基于HPLC指纹图谱研究衢枳壳与不同栽培变种枳壳质量差异

目的 基于HPLC指纹图谱技术和统计学分析方法,比较和评价常山柚橙Citrus aurantium ‘Changshan-huyou’未成熟的干燥果实（衢枳壳）与不同栽培变种酸橙间质量的一致性与差异性。方法 使用Extend XDB C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,检测波长330 nm,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃。通过聚类分析（cluster analysis,CA）和主成分分析（principal component analysis,PCA）对35批样品的指纹图谱进行评价。结果 建立的酸橙枳壳的指纹图谱共有模式获得24个共有峰,并指认出12个目标化合物。13批衢枳壳样品的相似度结果范围0.920～0.947,质量一致性好,不同基原枳壳相似度结果为0.127～0.990,质量差异大。CA将衢枳壳均与酸橙枳壳聚为一类,朱栾和部分黄皮酸橙单独聚为一类,结合PCA获得区分不同基原枳壳的差异性标志物,其中9个已知化合物分别为葡萄内酯水合物、川陈皮素、柚皮苷、桔皮素、木犀草素、新橙皮苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、柚皮...     

高效液相色谱法同时测定枳实中6种成分的含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定枳实药材中柚皮素、橙皮素、马尔敏、6',7'-二羟基香柠檬素、川陈皮素和桔皮素6种成分含量的方法。方法:采用Symmetry C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml·min^-1,检测波长324 nm,柱温30 ℃。结果:柚皮素、橙皮素、马尔敏、6',7'-二羟基香柠檬素、川陈皮素和桔皮素分别在0.105~10.518,0.0865~8.647,0.106~10.620,0.106~10.575,0.131~13.103,0.137~13.743 μg·ml^-1范围内呈良好的线性关系(r≥0.999 7);平均加样回收率分别为96.53%,101.15%,98.94%,97.87%,99.43%,102.87%,RSD均小于3.0%(n=6)。结论:该法简便、快速、重现性好,为枳实药材及饮片的质量控制提供参考。     

一测多评法测定昆仙胶囊中10种黄酮类成分

目的建立一测多评法同时测定昆仙胶囊中10种黄酮类成分的含量,并验证此方法在昆仙胶囊中应用的可行性和适用性。方法采用HPLC法,以金丝桃苷为内参物,建立朝藿苷A、朝藿苷C、朝藿苷B、淫羊藿苷、木犀草素、槲皮素、川陈皮素、山柰酚和宝藿苷I的相对校正因子(fs/i),并利用fs/i计算昆仙胶囊样品中成分的含量,同时用外标法计算各成分的含量,比较两种方法的差异,采用t检验法比较分析昆仙胶囊中10种黄酮类成分的含量。结果朝藿苷B、朝藿苷A、朝藿苷C、淫羊藿苷、木犀草素、槲皮素、川陈皮素、山柰酚和宝藿苷I的fs/i分别为0.756 5、2.199 4、1.232 7、1.008 5、0.635 7、0.576 0、0.487 5、0.545 6、0.675 8。采用一测多评法与外标法得到的10批昆仙胶囊样品含量测定结果 RSD2.0%,无显著差异。结论以金丝桃苷为内参物建立fs/i准确、可行,一测多评法可用于昆仙胶囊的质量评价。     

柑橘提取物诺必擂停对K562、HL-60细胞株增殖抑制作用

目的观察柑橘提取物诺必擂停对白血病细胞株K562、HL-60增殖的抑制作用。方法采用MTT法检测诺必擂停对细胞增殖的抑制率,电镜下观察细胞的形态变化。结果诺必擂停对白血病细胞株K562、HL-60的增殖有显著的抑制作用。电镜下可见细胞凋亡的形态学表现。结论柑橘提取物诺必擂停能够明显抑制白血病细胞株K562、HL-60的体外增殖,其机制与诱导K562、HL-60的凋亡有关。     

“一测多评”法测定陈皮中3种黄酮类成分

目的:建立陈皮中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素"一测多评"的方法,并验证该方法的准确度及可行性。方法:以橙皮苷为指标,计算川陈皮素、桔皮素与橙皮苷的相对校正因子。采用外标法测定陈皮中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素的含量,并利用相对校正因子计算川陈皮素和桔皮素的含量,比较外标法与"一测多评"的结果,以验证"一测多评"法的准确度及可行性。结果:"一测多评"法与外标法共测定22批样品,川陈皮素与桔皮素测定结果 RSD均<2.9%,结果无显著差异。结论:"一测多评"法测定陈皮中的橙皮苷、川陈皮素、桔皮素是准确可行的。     

陈皮黄酮川陈皮素的分离纯化及抗炎止血作用研究

从陈皮中提取川陈皮素并对其抗炎止血作用进行了研究。结果表明,川陈皮素对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀具有明显的抑制作用,能明显缩短小鼠断尾出血时间,表明其具有良好的抗炎和止血作用。     

基于网络药理学的夏黄颗粒治疗阿片类药物所致便秘的作用机制研究

目的 探索夏黄颗粒治疗阿片类药物所致便秘的潜在作用机制。方法 在TCMSP数据库中查找夏黄颗粒的各药材成分和靶点信息，在Genecards数据库中以“opiod constipation”“opioid-induced bowel dysfunction”“opioid-induced constipation”为关键词搜索阿片类药物所致便秘相关靶点，与夏黄颗粒活性靶点映射筛选出共同靶点作为研究靶点；将共同靶点导入STRING数据库中构建靶点相互作用网络图，利用Cytoscape 3.3.0软件进行可视化处理，筛选出核心靶点；借助OmicsBean分析平台与STRING数据库对靶点进行基因本体论（GO）功能和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果 通过筛选得到夏黄颗粒化学成分55个，候选靶基因158个，Venny映射后的共同靶点86个，对应化学成分49个，核心靶点12个，主要化学成分19个。GO功能富集分析得到生物过程条目4 150个，涉及化学刺激性细胞反应、化学反应、生物质量调控等过程；细胞组成条目302个，涉及体元投射、细胞外间隙、全膜等过程；分子功能条目459个，涉及蛋白结合、分子转导活性、酶结合等过程。KEGG富集分析得到与夏黄颗粒作用相关的信号通路149条，涉及糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等；构建了夏黄颗粒核心靶点的“药材-成分-靶点-通路”网络。结论 夏黄颗粒中主要化学成分柚皮素、川陈皮素、芦荟大黄素、大黄酸等可能通过作用于TNF、MAPK3、IL-6、VEGFA、PTGS2等关键蛋白，调节内分泌抵抗、肿瘤坏死因子信号通路等信号通路，发挥通便、解痉、促进胃肠运动等作用，为夏黄颗粒治疗阿片类药物所致便秘提供理论依据，同时与夏黄颗粒药效初步验证结果相吻合。     

柑橘类黄酮诺必擂停对K562裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察柑橘类黄酮诺必擂停对K562裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其在抑制肿瘤血管生成方面的作用与机制.方法:构建l(562裸鼠移植瘤模型,25只裸鼠分为模型组、诺必擂停低、中、高剂量组和阳性对照组(n=5).造模24 h后分别给与1%羧甲基纤维素钠溶剂、诺必擂停(12.5,25,50 mg·kg~(-1))和环磷酰胺(20 mg·kg~(-1)),连续给药18 d,处死,取肿瘤称重计算抑瘤率;免疫组化法检测药物对肿瘤组织VEGF表达及MVD的影响;鸡胚绒毛尿囊膜实验测定药物对血管新生的作用.结果:诺必擂停可显著抑制K562裸鼠移植瘤的生长,抑瘤率达36%～58%,与模型组比较有显著差异(P<0.01);能显著降低肿瘤组织内微血管生成:诺必擂停低、中、高剂量组CD34表达均低于模型组(中、高剂量组分别P<0.05,P<0.01);抑制VEGF的表达:诺必擂停低、中、高剂量组VEGF均低于模型组(分别P<0.05,P<0.01和P<0.01);抑制CAM血管新生:2,4 μg作用下CAM微血管数显著低于对照组(P<0.01).结论:诺必擂停可以抑制K562裸鼠移植瘤的生长以及肿瘤血管的生成,其作用机制可能与下调肿瘤组织VEGF的表达有关.     

川陈皮素对乳腺癌细胞的化疗增敏作用

目的 探讨川陈皮素对乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外化疗增敏作用.方法 以MDA-MB-231细胞为研究对象,MTT法测定细胞增殖抑制率,DNA Ladder、核小体双抗体ELISA和流式细胞仪测定MDA-MB-231细胞凋亡情况,凝胶阻滞实验(EMSA)和ELISA检测川陈皮素对核转录因子(NF-κB)的转录激活的影响.结果 20 μmol/L川陈皮素分别与1 nmol/L紫杉醇或50 ng/mL阿霉素联合使用肿瘤细胞增殖抑制率为75.1%和82.6%,单独使用1 nmol/L紫杉醇或50 ng/mL阿霉素肿瘤细胞增殖抑制率为40%和45%;核小体双抗体夹心酶免疫法和DNA凝胶电泳实验表明川陈皮素与紫杉醇或阿霉素联合用药可明显促进MDA-MB-231细胞的凋亡,EMSA和ELISA实验表明川陈皮素与紫杉醇或阿霉素联合用药可明显抑制NF-κB的转录活性.结论 川陈皮素可以促进临床化疗药物对乳腺癌细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能是通过抑制NF-κB转录作用.     

陈皮、青皮中4种黄酮成分的比较研究

目的比较浙江、湖北、广东产陈皮、青皮药材中橙皮苷、柚皮苷、川陈皮素和橘皮素的量。方法用甲醇超声提取药材,HPLC法测定,采用Waters xbridge C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%醋酸水,梯度洗脱(0~20 min,10%~25%乙腈;20~35 min,25%~70%乙腈;35~38 min,70%~95%乙腈);体积流量1m L/min;柱温30℃;检测波长283 nm。结果陈皮、青皮药材中4种黄酮类成分均以橙皮苷含有量为最高,柚皮苷含有量最低;浙江和湖北产陈皮和青皮中橙皮苷的含有量均符合《中国药典》标准,但两地的青皮中川陈皮素和橘皮素的量要远大于陈皮。广东新会产陈皮和青皮中橙皮苷的含有量均偏低,但它们的川陈皮素和橘皮素的含有量相差不大。结论陈皮和青皮中黄酮类成分含有量的差异可用于解释它们功效之间的区别。