长期培养的大鼠原代肝细胞功能和形态学观察

目的：研究大鼠原代肝细胞长期体外培养后功能和形态的变化。 方法： 采用两步胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞，并用Percoll分离液进行密度梯度离心进一步纯化肝细胞，采用0.4%台盼蓝染色观察细胞活力。然后将细胞接种于HepatoZYME-SFM培养基中培养，定期收集肝细胞培养液上清检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、白蛋白、尿素氮的水平。采用乙氧基试卤灵O-脱乙基酶活性（EROD）方法检测肝细胞P450的CYPⅠA1功能。 结果： 新鲜分离的大鼠肝细胞总数（2-3）×108cells/whole liver，Percoll分离液纯化后活力和纯度在90%以上。HepatoZYME-SFM培养下肝细胞生长良好并保持正常形态。AST、ALT水平在培养3 d后下降显著，6-9 d后趋于相对稳定的低水平。白蛋白的分泌功能、尿素合成能力在18 d内维持在较高水平。可在3-6 d检测到CYPⅠA1酶活性。 结论： Percoll液纯化新分离肝细胞可提高其活率和纯度，HepatoZYME-SFM培养条件下肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力，适合肝细胞的体外长期培养和功能研究。     

骨细胞的功能：生物学研究和机理探讨

骨细胞（osteocyte）是在矿化骨基质内名副其实的骨的细胞（bonecell）。通过细胞突触，骨细胞彼此相连，很可能也与骨髓中某些细胞相接，从而形成三维细胞网络。从骨的超微结构看，骨细胞处于很理想的位置，可以担当骨生理的重要调节因子。然而，由于骨细胞处于矿化骨基质深层，对其功能了解甚少。但随着新技术方法的应用，就有可能对这种成骨细胞系中的终末分化细胞进行深入研究，人们也由此对骨细胞的兴趣大增。骨细胞被认为是骨的机械应力感受器，它有可能参与骨重建。骨细胞能分泌具有调节成骨细胞功能的硬骨素（sclerostin）。一种能降低肾脏磷回吸收的激素——调磷因子FGF23也主要源白骨细胞。随着我们对骨细胞了解的深入，清楚显示，骨细胞不仅能影响局部骨转换活性，而且对全身矿物质的体内平衡也有多种功能。因此，对骨细胞的研究，可以为代谢性骨病的治疗探索新的途径。     

平阳霉素对HeLa细胞的大分子生物合成及超微结构的影响

作者用同位数前体参入法及透射与扫描电镜研究了平阳霉素(博莱霉素A_5)对HeLa细胞大分子生物合成及超微结构的影响。结果显示:平阳霉素能抑制HeLa细胞DNA,RNA和蛋白质的生物合成,对DNA的抑制作用强,ID_(50DNA)为42.77μg/ml。表现为:染色质减少,核内电子密度低,核仁分离及“核仁帽”形成,细胞表面微绒毛消失或变形,最终导致质膜破裂等。作者认为,细胞膜是否为此类药物作用的靶位值得进一步研究。     

睾丸网腺癌6例报告

目的:探讨睾丸网腺癌的发病和临床特点,以做到早诊断、早治疗.方法:报告6例睾丸网腺癌患者的临床资料.6例均为左侧发病,术前均诊断为左侧附睾和睾丸炎,并继发性睾丸鞘膜积液;拟行患侧附睾切除加鞘膜翻转术.术中发现左睾丸质硬有肿物并侵及附睾,遂行睾丸、附睾切除术.结果:术后病理检查诊断为睾丸网腺癌侵及睾丸和附睾;6例术后均获随访.结论:睾丸网腺癌在临床表现独特,根治性睾丸切除辅以根治性腹膜后淋巴结清扫术效果满意,放疗和化疗效果欠佳.     

Neuroimaging and Neurologic Complications after Organ Transplantation

Neurologic complications are common after transplantation and affect 30-60% of transplant recipients. The etiology of most of the posttransplant neurologic disorders is related to the opportunistic infections, both systemic and involving central nervous system (CNS), toxicity of immunosuppressive medications, and the metabolic insult created by the underlying primary disease and the transplant procedure. Neuroimaging studies are one of the key tools in the evaluation and enable early diagnosis of neurologic complications in transplant patients, especially posterior reversible leukoencephalopathy syndrome, central pontine myelinolysis, intracerebral hemorrhage, and fungal and bacterial abscesses. Magnetic resonance imaging (MRI) is the preferred technique, but each of the available neuroimaging techniques offers a unique insight into the pathophysiologic mechanisms underlying neurologic complications of transplantation. The role of neuroimaging in this population includes early detection of calcineurin inhibitor neurotoxicity, opportunistic infections, neoplasia, metabolic disorders, or cerebrovascular diseases. In addition, we can monitor longitudinal progression of disease and treatment response.     

低血容量性休克大鼠心肌细胞Ca2+浓度及膜电位的变化

目的 旨在探讨低血容量性休克大鼠心肌细胞Ca2 浓度及其膜电位的变化.方法 选用Wistar大鼠84只,随机分成休克高渗复苏组(HES组)、生理盐水复苏组(NS组).建立休克模型,按7个时相(休克前、休克、复苏后5、15、30、60、90min)处死大鼠.取心室肌细胞培养传代,用Fluo-4/AM为游离钙荧光探针、JC-1荧光染色,流式细胞仪分别检测不同时相心肌细胞Ca2 浓度及线粒体膜电位.结果 HES组在休克、复苏后5、15、30min各时间点心肌细胞Ca2 浓度较休克前明显升高,其膜电位较休克前显著降低(P＜0.01);在复苏后60、90min心肌细胞Ca2 浓度及线粒体膜电位与休克时比较差异有显著性意义(P＜0.01);NS组在休克、复苏后各个时相与休克前比较心肌细胞Ca2 浓度均明显升高,其膜电位明显下降(P＜0.01);复苏后各时间点与休克时比较差异无显著性意义(P＞0.05);HSE组和NS组在休克后60、90min心肌细胞Ca2 浓度及其膜电位差异有显著性意义(P＜0.01).结论 低血容量性休克可诱发大鼠心肌细胞Ca2 浓度升高,线粒体膜电位下降,导致心肌细胞电生理活动障碍;高渗盐溶液不但可改善低血容量休克时心肌细胞Ca2 浓度,而且能有效地稳定其线粒体膜电位;而生理盐水对心肌细胞Ca2 浓度及其膜电位的作用不显著.     

纯氧和空气复苏患儿24个月随访观察

目的 探讨纯氧和空气复苏对新生儿发育的影响,为新生儿复苏用氧选择提供依据.方法 对2005年1月-2007年1月在保定市妇幼保健院进行窒息复苏的30例患儿在24个月时进行随访,依据复苏用氧浓度分为纯氧复苏组(20例)和空气复苏组(10例),内容包括出生时胎龄、出生体重、身长、头围、阿氏评分(1 min,5 min)、心率(1 min,5 min)、随访时体重、身长、头围及运动发育标志(坐、爬、站、走时间).结果 出生时患儿身体数据差异无统计学意义,24个月随访,患儿身高、体重、头围及运动发育标志差异均无统计学意义(P>0.05).结论 空气复苏对新生儿窒息患者是安全有效的.     

雌二醇对不同性质的乳腺原代细胞增殖影响的体外研究

目的了解在体外条件下不同浓度的雌二醇对不同性质的乳腺组织原代细胞增殖的影响。方法用胶原酶消化法获取乳腺癌患者的各类乳腺组织原代细胞，并用MTT法检测乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织原代细胞在体外培养下，给予不同浓度雌二醇时细胞的生长增殖情况。结果雌激素在体外对雌激素受体（ER）表达阳性的乳腺癌组织及癌旁组织原代细胞有明显的刺激生长作用；对正常乳腺组织细胞的促生长作用相对较弱，而且与肿瘤组织的ER表达情况无关。结论当体内的雌二醇水平≥10μmol／L时，乳腺癌的发病风险和复发风险会显著增加。     

支架及无支架条件下构建组织工程软骨的研究进展

支架材料的研究是组织工程的研究热点之一,软骨细胞复合培养给组织工程软骨的构建带来希望,单一的材料诸如胶原、透明质酸、壳聚糖、纤维蛋白凝胶等已经证明可以与软骨细胞复合培养,两种或者多种材料复合可以提高材料的性能,更好地用于组织工程软骨的构建,并满足软骨缺损修复的需要;同样,在无支架情况下应用软骨细胞聚集培养、沉淀培养的方法,可以构建组织工程软骨,并给软骨缺损的修复带来新希望,但目前的研究较少。两者是组织工程软骨构建的两个主要方向。