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61.
为提高恶性黑色素瘤抗原Mart l2 7-3 5肽的免疫原性 ,有效地在体诱发保护性免疫应答 ,本研究采用负压逆相蒸发技术 (REV) ,制备脂质体 ,包裹Mart 12 7 3 5肽 ,免疫小鼠 ,并与常规应用完全弗氏佐剂 (CFA)相比较 ,观察 2种方法对提高该小肽免疫原性的影响。1 材料与方法1.1 脂质体包裹Mart 1肽的制备与鉴定 根据参考文献 [1]的方法 ,略做改动。所得产物对PBS(4℃ )透析过夜 ,去除游离肽和痕量有机溶剂。终产物用 0 .4 μm滤膜过滤。取部分用磷钨酸负染 ,在透射电镜下放大 4~ 5万倍观察形态 ,余分装保存于 - 70℃冰… 相似文献
62.
MHC-Ⅰ类分子在肿瘤浸润性淋巴细胞识别人黑色素瘤细胞中的作用 总被引:1,自引:1,他引:1
应用人白细胞抗原-A2阳性(HLA-A+2)黑色素瘤病人的瘤块中分离得到的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL),进行HLA-A2限制性TIL抗人黑色素瘤细胞作用的研究。在实验中发现,TIL对自身和同种异体的HLA-A+2黑色素瘤细胞具有杀伤作用,而对HLA-A-2黑色素瘤细胞及HLA-A+2非黑色素瘤细胞无作用。选择重组白细胞介素4(rIL-4)+肿瘤坏死因子α(TNFα)能促进黑色素瘤细胞HLA-A2表达量,并增强TIL对瘤细胞的杀伤活性。抗CD3、抗HLA-ABC和抗HLA-A2单抗具有明显抑制TIL的抗瘤细胞活性。结果表明TIL杀伤黑色素瘤细胞依赖于T细胞受体(TCR)对瘤细胞共同抗原的识别,并有主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子参与。 相似文献
63.
鼻腔恶性黑色素瘤10例临床病理分析 总被引:2,自引:1,他引:2
汪娟 《临床与实验病理学杂志》2008,24(2):222-224
目的 探讨鼻腔恶性黑色素瘤的临床病理特征,并对其诊断和鉴别诊断进行讨论.方法 结合组织形态学结构和免疫组化,对10例鼻腔恶性黑色素瘤进行临床病理分析.结果 10例鼻腔恶性黑色素瘤中男性3例,女性7例,年龄52~83岁,平均年龄59.8岁.肿瘤由上皮样,梭形及未分化小细胞等多种类型的细胞组成.免疫组化标记瘤细胞均表达HMB-45、S-100蛋白、vimentin.结论 鼻腔黏膜恶性黑色素瘤易误诊为其它鼻腔原发性肿瘤,导致临床处理不当,延误治疗,与皮肤恶性黑色素瘤相比,鼻腔黏膜恶性黑色素瘤更具有侵袭性、预后差等特点. 相似文献
64.
目的:克隆MAGE-A9基因并对其进行真核表达及鉴定.方法:通过逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)从原发性肝癌的细胞中扩增MACE-A9基因片段,将该片段克隆在真核表达载体pEGFP-C3中,转染NIH3T3细胞,经G418筛选,构建稳定表达细胞系,并用荧光显微镜和Western blot对其进行鉴定.结果:经RT-PCR扩增出945 bp基因片段,经测序分析并与GenBank的DNA序列比对分析后,在NIH3T3细胞中表达.G418筛选后,细胞荧光信号较强,Western blot检测,细胞中的融合蛋白能够与抗MACE-A9的多抗结合.结论:成功地扩增了肝细胞肝癌中的MAGE-A9基因全长cDNA并进行真核表达与鉴定. 相似文献
65.
目的研究重组纤维连接蛋白多肽CH50对黑色素瘤B16细胞侵袭能力抑制作用及其机制。方法将小鼠黑色素瘤B16细胞用CFSE标记,经尾静脉注射接种小鼠,分别在6 h和24 h取肺组织作冰冻切片,观察肿瘤细胞在肺部聚集和对肺组织侵袭情况;接种15 d后解剖小鼠取肺,观察B16细胞在肺表面形成转移结节数量差异;观察CH50多肽对B16细胞结合纤维连接蛋白和纤维蛋白原的影响;RT-PCR法检测B16细胞中转移相关基因的表达水平;zymography法检测MMP-9水平。结果CH50多肽短时间作用于B16细胞,注射细胞6 h后肺组织荧光结节数显著减少;而作用较长时间,注射细胞24 h后肺组织荧光结节数减少更为明显。CH50多肽处理过的B16细胞在肺部形成转移结节明显减少。CH50多肽能够显著抑制B16细胞结合纤维连接蛋白及结合后的细胞铺展能力及B16细胞结合纤维蛋白原的能力,能够显著下调B16细胞cdc2、αv、β3、MMP-9等基因的表达与MMP-9分泌。结论CH50多肽能够抑制黑色素瘤B16细胞的侵袭能力,抑制瘤细胞与黏附分子结合,抑制转移相关基因的表达,从而使肿瘤细胞的生物学特征发生改变。 相似文献
66.
重组卡介苗及猪苓多糖对荷瘤小鼠巨噬细胞NO释放量的影响 总被引:4,自引:3,他引:4
目的 观察重组卡介苗(rBCG)和中药猪苓多糖(PPS),对荷瘤小鼠空巨噬细胞释放NO的影响。方法 将黑色素瘤细胞株B16接种于小鼠左大腿外侧皮下,建立荷瘤小鼠模型,分别用rBCG-IL-2,rBCG-IL-2 PPSPPS进行局部治疗。于给药后第1,2,3和5wk处死小鼠,用NO酶法测定小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的水平,并观察不同实验组瘤体的变化。结果 rBCG-IL-2组小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的水平最高。与对照组相比较,PPS组小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的水平在第1wk与第2wk增高,第3wk起与对照组释放的NO水平没有差异。rBCG-IL-2组小鼠随给药时间的延长,皮下瘤体逐渐缩小。PPS组小鼠瘤体在给药后第1wk和第2wk生长缓慢,第3wk起瘤体生长速度明显增加。结论 rBCG-IL-2与PPS能提高小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的水平,rBCG-IL-2能明显抑制肿瘤生长。 相似文献
67.
将小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因经过同源重组得到表达GM-CSF的重组痘苗病毒,用此痘苗病毒转染小鼠黑色素瘤细胞,制备黑色素瘤瘤苗裂解物(GM-CSFVMO),C57BL/6小鼠皮下接种B16-F10细胞3天后在注射部位注射瘤苗裂解物,一周后再注射一次。结果发现GM-CSFVMO能够显著地抑制荷瘤小鼠肿瘤结节的生长并明显延长荷瘤小鼠的存活期。用此瘤苗裂解物免疫小鼠两次,间隔一周,免疫一周后给C57BL/6小鼠皮下接种B16-F10细胞,结果肿瘤结节出现时间明显延长,部分小鼠肿瘤不再生长。经GM-CSFVMO治疗或免疫后小鼠的外周血和脾淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤活性明显升高,NK活性变化不明显。本结果提示,诱导机体特异性细胞免疫可能是瘤苗裂解物的抗肿瘤作用机理之一。 相似文献
68.
目的研究重组纤黏连蛋白(FN)多肽CH50对小鼠黑色素瘤B16细胞体内转移的影响,以探讨CH50多肽抑制肿瘤转移的可能分子机制。方法体外培养黑色素瘤B16细胞,用荧光染料CFSE标记,接种脾脏后24h取脾、肝、肺做冰冻切片,观察肿瘤细胞在3种组织中的侵袭情况。从脾脏接种B16细胞,建立体内肿瘤转移动物模型,采用基于流体动力学的体内基因转染方法于小鼠体内表达CH50多肽,RT-PCR检测CH50 mRNA在肝组织的表达,Western印迹检测CH50多肽的表达。通过比较原位肿瘤结节及转移结节在数量、大小、分布上的差异及检测原位肿瘤组织中MMP-2、MMP-9表达差异,观察CH50多肽的治疗效果。结果注射24h后即可在脾脏形成荧光结节。pCH510质粒通过尾静脉注射后,可在肝组织中检测到CH50 mRNA及CH50多肽的表达。从脾脏接种B16细胞后第14天可在脾脏形成原发肿瘤,至第35天肝脏表面已形成转移瘤结节,成功建立了体内器官间(脾转肝)肿瘤转移动物模型。体内转染表达CH50多肽能抑制肿瘤生长、侵袭和转移,抑制原位肿瘤结节中MMP-2、MMP-9的表达。结论CH50多肽可以通过对MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用来抑制黑色素瘤B16细胞的成瘤能力和体内侵袭、转移能力。 相似文献
69.
软组织黑色素瘤1例王兰,唐成栋,陶自坚患者男,25岁。发现有腿肿块1个月。入院检查:右膝外下方们及一2cm×2cm×1.8cm肿块,与皮肤无粘连。行肿块切除术,见肿块位于皮下并与胖骨长肌肌腱粘连,完整切除肿块送病理检查。病理检查巨检:见椭圆结节状肿块... 相似文献
70.
目的: 制备高效价、特异性的兔抗人MAGE-n血清。方法: 对原核表达的MAGE-n蛋白进行纯化, 与弗氏佐剂混合免疫新西兰兔制备抗血清, 用硫酸铵盐析法及溴化氰活化的Sephrose4B(CNBr-ActivatedSephrose4B)亲和层析柱纯化抗血清, 以双向免疫扩散实验、ELISA、Westernblot和免疫组化对兔抗人MAGE-n血清进行鉴定。结果: 经免疫得到高效价的兔抗人MAGE-n血清, 抗血清能够与MAGE-n特异性结合, 免疫组化结果表明MAGE-n是一种胞质蛋白。结论: 用MAGE-n蛋白与弗氏佐剂混合免疫兔, 制备得到高效价的抗血清, 纯化后的特异性兔抗人MAGE-n血清, 为进一步研究MAGE-n在各种组织中的表达奠定了基础。 相似文献