝥素和阿霉素对人胆管癌细胞QBC939的联合作用

目的研究去甲斑蝥素与阿霉素对人胆管癌细胞OBC939体外作用。方法以体外培养的人胆管癌细胞OBC939为实验模型，分别或联合应用不同浓度的去甲斑蝥素与阿霉素作用于癌细胞，光学显微镜下观察药物处理后癌细胞的细胞形态学变化，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法分析药物对癌细胞生长的抑制作用，流式细胞技术测定药物作用后癌细胞的细胞周期分布和凋亡率。结果去甲斑蝥素和阿霉素单独作用于癌细胞时都有增殖抑制作用，且呈剂量依赖性（P〈0．05）。两药合用对癌细胞的细胞毒作用优于两者的单纯相加。去甲斑蝥素和阿霉素两药联合使用可以使癌细胞阻滞于G0／C1期（P〈0．05），凋亡率明显升高（P〈0．05）。结论去甲斑蝥素、阿霉素无论单用或合用对癌细胞的增殖均有抑制作用，均能够明显改变癌细胞的细胞周期分布并诱导癌细胞出现凋亡，但二者合用有协同作用。     

Apoptosis induced by norcantharidin in human tumor cells

INTRODUCTION The antitumor activity of norcantharidin (NCTD),the demethylated analogue of cantharidin, was studied in the early 1980s in China. NCTD has no side effects on urinary organs which cantharidin has shown and is easier to synthesize, and it can inhibit the proliferation of several tumor cell lines as well as transplanted tumors. Clinical trials with NCTD as a monotherapeutic agent indicated that NCTD had beneficial effects in patients with different kinds of digestive tract cancers, such as primary hepatoma,carcinomas of esophagus and gastric cancer, but no depressive effect on bone marrow cells. NCTD can increase the white blood cell count by stimulating the bone marrow and has some antagonistic effect against leukopenia caused by other agents. The exact cellular and molecular mechanisms of NCTD on tumor cells have not yet been elucidated to date[1-3].     

去甲斑蝥素脂质体的制备方法及理化性质研究

 目的筛选最佳去甲斑蝥素脂质体的制备方法并研究其理化性质。方法以包封率为测试指标,考察去甲斑蝥素脂质体的制备方法、药-脂比、胆固醇含量、荷电性、水相pH值、离子强度等因素,观察其显微结构并考察其粒径和粒度分布、体外释放特性及初步稳定性。结果采用薄膜分散法,药-脂比为1:20,磷脂-胆固醇比为2:1、水相介质pH为6.8的条件制备去甲斑螫素脂质体的包封率较高,可达47.5%。粒径约为360nm,体外释放度考察表明,在5h释放达到平衡,释放度为36.9%。在低温4℃条件下放置6个月,包封率和粒径基本没有变化。结论通过工艺和处方考察,优选出最佳的制备条件,制得的去甲斑蝥素脂质体包封率较高,比较稳定。     

去甲斑蝥素-泊洛沙姆407缓释制剂局部注射治疗肿瘤的实验研究

目的:探讨增强去甲斑蝥素的抗癌效果,减轻其毒副反应。方法:选择泊洛沙姆407作为去甲斑蝥素局部用药的载体,将去甲斑蝥素制成缓释剂型,比较不同剂型去甲斑蝥素的毒性及对荷 W(256)肿瘤大鼠的抗肿瘤效果。结果:(1)去甲斑蝥素缓释剂型的毒性明显低于单纯去甲斑蝥素;(2)去甲斑蝥素缓释剂型治疗组大鼠肿瘤生长受到显著抑制,肿瘤组织坏死广泛,治疗后平均生存期延长(与单纯去甲斑蝥素比较,P<0.05);综合疗效优于单纯去甲斑蝥素组。结论:去甲斑蝥素-泊洛沙姆407缓释制剂瘤内注射,通过延缓药物释放,保持肿瘤内有效药物浓度,并避免峰值血药浓度出现而起到增效减毒作用。