3D analysis of gerbil cochlea with cochlear implant

ObjectivesTo assess a clearing protocol using ethyl cinnamate, an organic substance which is non-toxic for humans, and its value in light-sheet microscopy study of post-implantation cochlear damage in the Mongolian gerbil.Material and methodsThe animals underwent right cochlear implantation in the round window by a retroauricular approach. They were then euthanized 10 weeks after implantation (electrode array in place). The cochleae were prepared according to a 29-day protocol including steps of fixation, microdissection, decalcification, permeabilization, blocking, fluorescent immunolabeling, dehydration and finally clearing in ethyl cinnamate solution. Acquisition of transparent cochleae was performed by light-sheet microscopy. Imaris software was then used for 3D analysis.ResultsThe transparent cochleae had not undergone any shrinkage or any significant architectural changes. Six cochleae were acquired by light-sheet microscopy, allowing good visibility of the whole cochlea. 3D immunofluorescence analysis of the cochlea provided sufficient image resolution for analysis of the spiral ganglion neurons and assessment of the fibrotic tissue reaction surrounding the electrode array.ConclusionThe ethyl cinnamate clearing protocol was effective for light-sheet microscopy analysis of the whole Mongolian gerbil cochlea with the implant left in situ. This technique is suitable for the study of post-implantation cell and tissue damage in the same sample, without the potential toxicity of other methods described to date.     

中国民族药产业现状及发展策略

民族药是中国传统医药的重要组成部分,在发展过程中出现过许多问题,如各民族医药的经验实践未得到有效传承;基础研究薄弱、人才匮乏;民族药资源破坏严重,药材质量参差不齐;国内现行知识产权保护制度不完善,严重制约民族药的发展。鉴于这些问题,笔者提出应加大保护并挖掘古籍,弘扬民族医药文化;强化国家和地方标准建设,加强民族药材规范化种植基地和药材种质资源库的建设;打造民族药知名品牌,发挥品牌的引领作用;加强民族药基础研究,构建产学研一体化体系。通过整合文化、科研、人才、产业的力量,以期促进民族药的蓬勃发展。     

蒙医药清瘟杀黏类方剂组方的知识发现研究＊

目的 本研究对181首“清瘟杀黏”功效的方剂数据集进行数据处理与分析，挖掘蒙医治疗瘟疫组方用药规律。以内蒙古自治区卫生健康委员会发布的《新型冠状病毒肺炎蒙医预防和诊疗方案（试行第三版）》提供的治疗新冠肺炎总方药为基准，从清瘟杀黏数据集中分别为蒙医治疗新冠肺炎的未成熟热期、炽热期普通型、炽热期重症型3个阶段推荐清瘟杀黏方剂。方法 对方剂数据集药物词频与高频药物的药效、药味、药性进行数据统计；使用K-means机器学习算法对蒙医治疗瘟疫高频药物进行聚类分析；通过FP-Growth关联算法，抽取方剂中相关数据实体及各实体间关系；构建协同过滤算法程序，将药物交集最大、欧氏距离最小的方剂作为推荐结果。结果 数据集内单味药出现频率最高的是麝香、草乌、诃子、红花等。对高频药物分析统计发现，钝、轻、重效能出现次数较多，苦味和凉性药物出现频次较高，通过三维聚类分析后得到5类结果。对数据集内所有药物数据进行关联分析，得到9个频繁项集药物组合。协同过滤算法为3个阶段推荐出“敖必德斯音哇其尔-36”等6首清瘟杀黏方剂。结论 本研究将现代信息技术与蒙医传统方剂进行深度融合，开展知识发现研究。蒙医方剂治疗瘟疫组方用药规律挖掘的相关研究结果可以为蒙医药新药数字化和智能化研发提供参考，清瘟杀黏方剂推荐用药方法的构建可以为蒙医临床治疗COVID-19精准施治以及相关科研工作提供思路。同时，本研究希冀助力蒙医传统方剂的弘扬与现代化发展。     

蒙药治疗慢性咳嗽临床观察

目的:观察蒙药治疗慢性咳嗷的临床疗效。方法:纳入110例慢性咳嗷患者,随机分为两组,各55例。对照组采用西医常规治疗;治疗组采用蒙药达利-16味丸、清肺18味丸、巴特尔-7味丸、尼塔哈朱尔、古日古木-13味丸等辨证治疗,早午晚分服,共服2周。观察两组疗效及咳嗽症状积分;疗程结束后随访3个月,比较复发率。结果:治疗组总有效率为92.72%,对照组为76.36%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);两组咳嗷症状积分治疗前后组内比较及治疗后组间比较差异均有统计学意义(f<0.05,P<0.01);治疗组复发率为16.36%,对照组为50.90%,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:蒙药能改善慢性咳嗽临床症状,远期疗效肯定。     

蒙古黄芪有效成分对注意缺陷多动障碍模型大鼠行为学及神经递质的影响

目的研究蒙古黄芪有效成分对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)模型大鼠行为学及神经递质含量的影响,探讨该药治疗ADHD的可能作用机制。方法4周龄,SHR大鼠40只,Wistar大鼠10只。将SHR大鼠随机分为蒙古黄芪多糖组、蒙古黄芪皂苷组、蒙古黄芪黄酮组和模型对照组,每组10只;Wistar大鼠作为阴性对照组。按10 mL/kg体质量的量灌胃。各治疗组分别施以蒙古黄芪多糖0.15 g·kg^-1、蒙古黄芪皂苷0.15 g·kg^-1、蒙古黄芪黄酮0.13 g·kg^-1;模型对照组和阴性对照组以0.01 mL·g-1生理盐水,连续灌胃4周。观测大鼠行为学及神经递质指标。结果开场实验结果显示:各组与模型对照组比较站立次数、理毛次数、粪便粒数显著减少(P<0.05);蒙古黄芪多糖组和皂苷组轨迹分布趋于阴性对照组,中央停留时间较蒙古黄芪黄酮组少。Morris水迷宫结果显示:模型对照组与阴性对照组相比,穿越平台次数较少、停留时间比率和游程比率增加(P<0.05);蒙古黄芪皂苷组穿越平台次数均大于其他各组(P<0.05)。大鼠血清神经递质检测结果显示:模型对照组与阴性对照组相比,五羟色胺(5-HT)、多巴胺D2受体(DR2)、去甲肾上腺素(NA)含量均降低(P<0.05);各药物组DR2含量均比模型对照组高(P<0.05);蒙古黄芪多糖和皂苷组5-HT、NA、DR2含量显著高于蒙古黄芪黄酮组。结论蒙古黄芪多糖、皂苷提高ADHD模型大鼠血清中的DR2、NA、5-HT含量,可能是治疗ADHD的作用机制之一。     

Neuropsychopharmacological profile of Astragalus membranaceous var. mongholicus

ObjectiveTo clarify the neuropharmacological profile of the Mongolian vetch, Astragalus mongholicus (Astragalus membranaceous var. mongholicus; synonym: A. mongholicus), extracts were evaluated for behavioral effects in rats and mice.MethodsAn aqueous extract of A. mongholicus was made by boiling roots from freshly-collected plants in 2.5 volumes (w/v) of water for 60 minutes. An ethanol extract was made by incubating in 70% ethanol for 5 days at 25°C. Effects of the aqueous extracts were evaluated in a forced swimming assessment of antidepressant effects, a hole-board test of exploratory behavior, an analysis of inhibition of aggression following electrical stimulation and influences on amnesia resulting from electroshock. Furthermore, effects of ethanol extracts of A. mongholicus were assessed on l-tryptophan induced twitches (indicating serotonin-mediated effects) and on hypothermia induced by apomorphine (indicating dopamine-mediated interactions) in mice.ResultsPer os (PO) administration of the aqueous decoction of the vetch to rats increased the response in a forced swimming test as reflected in wheel rotations. However, the decoction had no significant effect on the exploratory behavior of rats in the hole-board test. Acute PO administration of the aqueous extract of A. mongholicus decreased the threshold for aggressive behavior and this effect persisted with subchronic administration. Chronic administration of the plant extract suppressed aggression of rats. An ethanol extract of A. mongholicus showed an antiserotoninergic action and had a significant influence on the hypothermia induced by apomorphine.ConclusionA. mongholicus has a variety of potent psychotropic actions, suggesting influences on diverse neurotransmitter systems.     

蒙古族药孟根乌苏（水银）燥“协日乌素”功效的免疫调节机制研究进展

蒙古族药（以下简称蒙药）中燥“协日乌素”药物孟根乌苏（水银）对于自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、牛皮癣等具有显著的疗效。目前，多从镇惊安神功效方面对汞进行药效和毒性研究，对其免疫调节机制研究较少。综述了蒙药孟根乌苏治疗自身免疫性疾病相关报道，并梳理汞对机体的免疫调节作用及汞的形态、摄入剂量对其免疫机制的影响，进而探讨汞的形态演化过程及其可能的自身免疫调节机制，为蒙药“孟根乌苏”药效机制提出合理的解释，为蒙药新剂型的开发提供参考。     

ND3在自发性糖尿病长爪沙鼠5种组织中的表达

目的 分析糖尿病长爪沙鼠5种组织中ND3基因在mRNA和蛋白水平的表达,以期探索长爪沙鼠糖尿病模型中ND3的作用及其靶器官.方法 选取血糖正常对照组沙鼠和糖尿病实验组沙鼠各6只,分别采集动物的肾脏、肝脏、骨骼肌、脑和心脏组织,采用实时定量PCR和Western blotting方法检测在各组织中ND3 mRNA和ND3蛋白水平表达状况.结果 与对照组动物相比,糖尿病长爪沙鼠ND3 mRNA表达水平在肾脏组织中极显著升高,肝脏和肌肉组织中则显著降低,脑组织中仅有降低趋势,而在心脏组织中仅有升高趋势.检测ND3蛋白水平表明,除心脏组织外,其他组织均与mRNA水平表达结果一致.结论 肾脏组织可能是糖尿病长爪沙鼠ND3基因作用的主要部位,同时在其他4种组织中该基因也发挥着一定作用.     

蒙医灸疗对失眠模型小鼠脑组织一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的 探讨施灸“赫依穴”“顶会穴”对睡眠紊乱模型小鼠脑组织中一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法 将36只小白鼠随机分为空白对照组、模型组、治疗组3组,每组12只,模型组与对照组反复定时腹腔内注射咖啡因致小鼠睡眠节律紊乱,治疗组施灸“赫依穴”与“顶会穴”.观察各组小鼠自发活动次数与站立数,检测小鼠脑组织中NO含量与NOS活性.结果 各组小鼠站立次数与自主活动次数比较:治疗组与空白对照组之间无统计学意义(P＞0.05);与模型组比较空白组和治疗组均有统计学意义(P＜0.05).各组小鼠脑组织中NO含量和NOS活性比较:治疗组与空白对照组之间无统计学意义(P＞0.05);与模型组比较,空白对照组和治疗组均有统计学意义(P＜0.05).结论 蒙医灸疗对睡眠紊乱模型小鼠具有镇静催眠作用,其机制可能是通过阻抑NOS诱导产生过量的NO起到神经保护作用.     

长爪沙鼠高脂血症的初步研究

目的 初步建立长爪沙鼠自发型高脂血症模型的血清脂蛋白琼脂糖电泳检测方法和肠菌PCR-DGGE检测方法,用于今后评价沙鼠高脂血症模型.方法 选取444只长爪沙鼠,按性别年龄分组后CO2麻醉,取血液及肝脏标本,用于血清转氨酶、总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）等指标的检测以及肝脏病理学的观察,血清脂蛋白电泳（琼脂糖电泳）进行高脂分类;取小肠、盲肠内容物用PCR-DGGE技术进行肠道微生物多样性检查,同时参照人类的高脂血症分类标准,对高龄组（平均12.81月龄）个体进行了高脂血症的分型.结果 约有10％～30％高龄组沙鼠其血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、TG、TC、血糖（GLU）等指标明显高于低龄组（平均4.72月龄）沙鼠.病理学检查发现,高龄组肝脏出现较为明显的脂肪变性,而低龄组鼠肝脏无异常发现.DGGE结果表明,高龄组与低龄组沙鼠呈现出不同的带谱,后者条带数明显多于前者.高龄鼠从血脂指标上可分为五种类型,以对应于人的Ⅱ a、Ⅱ b、ⅢⅡ、Ⅳ、Ⅴ.结论 高沙鼠的自发性高脂血症或可以作为一个潜在的模型研究,琼脂糖电泳法和PCR-DGGE法或可作为评价高脂血症沙鼠模型的补充方法.