Gellan-based scleral implants of indomethacin: in vitro and in vivo evaluation

Film-type scleral implants of indomethacin with gellan gum were prepared by solvent casting and evaluated for uniformities of thickness, weight, drug content, and surface pH. The effect of plasticizers like glycerol, propylene glycol (PG), and polyethylene glycol 200, and 400 on the void volume of free gellan films (placebo) was calculated from the water content of the films. The drug release from the prepared implants was determined using a static dissolution set-up developed and optimized in our laboratory. Based on the results of the void volume and initial drug release studies, glycerol and PG were selected as the plasticizers for the gellan-based implants. The morphology of the drug-free films (containing 10% and 40% of PG) and the drug-loaded films (before and after dissolution and crosslinked) was studied using scanning electron microscopy. Further, the effect of plasticizer concentration, gellan concentration, effect of crosslinking technique, and duration of crosslinking using calcium chloride on in vitro drug release characteristics were evaluated. Selected batches of the implants were subjected to pharmacodynamic studies, after scleral placement, in uveitis-induced (intravitreal injection of bovine serum albumin 50 μg/ml) rabbit eyes. The release of indomethacin from the prepared implants followed matrix diffusion kinetics with diffusion co-efficient (n) values ranging between 0.358 to 0.708 and seemed to depend on both gellan and plasticizer concentration. Surface crosslinking with 10% calcium chloride for 8 hr retarded drug release (1.42 times less than noncrosslinked implant) and was optimum. The pharmacodynamic studies showed a marked improvement in the various clinical parameters (congestion, keratitis, flare, clot, aqueous cells, and synechias) in the implanted eye compared with the control eye in the rabbits. The scleral implants survived up to 3 weeks in vivo.     

抗病毒颗粒体外抑制呼吸道合胞病毒的实验研究

目的探讨抗病毒颗粒对呼吸道合胞病毒（RSV）的体外抑制作用。方法采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,观察抗病毒颗粒在人喉癌传代细胞（Hep-2）中对RSV的抑制作用。结果在Hep-2细胞中,抗病毒颗粒CC50为9.05,EC50为0.62,TI为2.085,且对RSV抑制作用存在明显的量-效关系。结论抗病毒颗粒在Hep-2细胞中对RSV有明显抑制作用。     

胰腺细针穿刺活检标本三种固定方法的实验研究

目的:探索对内镜超声引导下细针穿刺活检(FNA)获取的胰腺组织的有效固定方法,以提高病理学诊断准确率。方法:应用Wilson-Cook公司的19G超声内镜专用穿刺针对20例胰十二指肠大部切除术获取的新鲜胰腺标本进行体外模拟穿刺,将所获得的穿刺组织按固定方法不同随机分为三组,福尔马林直接固定组(A组)、组织胶粘合后福尔马林固定组(B组)及液基细胞固定组(C组)。送病理科制片后,病理学家根据病例片中组织的完整性及血液细胞污染程度对病理片质量进行评分。结果:三组总分分别有显著统计学差异(P<0.0001),组织量评分分别有显著统计学差异(P=0.0046),血液细胞污染评分分别有极显著统计学差异(P<0.0001)。结论:胰腺穿刺组织经组织胶粘合后福尔马林固定为最佳的固定方式,可以最大程度地减少在组织学检查取样过程中组织的丢失,较好地减少血液细胞污染,所得到标本的完整性最好,有利于提高组织病理学的诊断率。     

体外受精—胚胎移植治疗的妇女婚姻质量的调查

目的:探讨体外受精妇女婚姻质量及其与年龄、婚龄和拟生育时间的关系.方法:选取进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的81例不孕症妇女作为研究组,同期按均衡原选取50例已婚已育妇女为对照组,分别进行一般情况和01son婚姻质量(5因子)问卷调查.结果:研究组妇女婚姻质量5因子总分(179.17±21.44)分高于对照组(167.13±22.21)分,差异具有显著性(P＜0.05).其中婚姻满意度和解决冲突方式2因子分值明显高于对照组(P＜0.05),同时拟生育时间与性生活满意度呈负相关(P＜0.05).结论:IVF妇女的婚姻质量较高,但其性生活满意度随拟生育时间的延长下降.     

扯根菜及其系统提取物抗乙型肝炎病毒体外实验研究

目的:通过体外实验,探讨扯根菜及其系统提取物抗乙肝病毒的作用。方法:将中药扯根菜及其系统提取物作用于HBVDNA转染细胞系2215细胞,通过检测细胞培养液中HBsAg、HBeAg的变化来评价扯根菜及其系统提取物抗乙肝病毒的效果及其可能的药理活性部位。结果:当水提取物浓度为264μg/ml、直接水提取物浓度为57μg/ml时,对2215细胞分泌HBeAg的抑制率分别为54.79％及54.09％,治疗指数(TI)>2。结论:扯根菜水提取物和直接水提取物达到一定浓度时,在体外有一定的抗乙肝病毒作用。     

软组织内热治疗针体外温度变化的特点分析

目的研究软组织内热治疗针在体外的温度分布特点,为进一步研究其在体内温度分布打下基础。方法使用数字测温仪测量软组织内热治疗针在设定42％、50％、60％、80％下加热5min、10min、15min、20min时从针尖至针体末端每隔2cm处的温度。结果内热针针身温度分布分3段：针尖温度中等,距针尖2—6cm段温度较高,距针尖10cm到针体末端段温度较低。针尖到针身8cm段温度差别较小,与设定加热温度接近。针尖温度比设定加热温度低1-2℃。针身温度随加热时间的变化波动不明显。结论软组织内热治疗针在体外加热过程中,针身温度容易控制,稳定性好,针尖温度与设定温度接近。     

人早孕期蜕膜基质细胞及蜕膜腺上皮细胞的分离培养方法

目的:建立一种经济、高效的人早孕期蜕膜基质细胞及蜕膜腺上皮细胞分离、培养方法.方法:胶原酶、胰酶联合消化蜕膜组织,网筛过滤、密度梯度离心及差速贴壁法纯化细胞;免疫细胞化学法鉴定细胞纯度;MTT增殖实验分析细胞体外增殖活力.结果:利用此法可成功体外培养蜕膜基质细胞及蜕膜腺上皮细胞,细胞纯度可达90％以上,并在体外呈现良好的生长状态.结论:此法经济、高效,能够同时获得纯度较高的蜕膜基质细胞及蜕膜腺上皮细胞.     

大鼠膝关节软骨细胞体外培养去分化时间的实验研究

目的:观察大鼠膝关节软骨细胞体外培养后自然退变时间,为骨关节炎研究提供合适靶细胞。方法:大鼠膝关节软骨细胞体外培养,传代,行甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色鉴定软骨细胞,通过Western Blot检测其特征性Ⅱ型胶原的表达情况对传代软骨细胞表型进行鉴定。结果:大鼠膝关节第5代软骨细胞和前4代比较,Ⅱ型胶原表达明显减少(P<0.05),结论:大鼠膝关节软骨细胞体外培养前4代能维持正常的软骨细胞表型,第5代开始发生退变,前4代可以做为软骨细胞研究的靶细胞。     

精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率与卵子体外受精率的相关性研究

目的:通过检测常规体外受精中(in vitro fertilization IVF)精液常规分析正常男性的精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率并分析其与卵子的体外受精率之间的关系,旨在为辅助生殖技术提供几种可靠的判断精子生育力的参数与指标。方法:选择2008年7月1日到2009年12月30日间在广西医科大学第三附属医院生殖医疗中心进行控制性长方案超排卵下行常规IVF-ET的100对夫妻,共100个周期的资料做前瞻性分析,男方精液常规分析属正常范围,分析100份标本精子正常形态率、精子顶体完整率以及精子顶体反应率;观察并记录获卵个数、成熟卵个数、受精卵个数、未受精卵个数,计算其受精率。然后应用计量资料t检验,F检验以及线性相关等统计学方法对精子各项参数与卵子受精率之间的相关性进行分析。结果:实验组1,精液标本按其正常精子形态百分率分为3组,A组:≥5%而<10%、B组:≥10%而<15%、C组:≥15%,卵子体外受精率分别为67.05%、74.51%、82.49%,各组间两两相比差异有统计学意义(P<0.05)。实验组2,按顶体完整率分为两组,A组:≤85%组、B组:>85%组,卵子体外受精率分别为74.25%和82.14%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组3,按顶体反应率分为三组,A组:<14%、B组:≥14%而≤25%、C组:>25%,其卵子体外受精率分别为73.45%、77.19%、82.74%,各组间的差异有统计学意义(P<0.05)。实验组4,按精子正常形态百分率分为两组<15%和>15%组,所对应的顶体完整率分别为79.51%、87.27%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组5,用多重线性回归分析,精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率的标准化系数和P值分别为0.352、0.497、0.271;0.045、0.005、0.017,各个系数均有统计学意义。其中又以顶体完整率的标准化系数最大。结论:1.对于精液常规分析正常的男性,约有50%存在着不同程度的精子形态异常。卵子的受精率随正常形态精子所占百分率的升高而增高;其正常精子形态率≥5%,仍可得到一个较好的体外受精率,因此可行常规体外受精助孕。2.对于精液常规分析正常的男性,约有65%男性的精子顶体完整率>85%,随着精子顶体完整率的增加,卵子的受精率也明显增高;3.对于精液常规分析正常的男性,其78%男性精子顶体反应率≥14%,在体外受精中卵子的受精率随着精子顶体反应率所占百分比的增加而增高;4.上述三者都是影响卵子受精的重要因素,卵子体外受精率与以上三项指标间存在较强的相关关系,而其中又以顶体完整率对卵子体外受精率的影响程度最大。5.对于精液常规分析正常的男性,若正常精子形态率≥5%,在体外受精助孕前,精子顶体完整率和精子顶体反应率的检测,可不作为常规检查项目。     

白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用的实验研究

目的探讨白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用。方法通过体外无菌传代培养人胃癌细胞SGC-7901,将白花蛇舌草提取物以0．05mg/mL、0．1mg／mL、0．15mg／mL、0．2mg／mL四个不同浓度作用于该细胞,24h后采用MTF法检测细胞活性及数量。结果药物组0．05mg／mL和0．1mg／mL浓度孔的吸光值与对照组相比无显著性差异（P〉0．05）,而0．15mg／mL和0．2mg／mL浓度孔的吸光值明显小于对照组（P〈0．05）。结论白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖有一定的抑制作用,且抑制作用的强弱可能跟药物浓度有关,值得进一步研究。